Comparison of three diagnostic techniques for the detection of leptospires in the kidneys of wild house mice (Mus musculus)

Forty-one wild house mice (Mus musculus) were trapped in an urban area, near railways, in Santa Fe city, Argentina. Both kidneys from each mouse were removed for bacteriological and histological examination. One kidney was inoculated into Fletcher semi-solid medium and isolates were serologically typed. The other kidney was microscopically examined after hematoxylin-eosin, silver impregnation and immunohistochemical stains. Leptospires, all of them belonging to the Ballum serogroup, were isolated from 16 (39%) out of 41 samples. The presence of the agent was recorded in 18 (44%) and in 19 (46%) out of 41 silver impregnated and immunohistochemically stained samples respectively. Additionally, leptospires were detected in high number on the apical surface of epithelial cells and in the lumen of medullary tubules and they were less frequently seen on the apical surface of epithelial cells or in the lumen of the cortical tubules, which represents an unusual finding in carrier animals. Microscopic lesions consisting of focal mononuclear interstitial nephritis, glomerular shrinkage and desquamation of tubular epithelial cells were observed in 13 of 19 infected and in 10 of 22 non-infected mice; differences in presence of lesions between infected and non-infected animals were not statistically significant (P=0,14). The three techniques, culture, silver impregnation and immunohistochemistry, had a high agreement (k³0.85) and no significant differences between them were detected (P>0.05). In addition, an unusual location of leptospires in kidneys of carrier animals was reported, but a relationship between lesions and presence of leptospires could not be established.Foram capturados 41 camundongos (Mus musculus) na região urbana, próximo à ferrovia da cidade de Santa Fé, Argentina. Os rins de cada animal capturado foram removidos para estudos bacteriológicos e histológicos. Um dos rins foi imerso em meio semi-sólido de Fletcher para isolamento de leptospiras, as quais foram serologicamente tipificadas. O outro rim foi microscopicamente examinado por coloração de cortes histológicos pela hematoxilina-eosina, impregnação pela prata e imunohistoquímica. Leptospiras pertencentes ao serogrupo Ballum foram isoladas em 16 (39%) das 41 amostras availadas. A presença do agente foi observada em 18 (44%) e 19 (46%) das 41 amostras avaliadas por impregnação pela prata e imunohistoquímica, respectivamente. Leptospiras foram detectadas em grande numero na superfície apical das células epiteliais e no lumen dos túbulos medulares e foram menos frequentemente encontradas na superficie apical de células epiteliais ou no lúmen dos túbulos corticais, o que é considerado achado raro em animais portadores. Lesões microscópicas consistindo de nefrite mononuclear intersticial focal, atrofia glomerular e descamação das células tubulares epiteliais foram observadas em 13 dos 19 animais infectados e em 10 dos 22 animais não infectados. Não houve diferença estatisticamente significativa entre presença de lesões em animais infectados e não infectados (P=0,14). As três técnicas empregadas, isolamento, impregnação pela prata e imunohistoquímica, apresentaram alta concordância (k³0,85) e não apresentaram diferenças estatisticamente significativas (P>0,05). Esse trabalho descreve a presença incomum de leptospira em rins de animais portadores, porém com esse estudo não foi possível estabelecer uma relação entre lesões e presença de leptospira.Fil: Rossetti, Carlos A. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentina.Fil: Vanasco, Bibiana N. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias Dr. Emilio Coni; Argentina.Fil: Pini, Noemí. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Virales Humanas Dr. Julio Maiztegui; Argentina.Fil: Carfagnini, Julio C. Universidad de Buenos Aires. Área de Patología Básica; Argentina

Some toxic and enzymatic activities of Bothrops ammodytoides (yarará ñata) venom

Fil: de Roodt, Adolfo R. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Producción de Biológicos; Argentina.Fil: Dolab, Jorge A. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Producción de Biológicos; Argentina.Fil: Hajos, S E. Cátedra de Inmunologı́a de la Facultad de Farmacia y Bioquı́mica de la Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires; Argentina.Fil: Gould, Eduardo G. Fundación de Estudios Biológicos, Pte. Perón, Buenos Aires; Argentina.Fil: Dinápoli, H. Museo Argentino de Ciencias Naturales ‘Bernardino Rivadavia’, CONICET, Buenos Aires; Argentina.Fil: Troiano, J C. Museo Argentino de Ciencias Naturales ‘Bernardino Rivadavia’, CONICET, Buenos Aires; Argentina.Fil: Gould, J. Cátedra de Inmunologı́a de la Facultad de Farmacia y Bioquı́mica de la Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires; Argentina.Fil: Dokmetjian, Christian ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Producción de Biológicos; Argentina. Museo Argentino de Ciencias Naturales ‘Bernardino Rivadavia’, CONICET, Buenos Aires; Argentina.Fil: Carfagnini, Julio C. Cátedra de Patologı́a General, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires; Argentina.Fil: Fernández, Teresa. Fundación de Estudios Biológicos, Pte. Perón, Buenos Aires; Argentina.Fil: Amoroso, Marcela. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Producción de Biológicos; Argentina.Fil: Segré, Liliana. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Producción de Biológicos; Argentina.Fil: Vidal, Juan C. Museo Argentino de Ciencias Naturales ‘Bernardino Rivadavia’, CONICET, Buenos Aires; Argentina.Bothrops ammodytoides, the smallest representative of this genus, is found only in Argentina. Venom was extracted from thirty adult specimens (35-70 cm in length, 90-300 g in weight) captured in the Province of Buenos Aires and kept in captivity. Venom yield was 3-30 mg. SDS-PAGE showed strong bands at 14.0; 23-25; 45; 54 and 63 kDa and weak bands at 17.0; 30.0; 40.0 and 85.0 kDa. Toxic activities were: LD50 (intravenous, mice) 0.5+/-0.2 microg/g; minimal procoagulant dose on human plasma (MPD-P) 35+/-2 mg/l; and minimal defibrinogenating dose (MDD, mice) 6-12 microg. Hemorrhagic and/or necrotic activities appear to play a major role in lethality; minimal hemorrhagic dose (MHD, mice) is 10+/-2 microg/g and minimal necrotizing dose (MND, mice) is 38+/-5 microg. The LD50, MPD-P and MND are among the lowest in venoms from Bothrops species found in Argentina. B. ammodytoides venom exhibited high proteolytic and phospholipase A2 activities. Most of the B. ammodytoides venom components cross-react with Bivalent Bothropic antivenom (Instituto Nacional de Producción de Biológicos ANLIS Dr. G. Malbrin, against B. alternatus and B. neuwiedii venoms). One ml of antivenom neutralizes 1.2 mg of B. ammodytoides venom