Sensitivity of human lymphocytes to genotoxic effect of N-methyl-N-nitrosourea: possible relation to gynecological cancers

The aim of this work is to study responses of PHA-stimulated and resting lymphocytes to methylating agent N-methyl-N-nitrosourea (MNU) and to compare sensitivity to this agent of healthy donor lymphocytes and lymphocytes from patients with gynecological cancers. Methods: Cytotoxicity of MNU, apoptotic death of lymphocytes, was evaluated using two common tests – annexin V-FITC detection assay and live/dead double staining assay (nuclear morphological changes). Genotoxic effect of the agent was determined as delayed (secondary) DNA double strand breaks (DSBs) using neutral comet assay both conventional variant and modified for detection of bromodeoxyuridine-labelled comets, produced by proliferating lymphocytes only. Results: Unstimulated lymphocytes were tolerant to geno- and cytotoxic effects of MNU. In contrast to resting cells, proliferating lymphocytes showed significant genotoxicity (p = 0.0054) of MNU followed by increased apoptotic death of cells (p < 0.05). Average number of secondary DSBs induced by MNU in lymphocytes from patients with gynecological cancers was about 4-fold less than that of lymphocytes of healthy donors. While lymphocytes from cancer patients did not change proliferative index in response to MNU, the agent decreased 2-fold proliferative indices of stimulated lymphocytes from healthy donors. Conclusion: There is a reverse association between geno- and cytotoxicity of MNU in stimulated lymphocytes and the presence of tumor. The relationship appears to be based on MMR-insufficiency in lymphocytes of the cancer patients.Цель: исследование эффекта метилнитрозомочевины (МНМ) на ФГА-стимулированные лимфоциты и в состоянии покоя здоровых доноров и пациенток с опухолями женской половой сферы. Методы: цитотоксический эффект МНМ (апоптотическая гибель лимфоцитов) оценивали по двум показателям — взаимодействию клеток с комплексом annexin V-FITC и по морфологическим изменениям ядра клеток после их окрашивания смесью 2 ДНК-тропных красителей. Генотоксический эффект МНМ, вторичные двунитевые разрывы ДНК (ДР) определяли с помощью метода нейтральных ДНК-комет. Использовали стандартный вариант метода и модифицированный для подсчета комет, формируемых только делящимися лимфоцитами, меченными BrUdr. Долю таких комет представляли как индекс пролиферации клеток. Результаты: лимфоциты в состоянии покоя устойчивы к гено- и цитотоксическому эффектам МНМ. В пролиферирующих клетках в ответ на воздействие МНМ формировались вторичные разрывы ДНК (р < 0,01) и возрастала частота появления апоптотических клеток (р < 0,05). Генотоксический эффект МНМ на стимулированные лимфоциты больных онкологического профиля в 4 раза ниже, чем на лимфоцитах здоровых доноров. Лимфоциты пациенток не изменяли пролиферативный индекс в ответ на действие МНМ; в лимфоцитах здоровых доноров действие МНМ вызывало 2-кратное снижение пролиферативного индекса. Выводы: установлена связь между гено- и цитотоксическим ответом лимфоцитов на действие МНМ и наличием опухоли. Предполагается, что генотоксический эффект МНМ связан с процессом пострепликативной коррекционной репарации

Особенности анализа магнитно-резонансной томографии для трансартериальной химиоэмболизации лекарственно насыщаемыми микросферами в онкогинекологии

Background: Magnetic resonance imaging (MRI) is used for the staging and assessment of treatment results of female pelvic tumors. The inclusion of transarterial chemoembolization (TACE) with drug-saturated microspheres into the treatment regimen puts a question to the radiologist: what TACE characteristics should be taken into account for the correct interpretation of the treatment results? Aim: To determine the main MRI parameters that characterize the results of TACE in the treatment of women with primary and recurrent pelvic tumors. Materials and methods: We performed a retrospective observational study of 80 patients with primary tumors (group 1) and 20 patients with recurrent tumors (group 2) of the small pelvis, complicated by tumor bleeding, who underwent 121 TACE procedures from 01.09.2015 to 01.12.2021 and were followed up to May 31, 2022. The study inclusion criteria were as follows: compliance with the approved protocol and time points for pelvic MRI. TACE results were evaluated according to RECIST 1.1. Results: In 100% of the cases in the groups 1 and 2, bleeding was controlled within 24 hours. In group 1, partial response was achieved in 48% (n = 38), complete response in 15% (n = 12), stabilization in 37% (n = 30), without any progression in all patients. In group 2, partial response was achieved in 27% (n = 5), complete response in 11% (n = 2), stabilization in 62% (n = 13), without any progression, as well. When comparing the mass volumes, recurrent tumors were significantly more responsive to TACE. The type of tumor growth was infiltrative (n = 25), expansive (n = 55), and mixed (n = 20). No significant differences in volume changes depending on the type of tumor growth were found. Eight women had undergone non-targeted ovarian embolization related to the type of blood supply. There were no cases of non-targeted embolization of the abdominal organs and the bladder, even with existing abnormal collateral vasculature. Conclusion: According to this data, the results of TACE for primary and recurrent pelvic tumors are characterized with the following MRI parameters: 1) hemostatic and cytostatic effects of TACE are manifested independently of each other; 2) tumor volume reflects changes after TACE to a greater extent than changes in linear dimensions; 3) there are cases of non-targeted ovarian embolization.Актуальность. Для стадирования и оценки результатов лечения опухолей малого таза у женщин применяется магнитно-резонансная томография (МРТ). Включение в схему лечения трансартериальной химиоэмболизации (ТАХЭ) лекарственно насыщаемыми микросферами ставит перед рентгенологом вопрос: какие особенности ТАХЭ надо учесть для корректной трактовки результатов лечения? Цель выделить основные параметры МРТ, которые характеризуют результаты ТАХЭ в лечении женщин с первичными и рецидивными опухолями малого таза. Материал и методы. Проведено ретроспективное наблюдательное исследование 80 пациенток с первичными опухолями (1-я группа) и 20 пациенток с рецидивными опухолями (2-я группа) малого таза, осложненными опухолевым кровотечением, которым выполнена 121 ТАХЭ лекарственно насыщаемыми микросферами за период с 01.09.2015 по 01.12.2021 и отслежена динамика на 31.05.2022. Критерием включения было соблюдение утвержденного протокола и сроков МРТ-обследования малого таза. Оценка результатов ТАХЭ выполнялась по RECIST 1.1. Результаты. Гемостаз в 1-й и 2-й группах был достигнут в течение суток в 100% случаев. В 1-й группе частичный ответ зарегистрирован в 48% (n = 38), полный ответ в 15% (n = 12), стабилизация в 37% (n = 30), прогрессирования не наблюдалось. Во 2-й группе частичный ответ отмечен в 27% (n = 5), полный ответ в 11% (n = 2), стабилизация в 62% (n = 13), прогрессирования так же не было. При сравнении объема новообразования зафиксировано, что рецидивные опухоли статистически значимо чаще в большей степени отвечали на ТАХЭ. Тип роста опухоли был инфильтративным (n = 25), экспансивным (n = 55), смешанным (n = 20). При этом статистически значимых различий в изменении объема опухоли в зависимости от типа ее роста не отмечено. У 8 женщин была нецелевая эмболизация яичников, связанная с кровоснабжением. Случаев нецелевой эмболизации органов брюшной полости и мочевого пузыря не отмечалось, даже при патологических коллатералях. Заключение. По нашим данным, результаты ТАХЭ при первичных и рецидивных опухолях малого таза у женщин характеризуют следующие МРТ-параметры: 1) гемостатический и цитостатический эффекты ТАХЭ проявляются независимо друг от друга; 2) изменения после ТАХЭ в большей степени отражает объем опухоли, чем линейные размеры; 3) имеются случаи нецелевой эмболизации яичников