In-vitro-Untersuchung zu der Wirkung von "Low-dose"-Methotrexat auf Endothelzellen

Die Arbeit zeigt die Wirkung von Methotrexat (MTX) auf sog. HUVECs (Human umbilical vein endothelial cells) in vitro. MTX wird bei rheumatoider Arthritis (RA) eingesetzt. Die Endothelzellen wurden nach ihrer Isolation unter Zugabe von MTX kultiviert. Die Medikamentenkonzentrationen orientieren sich an üblichen Dosierungen während einer Therapie bei RA. Es wurden die Zellzahlveränderung, morphologische Abweichungen sowie die mitochondriale Stoffwechselaktivität mittels MTT-Assay untersucht. Eine dosisabhängige und statistisch signifikante Hemmung der Proliferation der Zellen war zu beobachten. Sie wurde sowohl durch die Zählung als auch durch das MTT- Assay bestätigt. Die Fotodokumentation ließ atypische Umrisse und Hyperplasien der Zellen deutlich werden. Die ermittelten in vitro Erkenntnisse sind jedoch nicht ohne Abstriche auf eine in vivo Situation übertragbar

In vitro inhibition of HUVECs by low dose methotrexate - Insights into oral adverse events

Background: With socio-economic changes, dentists and maxillofacial surgeons are more and more faced with medically compromised patients. Especially, the admission of antirheumatic drugs has increased remarkably. So dentists and maxillofacial surgeons should be aware of related adverse reactions that affect the craniofacial region. To identify possible cellular effects of disease modifying antirheumatic drugs (DMARDs) we investigated the influence of methotrexate (MTX) on human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Methods: HUVECs were incubated with various concentrations of MTX, corresponding to serum concentrations found in rheumatoid arthritis (RA) patients. The effect of MTX on cell proliferation, differentiation as well as mitochondrial activity was measured by use of immunostaining, cell counting and 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)- 2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Results: All samples incubated with MTX (1-1000 nM) showed significantly decreased cell viability when compared to controls. Cells were less proliferating, but did not lose their ability to synthesize endothelial proteins. A slight dose dependency of inhibiting effects was demonstrated. The observed differences between control and sample groups were rising with longer duration. Conclusion: Because of the crucial role of endothelial cells and their precursor cells in wound healing, a negative influence of MTX on oral health has to be supposed, correlating to clinical observations of adverse reactions in the oral cavity, such as ulcerative or erosive lesions