Effect of resveratrol and curcumin on LoVo and HaCaT cells treated with aromatic amine PhIP

Obecnie rak jelita grubego jest jednym z głównych rodzajów nowotworów występujących na świecie, zarówno pod względem zachorowalności jak i liczby zgonów. Wśród wielu czynników ryzyka rozwoju tego nowotworu upatruje się nadmierne spożycie mięsa, szczególnie czerwonego. Powstająca podczas obróbki mięsa w bardzo wysokich temperaturach PhIP (2-amino-1-metylo-6-fenyloimidazo[4,5-b]pirydyna) ma właściwości karcynogenne. Metabolity PhIP tworzą addukty z DNA, głównie z zasadą guaninową, co może prowadzić do mutacji punktowych i aberracji chromosomowych. Na szczęście w diecie człowieka występują również związki wykazujące właściwości antynowotworowe, takie jak kurkumina czy resweratrol. Obie te substancje są znane m.in. ze swoich antyoksydacyjnych, proapoptotycznych czy przeciwmiażdżycowych działań. Celem badań niniejszej pracy było określenie wpływu samego PhIP (100 μM) oraz w połączeniu z resweratrolem (5 μM) lub kurkuminą (1 μM) na komórki raka jelita grubego (LoVo) oraz, na stanowiącą kontrolę, linię unieśmiertelnionych keratynocytów (HaCaT). Potwierdzono mutagenne i toksyczne działanie PhIP na obie linie komórkowe za pomocą metody kometowej i testu MTT oraz wykazano brak wpływu PhIP na stres oksydacyjny. PhIP indukuje proces apoptozy jedynie w komórkach linii LoVo, a nie w HaCaT, co potwierdzono za pomocą testu na aktywność kaspaz 3/7 oraz barwienia Aneksyną V/7-AAD. Choć zaobserwowano wzrost poziomu p53 w komórkach LoVo, poziom białka p21 nie uległ zmianie. Zarówno kurkumina jak i resweratrol w połączeniu z PhIP zmniejszają mutagenne działanie aminy w badanych komórkach. Co ciekawe resweratrol, w przeciwieństwie do kurkuminy, zwiększa apoptozę w komórkach LoVo, ale nie w HaCaT.Uzyskane wyniki sugerują, że polifenole mogą chronić organizm przed mutagennym działaniem PhIP, a nawet dodatkowo usuwać komórki nowotworowe na drodze apoptozy.Nowadays, colorectal cancer is one of the main types of cancer occurring in the world, both in terms of morbidity and the number of deaths. Excessive consumption of meat, especially red meat, is seen among many other risk factors for the development of this cancer. PhIP (2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo [4,5-b] pyridine), which is formed during meat processing at very high temperatures, has carcinogenic properties. PhIP metabolites form adducts with DNA, mainly with guanine base, which can lead to point mutations and chromosomal aberrations. Fortunately, human diet is also rich in compounds with anti-cancer properties, such as curcumin or resveratrol. Both of these substances are known to have antioxidant, pro-apoptotic and anti-atherosclerotic activities.The aim of this study was to determine the effect of PhIP alone (100 μM) and in combination with resveratrol (5 μM) or curcumin (1 μM) on colorectal cancer cells (LoVo) and on the control cells, the line of immortalized keratinocytes (HaCaT). The mutagenic and toxic effects of PhIP on both cell lines were assessed using the comet and MTT assays. Results showed the lack of effect of PhIP on oxidative stress. PhIP induces apoptosis only in LoVo cells and not in HaCaT, which was confirmed by a caspase 3/7 activity assay and Annexin V/7-AAD staining. Although an increase in p53 levels was observed in LoVo cells, the level of p21 protein did not change. Both curcumin and resveratrol in combination with PhIP reduce the mutagenic effects of PhIP alone in tested cells. Interestingly, resveratrol, unlike curcumin, increases apoptosis in LoVo cells, but not in HaCaT.The obtained results suggest that polyphenols can protect the body against the mutagenic effects of PhIP and even additionally kill cancer cells by apoptosis

The characterization of chloroplast movements in Brachypodium distachyon

Ruchy chloroplastów w świetle niebieskim są zjawiskiem powszechnym wśród roślin dwuliściennych, natomiast w zbożach, jest on nieznaczny lub nie występuje w ogóle. Celem pracy było stwierdzenie występowania i scharakteryzowanie ruchów chloroplastów w Brachypodium distachyon, który jest blisko spokrewniony ze zbożami. Eksperymenty wykonano z użyciem fotometru dwuwiązkowego. Doświadczenia potwierdziły zależny od światła niebieskiego ruch tych organelli w badanej roślinie. Ponadto stosując analizę bioinformatyczną wykazano prawdopodobną obecność w B. distachyon fototropin - fotoreceptorów odpowiedzialnych za ruch chloroplastów w świetle niebieskim. Uzyskane wyniki mogą być podstawą do przyjęcia B. distachyon jako modelu do badania ruchów chloroplastów w trawach.Blue-light induced chloroplast movements are a phenomenon commonly observed among dicotyledonous plants, while in cereals it is not prominent or absent altogether. The aim of this study was to determine the presence and characterize chloroplast movements in Brachypodium distachyon, which is closely related to cereals. Experiments were performed using a double-beam photometer. The experiments have confirmed the existence of blue-light induced chloroplast movements in B. distachyon. Bioinformatic analysis has revealed the putative presence of phototropins – photoreceptors responsible for blue-light induced chloroplast movements – in B. distachyon. Summarizing, B. distachyon may be considered as a model to study chloroplast movements in grasses