Измерение эстрогенов в тканях молочной железы методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии

Although estrogen contribution estrogen to breast cancer development is not fully understood, an effective method of their measurement, in the mammary gland might provide additional insight. In this study, we have developed a LC-MS/MS method of simultaneous quantification of estrone and estradiol in breast tissue samples. Analytes were extracted with methyl tert-butyl ether by sonication and derivatized with dansyl chloride. Estrogens were analyzed by liquid chromatography-tandem mass spectrometry with an electrospray ionization source. Accuracy and precision were better than 20% for most concentrations. Although estrone and estradiol levels in normal and malignant breast tissue samples analyzed using our method insignificantly differed. The method developed may be used in further studies aimed at evaluating a role estrogens in breast cancer risk.Воздействие эстрогенов считается одним из основных факторов риска развития рака молочной железы, однако механизмы действия этого фактора до конца не изучены. В связи с этим актуальным является создание методов оценки содержания эстрогенов в тканях молочной железы. В данной работе представлены результаты разработки метода количественного определения эстрона и эстрадиола в образцах ткани молочной железы с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрической детекцией. Аналиты экстрагировали метил-трет-бутиловым эфиром в ультразвуковой бане и дериватизировали дансилхлоридом. Были рассмотрены варианты нормировки количественных данных на исходную массу ткани и на массу экстрагированных липидов. Точность и прецизионность конечного метода были выше 20% для большинства концентраций. С помощью метода были проанализированы уровни эстрона и эстрадиола в образцах нормальной и злокачественной ткани молочной железы. Разработанный метод может быть использован в дальнейших исследованиях влияния эстрогена на риск развития рака молочной железы

Molecular genetic prognostic factors for metastatic regional lymph node involvement in breast cancer patients

Objective. To identify molecular genetic prognostic factors for metastatic regional lymph node involvement in breast cancer (BC) on the basis of the gene-expression profiling analysis of primary tumors. Subjects and methods. The investigation enrolled 200 patients with morphologically verified unicentric invasive BC (T1-4N0-3M0,) who had been treated at the Ulyanovsk Regional Clinical Oncology Dispensary in 2012 to 2015. A tumor tissue molecular genetic study was performed using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) assay; a diagnostic panel consisted of 28 functional genes. Results. In the metastatic regional lymph node involvement group, the primary breast tumor was characterized by enhanced proliferative activity in terms of the expression of the Ki-67 gene (p = 0.028) and by the higher mRNA levels of the NAT (p = 0.039) and CD68 (p <0.001) genes with a reduction in PTEN expression (p <0.001) and with decreased ESR1 gene expression (p = 0.043). A discriminant analysis showed that the accuracy in predicting the presence or absence of metastatic regional lymph node involvement on the basis of a primary tumor molecular genetic study using a 7-gene expression panel was 91.9 and 78.8%, respectively. Conclusion. The primary breast tumor tissue molecular genetic study involving a set of 7 genes (PTEN, CD68, CCNB1, MGB1, MYC, BCL2, and ESR1) can become an additional diagnostic tool for assessing the presence of metastatic lymph node involvement when planning the volume of axillary lymph node dissection in BC patients. © 2020, Bionika Media Ltd.. All rights reserved