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Activation of J77A.1 macrophages by three phospholipases A2 isolated from bothrops atrox snake venom
Submitted by Claudete Queiroz ([email protected]) on 2016-05-03T17:00:14Z
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Activation of J77A.1 Macrophages by Three Phospholipases A2 Isolated from Bothrops atrox Snake Venom.pdf: 2090853 bytes, checksum: 0669d064c65a39c61c661542c067ee9b (MD5)Approved for entry into archive by EMERSON LEAL ([email protected]) on 2016-05-10T14:32:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunofarmacologia Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunofarmacologia Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunofarmacologia Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunofarmacologia Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunofarmacologia Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunofarmacologia Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunofarmacologia Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunofarmacologia Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.In the present study, we investigated the in vitro effects of two basic myotoxic phospholipases A2 (PLA2), BaTX-I, a catalytically inactive Lys-49 variant, and BaTX-II, a catalytically active Asp-49, and of one acidic myotoxic PLA2, BaPLA2, a catalytically active Asp-49, isolated from Bothrops atrox snake venom, on the activation of J774A.1 macrophages. At noncytotoxic concentrations, the
toxins did not affect the adhesion of the macrophages, nor their ability to detach. The data obtained showed that only BaTXI
stimulated complement receptor-mediated phagocytosis. However, BaTX-I, BaTX-II, and BaPLA2 induced the release of the
superoxide anion by J774A.1 macrophages. Additionally, only BaTX-I raised the lysosomal volume of macrophages after 15 min of incubation. After 30 min, all the phospholipases increased this parameter, which was not observed within 60 min. Moreover, BaTX-I, BaTX-II, and BaPLA2 increased the number of lipid bodies on macrophages submitted to phagocytosis and not submitted to phagocytosis. However, BaTX-II and BaPLA2 induced the release of TNF- by J774A.1 macrophages. Taken together, the data show that, despite differences in enzymatic activity, the three toxins induced inflammatory events and whether the enzyme is acidic or basic does not seem to contribute to these effects
The effect of 3β, 6β, 16β-trihydroxylup- 20(29)-ene lupane compound isolated from Combretum leprosum Mart. on peripheral blood mononuclear cells
Submitted by EMERSON LEAL ([email protected]) on 2016-01-15T15:11:42Z
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The effect of 3β, 6β, 16β.pdf: 1570998 bytes, checksum: 49dcbf933a2c6dc5e2b9fccb9f221ab5 (MD5)Approved for entry into archive by EMERSON LEAL ([email protected]) on 2016-01-15T15:57:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1
The effect of 3β, 6β, 16β.pdf: 1570998 bytes, checksum: 49dcbf933a2c6dc5e2b9fccb9f221ab5 (MD5)Made available in DSpace on 2016-01-15T15:57:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1
The effect of 3β, 6β, 16β.pdf: 1570998 bytes, checksum: 49dcbf933a2c6dc5e2b9fccb9f221ab5 (MD5)
Previous issue date: 2015Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade e Biotecnlogia. Porto Velho, RO, Brazil. / Centro de Pesquisa em Medicina Tropical, Porto Velho, RO, Brazil.Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade e Biotecnlogia. Porto Velho, RO, Brazil. / Laboratório Central de Saúde Pública de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade e Biotecnlogia. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade e Biotecnlogia. Porto Velho, RO, Brazil. / Fundação Oswaldo Cruz. Universidade Federal de Rondônia. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade e Biotecnlogia. Porto Velho, RO, Brazil. / Fundação Oswaldo Cruz. Universidade Federal de Rondônia. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade e Biotecnlogia. Porto Velho, RO, Brazil. / Fundação Oswaldo Cruz. Universidade Federal de Rondônia. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Porto Velho, RO, Brazil.Universidade Estadual de Santa Cruz. Departamento de Ciências Biológicas. Ilhéus, BA, Brazil.Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade e Biotecnlogia. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Departamento de Química. Porto Velho, RO, Brazil.Fundação Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunologia Celular Aplicada à Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biologia Experimental. Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil. / Universidade Federal de Rondônia. Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade e Biotecnlogia. Porto Velho, RO, Brazil. / Fundação Oswaldo Cruz. Universidade Federal de Rondônia. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Departamento de Medicina. Porto Velho, RO, Brazil.Background: The Combretum leprosum Mart. plant, popularly known as mofumbo, is used in folk medicine for inflammation, pain and treatment of wounds. From this species, it is possible to isolate three triterpenes: (3β, 6β,
16β-trihydroxylup-20(29)-ene) called lupane, arjunolic acid and molic acid. In this study, through preclinical tests, the
effect of lupane was evaluated on the cytotoxicity and on the ability to activate cellular function by the production of TNF-α, an inflammatory cytokine, and IL-10, an immuno regulatory cytokine was assessed. The effect of lupane on the enzymes topoisomerase I and II was also evaluated.
Methods: For this reason, peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were obtained and cytotoxicity was assessed by the MTT method at three different times (1, 15 and 24 h), and different concentrations of lupane (0.3, 0.7, 1.5, 6, 3 and 12 μg/mL). The cell function was assessed by the production of TNF-α and IL-10 by PBMCs quantified by specific enzyme immunoassay (ELISA). The activity of topoisomerases was assayed by in vitro biological assays and in silico molecular docking.
Results: The results obtained showed that lupane at concentrations below 1.5 μg/mL was not toxic to the cells. Moreover, lupane was not able to activate cellular functions and did not alter the production of IL-10 and TNF-α. Furthermore, the data showed that lupane has neither interfered in the action of topoisomerase I nor in the action of topoisomerase II.
Conclusion: Based on preclinical results obtained in this study, we highlight that the compound studied (lupane) has
moderate cytotoxicity, does not induce the production of TNF-α and IL-10, and does not act on human topoisomerases.
Based on the results of this study and taking into consideration the reports about the anti-inflammatory and
leishmanicidal activity of 3β, 6β, 16β-trihydroxylup-20(29)-ene, we suggest that this compound may serve as a
biotechnological tool for the treatment of leishmaniasis in the future