Development of high-affinity nanobodies specific for NaV1.4 and NaV1.5 voltage-gated sodium channel isoforms

Voltage-gated sodium channels, NaVs, are responsible for the rapid rise of action potentials in excitable tissues. NaV channel mutations have been implicated in several human genetic diseases, such as hypokalemic periodic paralysis, myotonia, and long-QT and Brugada syndromes. Here, we generated high-affinity anti-NaV nanobodies (Nbs), Nb17 and Nb82, that recognize the NaV1.4 (skeletal muscle) and NaV1.5 (cardiac muscle) channel isoforms. These Nbs were raised in llama (Lama glama) and selected from a phage display library for high affinity to the C-terminal (CT) region of NaV1.4. The Nbs were expressed in Escherichia coli, purified, and bio-physically characterized. Development of high-affinity Nbs specifically targeting a given human NaV isoform has been challenging because they usually show undesired cross-reactivity for different NaV isoforms. Our results show, however, that Nb17 and Nb82 recognize the CTNaV1.4 or CTNaV1.5 over other CTNav isoforms. Kinetic experiments by biolayer interferometry determined that Nb17 and Nb82 bind to the CTNaV1.4 and CTNaV1.5 with high affinity (KD ~ 40-60 nM). In addition, as proof of concept, we show that Nb82 could detect NaV1.4 and NaV1.5 channels in mammalian cells and tissues by Western blot. Furthermore, human embryonic kidney cells expressing holo NaV1.5 channels demonstrated a robust FRET-binding efficiency for Nb17 and Nb82. Our work lays the foundation for developing Nbs as anti-NaV reagents to capture NaVs from cell lysates and as molecular visualization agents for NaVs.Fil: Srinivasan, Lakshmi. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Alzogaray, Vanina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Selvakumar, Dakshnamurthy. Fortébio; Estados UnidosFil: Nathan, Sara. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Yoder, Jesse B.. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Wright, Katharine M.. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Klinke, Sebastian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Nwafor, Justin N.. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Labanda, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Goldbaum, Fernando Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Schön, Arne. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Freire, Ernesto. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Tomaselli, Gordon F.. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Amzel, León Mario. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Ben-Johny, Manu. Columbia University; Estados UnidosFil: Gabelli, Sandra. University Johns Hopkins; Estados Unido

Desarrollo de un suero equino hiperinmune para el tratamiento de COVID-19 en Argentina

La enfermedad denominada COVID-19 es causada por el coronavirus SARS-CoV-2 y es actualmente considerada una pandemia a nivel global. El desarrollo de vacunas es sin duda la mejor estrategia a largo plazo, pero debido a la emergencia sanitaria, existe una necesidad urgente de encontrar soluciones rápidas y efectivas para el tratamiento de la enfermedad. Hasta la fecha, el uso de plasma de convalecientes es la única inmunoterapia disponible para pacientes hospitalizados con COVID-19. El uso de anticuerpos policlonales equinos (EpAbs) es otra alternativa terapéutica interesante. La nueva generación de EpAbs incluyen el procesamiento y purificación de los mismos y la obtención de fragmentos F(ab’)2 con alta pureza y un excelente perfil de seguridad en humanos. Los EpAbs son fáciles de producir, lo cual permite el desarrollo rápido y la elaboración a gran escala de un producto terapéutico. En este trabajo mostramos el desarrollo de un suero terapéutico obtenido luego de la inmunización de caballos utilizando el receptor-binding domain de la glicoproteína Spike del virus. Nuestro producto mostró ser alrededor de 50 veces más potente en ensayos de seroneutralización in vitro que el promedio de los plasmas de convalecientes. Estos resultados nos permitirían testear la seguridad y eficacia de nuestro producto en ensayos clínicos de fase 2/3 a realizarse a partir de julio de 2020 en la zona metropolitana de Buenos Aires, Argentina.The disease named COVID-19, caused by the SARS-CoV-2 coronavirus, is currently generating a global pandemic. Vaccine development is no doubt the best long-term immunological approach, but in the current epidemiologic and health emergency there is a need for rapid and effective solutions. Convalescent plasma is the only antibody-based therapy available for COVID-19 patients to date. Equine polyclonal antibodies (EpAbs) put forward a sound alternative. The new generation of processed and purified EpAbs containing highly purified F(ab’)2 fragments demonstrated to be safe and well tolerated. EpAbs are easy to manufacture allowing a fast development and scaling up for a treatment. Based on these ideas, we present a new therapeutic product obtained after immunization of horses with the receptor-binding domain of the viral Spike glycoprotein. Our product shows around 50 times more potency in in vitro seroneutralization assays than the average of convalescent plasma. This result may allow us to test the safety and efficacy of this product in a phase 2/3 clinical trial to be conducted in July 2020 in the metropolitan area of Buenos Aires, Argentina.Fil: Zylberman, Vanesa. Inmunova; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sanguineti, Santiago. Inmunova; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pontoriero, Andrea. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Higa, Sandra V.. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; ArgentinaFil: Cerutti, Maria Laura. Universidad Nacional de San Martín. Centro de Rediseño e Ingeniería de Proteínas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Morrone Seijo, Susana María. Inmunova; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pardo, Romina Paola. Inmunova; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Muñoz, Luciana. Inmunova; ArgentinaFil: Acuña Intieri, María Eugenia. Universidad Nacional de San Martín. Centro de Rediseño e Ingeniería de Proteínas; ArgentinaFil: Alzogaray, Vanina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Avaro, Martín M.. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Benedetti, Estefanía. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Berguer, Paula Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Bocanera, Laura. mAbxience; ArgentinaFil: Bukata, Lucas. Inmunova; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bustelo, Marina S.. Inmunova; ArgentinaFil: Campos, Ana M.. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Colonna, Mariana. Inmunova; ArgentinaFil: Correa, Elisa. mAbxience; ArgentinaFil: Cragnaz, Lucí­a. mAbxience; ArgentinaFil: Dattero, María E.. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Dellafiore, María Andrea. mAbxience; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Foscaldi, Sabrina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: González, Joaquí­n V.. Inmunova; ArgentinaFil: Guerra, Luciano Lucas. mAbxience; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Klinke, Sebastian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Labanda, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Lauché, Constanza Elena. Inmunova; ArgentinaFil: López, Juan C.. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; ArgentinaFil: Martínez, Anabela M.. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; ArgentinaFil: Otero, Lisandro Horacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Peyric, Elías H.. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; ArgentinaFil: Ponziani, Pablo F.. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; ArgentinaFil: Ramondino, Romina. Inmunova; ArgentinaFil: Rinaldi, Jimena Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Rodrí­guez, Santiago. mAbxience; ArgentinaFil: Russo, Javier E.. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; ArgentinaFil: Russo, Mara Laura. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Saavedra, Soledad Lorena. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Seigelchifer, Mauricio. mAbxience; ArgentinaFil: Sosa, Santiago. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Vilariño, Claudio. Universidad Nacional de San Martín. Centro de Rediseño e Ingeniería de Proteínas; ArgentinaFil: López Biscayart, Patricia. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; ArgentinaFil: Corley, Esteban. mAbxience; ArgentinaFil: Spatz, Linus. Inmunova; ArgentinaFil: Baumeister, Elsa. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Goldbaum, Fernando Alberto. Universidad Nacional de San Martín. Centro de Rediseño e Ingeniería de Proteínas; Argentina. Inmunova; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentin

The allosteric modulation of thyroxine-binding globulin affinity is entropy driven

Background: Thyroxine-binding globulin (TBG) is a non-inhibitory member of the serpin family of proteins whose main structural element is the reactive center loop (RCL), that, upon cleavage by proteases, is inserted into the protein core adopting a β-strand conformation (stressed to relaxed transition, S-to-R). After S-to-R transition thyroxine (T4) affinity decreases. However, crystallographic studies in the presence or absence of the hormone in different states are unable to show significant differences in the structure and interactions of the binding site. Experimental results also suggest the existence of several S states (differing in the number of inserted RCL residues), associated with a differential affinity. Methods: To shed light into the molecular basis that regulates T4 affinity according to the degree of RCL insertion in TBG, we performed extended molecular dynamics simulations combined with several thermodynamic analysis of the T4 binding to TBG in three different S states, and in the R state. Results: Our results show that, despite T4 binding in the protein by similar interactions in all states, a good correlation between the degree of RCL insertion and the binding affinity, driven by a change in TBG conformational entropy, was observed. Conclusion: TBG allosteric regulation is entropy driven. The presence of multiple S states may allow more efficient T4 release due to protease activity. General significance: The presented results are clear examples of how computer simulation methods can reveal the thermodynamic basis of allosteric effects, and provide a general framework for understanding serpin allosteric affinity regulation.Fil: Petruk, Ariel Alcides. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucuman. Instituto Superior de Investigaciones Biologicas; ArgentinaFil: Labanda, María Soledad. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Química Física; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Alvarez, Rosa Maria Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucuman. Instituto Superior de Investigaciones Biologicas; Argentina. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Química Física; ArgentinaFil: Marti, Marcelo Adrian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química, Física de los Materiales, Medioambiente y Energía. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química, Física de los Materiales, Medioambiente y Energía; Argentin

Desarrollo de un suero equino hiperinmune para el tratamiento de COVID-19 en Argentina

Fil: Pontoriero, A. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología. Servicio de Virosis Respiratorias. Centro Nacional de Influenza PAHO/WHO; Argentina.Fil: Baumeister, Elsa. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología. Servicio de Virosis Respiratorias. Centro Nacional de Influenza PAHO/WHO; Argentina.Fil: Campos, Ana. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología. Servicio de Virosis Respiratorias. Centro Nacional de Influenza PAHO/WHO; Argentina.Fil: Avaro, Martín. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología. Servicio de Virosis Respiratorias. Centro Nacional de Influenza PAHO/WHO; Argentina.Fil: Benedetti, Estefanía. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología. Servicio de Virosis Respiratorias. Centro Nacional de Influenza PAHO/WHO; Argentina.Fil: Dattero, María. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología. Servicio de Virosis Respiratorias. Centro Nacional de Influenza PAHO/WHO; ArgentinaFil: Zylberman, Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET); Buenos Aires, Argentina.Fil: Sanguineti, Santiago. INMUNOVA S.A.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Higa, Sandra V. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Cerutti, María L. Universidad Nacional de San Martín. Centro de Rediseño e Ingenieria de Proteínas (CRIP); Buenos Aires, Argentina.Fil: Morrone Seijo, Susana M. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET); Buenos Aires, Argentina.Fil: Pardo, Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET); Buenos Aires, Argentina.Fil: Muñoz, Luciana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET); Buenos Aires, Argentina.Fil: Acuña Intrieri, María E. Universidad Nacional de San Martín. Centro de Rediseño e Ingenieria de Proteínas (CRIP); Buenos Aires, Argentina.Fil: Alzogaray, Vanina A. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBA). Fundación Instituto Leloir. Laboratorio de Inmunología y Microbiología Molecular; Buenos Aires, Argentina.Fil: Berguer, Paula M. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBA). Fundación Instituto Leloir. Laboratorio de Inmunología y Microbiología Molecular; Buenos Aires, Argentina.Fil: Bocanera, Laura. mAbxience; Buenos Aires, Argentina.Fil: Bukata, Lucas. INMUNOVA S.A.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Bustelo, Marina S. INMUNOVA S.A.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Colonna, Mariana. INMUNOVA S.A.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Correa, Elisa. mAbxience; Buenos Aires, Argentina.Fil: Cragnaz, Lucía. mAbxience; Buenos Aires, Argentina.Fil: Dellafiore, María. mAbxience; Buenos Aires, Argentina.Fil: Foscaldi, Sabrina. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBA). Fundación Instituto Leloir. Laboratorio de Inmunología y Microbiología Molecular; Buenos Aires, Argentina.Fil: González, Joaquín V. INMUNOVA S.A.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Guerra, Luciano L. mAbxience; Buenos Aires, Argentina.Fil: Klinke, Sebastián. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBA). Fundación Instituto Leloir. Laboratorio de Inmunología y Microbiología Molecular; Buenos Aires, Argentina.Fil: Labanda, María S. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBA). Fundación Instituto Leloir. Laboratorio de Inmunología y Microbiología Molecular; Buenos Aires, Argentina.Fil: Lauché, Constanza. INMUNOVA S.A.; Buenos Aires, Argentina.Fil: López, Juan C. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Martínez, Anabela M. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Otero, Lisandro H. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBA). Fundación Instituto Leloir. Laboratorio de Inmunología y Microbiología Molecular; Buenos Aires, Argentina.Fil: Peyric, Elías H. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Ponziani, Pablo F. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Ramondino, Romina. INMUNOVA S.A.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Rinaldi, Jimena. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBA). Fundación Instituto Leloir. Laboratorio de Inmunología y Microbiología Molecular; Buenos Aires, Argentina.Fil: Rodríguez, Santiago. mAbxience; Buenos Aires, Argentina.Fil: Russo, Javier E. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Russo, Mara L. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Virología. Servicio de Virosis Respiratorias. Centro Nacional de Influenza PAHO/WHO; Argentina.Fil: Saavedra, Soledad L. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBA). Fundación Instituto Leloir. Laboratorio de Inmunología y Microbiología Molecular; Buenos Aires, Argentina.Fil: Seigelchifer, Mauricio. mAbxience; Buenos Aires, Argentina.Fil: Sosa, Santiago. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBA). Fundación Instituto Leloir. Laboratorio de Inmunología y Microbiología Molecular; Buenos Aires, Argentina.Fil: Vilariño, Claudio. Universidad Nacional de San Martín. Centro de Rediseño e Ingenieria de Proteínas (CRIP); Buenos Aires, Argentina.Fil: López Biscayart, Patricia. Instituto Biológico Argentino S.A.I.C.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Corley, Esteban. mAbxience; Buenos Aires, Argentina.Fil: Spatz, Linus. INMUNOVA S.A.; Buenos Aires, Argentina.Fil: Goldbaum, Fernando A. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBA). Fundación Instituto Leloir. Laboratorio de Inmunología y Microbiología Molecular; Buenos Aires, Argentina.The disease named COVID-19, caused by the SARS-CoV-2 coronavirus, is currently generating a global pandemic. Vaccine development is no doubt the best long-term immunological approach, but in the current epidemiologic and health emergency there is a need for rapid and effective solutions. Convalescent plasma is the only antibody-based therapy available for COVID-19 patients to date. Equine polyclonal antibodies (EpAbs) put forward a sound alternative. The new generation of processed and purified EpAbs containing highly purified F(ab')2 fragments demonstrated to be safe and well tolerated. EpAbs are easy to manufacture allowing a fast development and scaling up for a treatment. Based on these ideas, we present a new therapeutic product obtained after immunization of horses with the receptor-binding domain of the viral Spike glycoprotein. Our product shows around 50 times more potency in in vitro seroneutralization assays than the average of convalescent plasma. This result may allow us to test the safety and efficacy of this product in a phase 2/3 clinical trial to be conducted in July 2020 in the metropolitan area of Buenos Aires, Argentina