A glioxaláz rendszer vizsgálata krónikus veseelégtelenségben = The glyoxalase system in chronic renal insufficiency

A metilglioxál (MG) lényeges szerepet játszik urémiában a karbonil stressz kialakulásában, azonban a szervezetben történő felhalmozódásának oka nem ismert. Ezért a jelen vizsgálatok célja a MG metabolizmus vizsgálata volt hemodializált (HD) végstádiumú vesebetegeken. A vizsgálatokat nem-cukorbeteg, krónikus HD kezelésben részesülő betegeken és egészséges kontrol csoportban végeztük el. A MG méréséhez kifejlesztettünk egy új, tandem tömegspektrometriás mérési módszert. Meghatároztuk a vörösvértestek és plazma MG és D-laktát koncentrációit, a glioxaláz I és II aktivításokat, valamint.a teljes vér redukált glutation (GSH) koncentrációját. A vvt MG ÉS D-laktát képződését in vitro körülmények között is vizsgáltuk A vvt MG szint emelkedett (p<0,001) volt a HD betegekben. A vér GSH és glioxaláz I aktivitás hasonló volt a beteg és kontroll csoportban, azonban a glioxaláz II aktivitás szignifikánsan (p<0,005) magasabbnak bizonyult a HD betegekben. A normoglikémiás in vitro modellben az MG (p<0,001) és D-laktát (p<0,002) képződés is szignifikánsan magasabb volt a HD vvt-ben a kontrolhoz viszonyítva. A jelen vizsgálatok arra utalnak, hogy HD betegek vvt-ben fokozott az MG képződés. Bár a degradációs út is aktiválódik, nem képes a fokozott mennyiségben képződött MG lebontására. A metabolikus utak fenti változásai és egyensúlyuk zavara fontos szerepet játszhat az MG felhalmozódásában és a karbonil stressz kialakulásához HD betegekben. | Methylglyoxal (MG) contributes significantly to the carbonyl stress in uremia, however, the reason for its increased concentration is not clear. Thus, the present study was aimed to investigate the metabolism of MG in hemodialyzed (HD) patients with end-stage renal disease. For the assay of MG, a new electropspray tandem massspectrometric method was developed. Erythrocyte MG and D-lactate levels, glyoxalase activities and whole blood reduced glutathione (GSH) content were determined in non-diabetic patients on chronic HD. The data were compared with those on healthy controls. Erythrocyte MG and D-lactate production were also investigated under in vitro conditions. The erythrocyte MG level proved elevated (p<0.001) in the HD patients. The blood GSH content and glyoxalase I activity proved similar to the control levels, but the glyoxalase II activity was significantly (p<0.005) increased. In the normoglycemic in vitro model, both MG (p<0.001) and D-lactate (p<0.002) production were significantly enhanced in the HD erythrocytes relative to the controls. The present study demonstrated an increased formation of MG in the erythrocytes of HD patients. The degradation system of MG was also activated, still, it was not able to counteract the high rate of MG formation. The alterations and imbalance of these metabolic processes may contribute to the carbonyl overload and stress in the HD patients

Endothelális diszfunkció és oxidatív stressz szerepe a juvenilis esszenciális hypertóniában és obezitásban. = The role of endothelium dysfunction and oxidative stress in juvenile essential hypertony and obesity.

OTKA kutatásunkban a következő főbb témákban: „Endothelin-1 gene and endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms in adolescents with juvenile and obesity-associated hypertension”, „Eritropoezisstimuláló hatóanyagok és az oxidatív stressz kapcsolata hemodializált betegekben”, „Mikrovaszkuláris reaktivitás vizsgálata normál testsúlyú, túlsúlyos és obez hypertoniás serdülőkben”, „Eritropoetin kezelés és oxidatív stressz kapcsolata uraemiás patkánymodellben: az eltérő adagolási rend szerepe”, „International Comparison of Blood Pressure and BMI Values in schoolchildren aged 11-16 years”, „IV-es típusú kollagén (Col IV) nephropathiák: a vékony bazális membrán nephropathiától az Alport syndromáig” végezttünk kísérleteket. Ezen felül a vizsgálatok elvégzésével kapcsolódóan 2 metodikai cikk is született. A kutatási témák a hypertónia kiakalulásának, therápiájának különböző aspektusait vizsgálták. Eredményeinket 11 nemzetközi újságban elfogadott cikkben közöltük, összesen 18,64 impakt faktor értékben. | In our OTKA grant we researched in the following fields: „Endothelin-1 gene and endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms in adolescents with juvenile and obesity-associated hypertension”, „Erythropoiesis-stimulating agent withdrawal and oxidative stress in hemodialysis”, „Microvascular reactivity in lean, overweight, and obese hypertensive adolescents”, „Effects of Darbepoetin alfa in Different Frequencies on Erythropoiesis and Oxidative Stress in a 5/6 Nephrectomized Rat Model”, „International Comparison of Blood Pressure and BMI Values in schoolchildren aged 11-16 years”, „Collagen type IV nephropathy: Genetic heterogeneity examinations in affected Hungarian families”. Furthermore we presented two methodical manuscripts connected with the methodology of our research. The researched projects covers the etiology, teraphy and different aspects of hypertension. Our results were published in 11 international manuscript with sum of 18,64 impact factors

Anyai és újszülöttkori B₁₂-vitamin-hiány felismerése kiterjesztett újszülöttkori szűréssel | Maternal and neonatal vitamin B₁₂ deficiency detected by expanded newborn screening

Absztrakt: Bevezetés: A csecsemőkori B12-vitamin-hiány súlyos neurodegeneratív betegségként jelenhet meg, és rendszerint vegetáriánus étrend vagy anaemia perniciosa következtében létrejövő anyai hiány okozza. Korai felismerésével és kezelésével a potenciálisan súlyos és irreverzibilis neurológiai károsodás megelőzhető. Biokémiailag a B12-vitamin-hiány metil-malonsav-, homocisztein- és propionil-karnitin-felhalmozódáshoz vezet. A tandem tömegspektrometriás kiterjesztett újszülöttkori szűrés azonosíthatja az újszülöttkori és anyai B12-vitamin-hiányt, a propionil-karnitinnek és egyéb metabolitoknak az újszülöttek beszárított vércseppmintájában történő mérésével. Célkitűzés: A B12-vitamin-hiány szűrésével nyert tapasztalataink összefoglalása. Módszer: Retrospektív módon elemeztük a Szegedi Szűrőközpontban diagnosztizált B12-vitamin-hiányos csecsemők klinikai és laboratóriumi adatait. Eredmények: Magyarországon a kiterjesztett újszülöttkori szűrés 2007-ben került bevezetésre. Központunkban azóta körülbelül 395 000 újszülött szűrése történt, és közülük négy újszülöttet azonosítottunk B12-vitamin-hiánnyal a szűrési eredményeik alapján. Három esetben emelkedett propionil-karnitin-szint és a negyedikben alacsony metioninszint utalt B12-vitamin-hiányra. Egy további B12-vitamin-hiányos, neurológiai tüneteket mutató csecsemő is észlelésre került négy hónapos életkorban, normális újszülöttkori szűrést követően, a vizelet-metil-malonsav-koncentráció emelkedése alapján. A B12-vitamin-hiány mind az öt csecsemőben anyai autoimmun anaemia perniciosa miatt másodlagosan jelentkezett. A felismert esetekből következően a csecsemőkori B12-vitamin-hiány incidenciája a kelet-magyarországi régióban 1,26/100 000 születés volt, de a valós gyakoriság feltehetően magasabb. Következtetések: A B12-vitamin-hiány felismerési aránya a jelenleg használt szűrési paraméterek határértékeinek optimalizálásával és a beszárított vércseppmintában másodlagos vizsgálatként a metil-malonsav és/vagy homocisztein mérésével javítható. Orv Hetil. 2017; 158(48): 1909–1918. | Abstract: Introduction: Infant vitamin B12 deficiency can manifest as a severe neurodegenerative disorder and is usually caused by maternal deficiency due to vegetarian diet or pernicious anaemia. Its early recognition and treatment can prevent potentially serious and irreversible neurologic damage. Biochemically, vitamin B12 deficiency leads to an accumulation of methylmalonic acid, homocysteine, and propionylcarnitine. Expanded newborn screening using tandem mass spectrometry may identify neonatal and maternal vitamin B12 deficiency by measurement of propionylcarnitine and other metabolites in the dried blood spot sample of newborns. Aim: To summarize our experiences gained by screening for vitamin B12 deficiency. Method: Clinical and laboratory data of vitamin B12-deficient infants diagnosed in Szeged Screening Centre were retrospectively analysed. Results: In Hungary, expanded newborn screening was introduced in 2007. Since then approximately 395 000 newborns were screened in our centre and among them, we identified four newborns with vitamin B12 deficiency based on their screening results. In three cases an elevated propionylcarnitine level and in the fourth one a low methionine level were indicative of vitamin B12 deficiency. We also detected an additional vitamin B12-deficient infant with neurological symptoms at 4 months of age, after a normal newborn screening, because of elevated urinary methylmalonic acid concentration. Vitamin B12 deficiency was secondary to maternal autoimmune pernicious anaemia in all the five infants. As a result of the recognized cases the incidence of infant vitamin B12 deficiency in the East-Hungarian region was 1.26/100 000 births, but the real frequency may be higher. Conslusions: Optimizing the cut off values of current screening parameters and measuring of methylmalonic acid and/or homocysteine in the dried blood spot, as a second tier test, can improve recognition rate of vitamin B12 deficiency. Orv Hetil. 2017; 158(48): 1909–1918

Genetikai és vasoaktív mechanizmusok, valamint az obesitás szerepének vizsgálata serdülők és adolescens korúak essentialis hypertoniájában = The study of the roles of genetic and vasoactive mechanisms and the obesity on adolescent patients with essential hypertension

Juvenilis essentialis hypertoniában a plazma nitrátok koncentrációja csökkent, míg a lipid-peroxidáció végtermékeié fokozódik. Az MDA/NO arány jelentősen fokozott a hypertoniásokban összehasonlítva az azonos testtömeg-indexű (TTI) kontrollokéval. Tehát juvenilis essentialis hypertoniaban a TTI-től függetlenül is oxidatív stressz mutatható ki. Obez hypertonias betegekben a thrombocyta aggregáció, vérplasma-viscositasa, plasma lipid koncentrációja fokozott. A plasma thiol oxidáció negatív korrelációt mutatott.Obez hipertóniás betegekben kimutattuk a HDL lipoproteinhez kötött paraoxonáz gyakoribb RR genotípusát. A paraoxonáz aktivitás az uremiás hipertoniás betegekben szig. alacsonyabb volt minden genotípusban. Az MDA/NO koncentráció szignifikánsan magasabb volt az urémiás és obez hipertóniás betegekben. Tehát az obez hipertóniás betegekben az oxidatív stressz együtt jár az atherogenezis rizikófaktorainak emelkedésével és RR genotípus megjelenésével, mely a korai atherogenezis kialakulásának jelzésére utal. Az NO értékek csökkenése mindkét hipertóniában kifejezett. Az essentialis hipertoniás betegekben az ACE aktivitás fokozott, obez hipertoniás betegekben az endothelin koncentráció és a xantin-oxidáz, leptin-koncentráció magas, a leptin receptor csökkent. A rövid ideje hemodializált betegeknél a hemoxigenáz-1 génexpresszió fokozott. A hosszú ideje hemodializált betegek a hemoxigenáz alap-expressziója csökkent, de a HD kezelés alatt növekedett. | In the patients with juvenile essential hypertension (JEH) the plasma nitrate (NO) concentration significantly decreased, while the end product of lipid peroxidation (malonyl dialdehide, MDA) increased. The MDA/NO ratio significantly increased in hypertension compared with the controls with the same body mass index (BMI). In JEH an oxidative stress can be obsessed independently from BMI. In obese hypertensive patients an increased platelet aggregation, plasma and blood viscosity, and plasma lipid peroxidation was presented. With all of these, plasma thiol oxidation showed a negative correlation. Platelet aggregation were increased in the non-obese hypertensive patients too. In obese hypertensive patients an increased RR genotype of paraoxonase was observed. Paraoxonase activity was significantly increased in all genotype in the uremic hypertensive patients. MDA/NO concentration was significantly higher in the uremic and obese hypertensive patients. Therefore the increased oxidative stress associated with atherogenetic risk factors and the RR genotype of paraoxonase, which may suggest the early risk of atherogenesis. The decrease of plasma NO values was characteristic in JEH and obesity associated hypertension. In JEH angiotensine converting enzyme activity was increased, while in obesity associated hypertension the endothelin concentration and xantine-oxidase activity, as well as the leptine concentration was high, but the leptine receptor was low