Molecular Investigation Confirms Myotis Genus Bats as Common Hosts of Polychromophilus in Brazil

Plasmodium spp. and some other blood parasites belonging to the order Haemosporida are the focus of many epidemiological studies worldwide. However, haemosporidian parasites from wild animals are largely neglected in scientific research. For example, Polychromophilus parasites, which are exclusive to bats, are described in Europe, Asia, Africa, and Oceania, but little is known about their presence and genetic diversity in the New World. In this study, 224 samples of bats from remaining fragments of the Atlantic Forest and Pantanal biomes, as well as urbanized areas in southern and southeastern Brazil, were analyzed for the presence of haemosporidian parasites by PCR of the mitochondrial gene that encodes cytochrome b (cytb). The PCR fragments of the positive samples were sequenced and analyzed by the Bayesian inference method to reconstruct the phylogenetic relationships between Polychromophilus parasites from bats in Brazil and other countries. Sequences from Brazilian lineages of Polychromophilus were recovered in a clade with sequences from Polychromophilus murinus and close to the one Polychromophilus sequence obtained in Panama, the only available sequence for the American continent. This clade was restricted to bats of the family Vespertilionidae and distinct from Polychromophilus melanipherus, a parasite species mainly found in bats of the family Miniopteridae. The detection of Polychromophilus and the genetic proximity to P. murinus were further confirmed with the amplification of two other genes (clpc and asl). We also found a Haemosporida parasite sequence in a sample of Noctilio albiventris collected in the Pantanal biome, which presents phylogenetic proximity with avian Haemoproteus sequences. Morphological and molecular studies are still needed to conclude and describe the Polychromophilus species in Brazilian Myotis bats in more detail and to confirm Haemoproteus parasites in bats. Nevertheless, these molecular results in Brazilian bats confirm the importance of studying these neglected genera.Fil: da Silva Mathias, Bruno. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Minozzo, Guilherme Augusto. No especifíca;Fil: Biondo, Alexander Welker. Universidade Federal do Paraná; BrasilFil: de Oliveira Jorge Costa, Jaciara. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Sousa Soares, Herbert. Universidade de Santo Amaro; BrasilFil: Marcili, Arlei. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: de Oliveira Guimarães, Lilian. Instituto Pasteur; BrasilFil: a Clares dos Anjos, Carolina. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Pires Dos Santos, Andrea. Purdue University; Estados UnidosFil: Riediger, Irina Nastassja. No especifíca;Fil: Fecchio, Alan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Norte. Centro de Investigación Esquel de Montaña y Estepa Patagónica. Universidad Nacional de la Patagonia "San Juan Bosco". Centro de Investigación Esquel de Montaña y Estepa Patagónica; ArgentinaFil: Bueno, Marina Galvão. Fundación Oswaldo Cruz; BrasilFil: Pinho, João Batista. Universidade Federal do Mato Grosso do Sul; BrasilFil: Kirchgatter, Karin. Universidade de Sao Paulo; Brasi

Diversity of parasites of the genera Trypanosoma and Leishmania in wild vertebrates and vectors of the headquarters Reserva Legado das Águas- Votorantim area, in the municipality of Miracatu, São Paulo

Protozoários da família Trypanosomatidae, representam importante papel para saúde humana e animal, apresentando ciclos de vida monoxeno e heteroxeno, onde na alternância de hospedeiros, podem infectar o ser humano. O gênero Leishmania possui ciclos silveste e urbano, infectando principalmente mamíferos silvestres e cães domésticos como hospedeiros vertebrados. As espécies do gênero Leishmania são transmitidas a estes hospedeiros através da picada de invertebrados hematófagos da família Psychodidae, e possui duas apresentações clínicas principais quando infecta o ser humano: visceral e cutânea; onde a forma visceral é causada pela espécie Leishmania (Leishmania ) infantum na America e Europa, e pela espécie Leishmania (Leishmania ) donovani na Ásia. A Leishmaniose Visceral está classificada como uma das Doenças Tropicais Negligenciadas pela OMS. O gênero Trypanosoma possui uma subdivisão baseada no desenvolvimento dos parasitas no trato digestivo do vetor; em duas Secções, Salivaria e Stercoaria, além também das divisões em diversos Clados, baseado em filogenia molecular; e a separação em três subgêneros: Herpetosoma, Megatrypanum e Schizotrypanum. No subgênero Schizotrypanum está classificada a espécie Trypanosoma cruzi, que possui bastante complexidade epidemiológica, e capacidade de infectar mamíferos de todas as ordens, inclusive o ser humano. No ser humano o T. cruzi causa a Doença de Chagas, transmitida por diversas espécies de triatomíneos dos gêneros Triatoma, Rodnius e Panstrongylus. A Doença de Chagas também está classificada no grupo das Doenças Tropicais Negligenciadas da OMS. O presente estudo teve como objetivo investigar a ocorrência de parasitas dos gêneros Trypanosoma e Leishmania na Reserva Legado das Aguas Votorantim, na região do Vale do Ribeira, sul do estado de São Paulo, uma região de Mata Atlântica preservada, a fim de contribuir para o melhor entendimento dos ciclos de transmissão desses parasitas, e acrescentar conhecimento ao estudo dessas zoonoses. Foram capturados 324 pequenos mamíferos das ordens Rodentia, Chiroptera e Marsupialia, através de armadilhas do tipo gaiolas e redes de neblina. Foi coletado sangue e tecidos destes animais, onde o sangue foi distribuído em hemoculturas e ambos submetidos a testes moleculares. Foram também capturados triatomíneos (barbeiros) e tabanídeos (mutucas), através de busca ativa e redes de neblina (para tabanídeos). As hemoculturas não demonstraram crescimento de parasitas, e a análise molecular corroborou tais resultados negativos. Foram capturados 16 espécimes de triatomíneos, dos gêneros Triatoma e Panstrongylus. Através destes foram obtidos 11 isolados classificados como Trypanosoma cruzi II, e uma sequência obtida classificada como Trypanosoma cruzi IV. Foram capturados três tabanídeos, que possibilitou a obtenção de duas sequências de conteúdo intestinal, caracterizadas como Trypanosoma terrestris. Estes tabanídeos ainda serão classificados a nível de espécie através da análise molecular. Através da captura de animais foi possível atestar a biodiversidade e nível de preservação ambiental da Reserva Legado das Aguas Votorantim, e ainda demonstrar que há a circulação de parasitas do gênero Trypanosoma em vetores e potenciais vetores, necessitando ainda de mais estudos para determinar quais vertebrados mantem os ciclos ativos, e ainda determinar a capacidade vetorial de tabanídeos para a espécie Trypanosoma terrestris, que ainda não possui vetores caracterizado.Protozoa of the Trypanosomatidae family, play an important role for human and animal health, presenting monoxene and heteroxene life cycles, where in alternating hosts, they can infect humans. The Leishmania genus has wild and urban cycles, mainly infecting wild mammals and domestic dogs as vertebrate hosts. The species of the genus Leishmania are transmitted to these hosts through the bite of blood-sucking invertebrates of the Psychodidae family, and it has two main clinical presentations when it infects humans: visceral and cutaneous; where the visceral form is caused by the species Leishmania (Leishmania) infantum in America and Europe, and by the species Leishmania (Leishmania) donovani in Asia. Visceral Leishmaniasis is classified as one of the Neglected Tropical Diseases, by the WHO. The Trypanosoma genus has a subdivision based on the development of parasites in the vector\'s digestive tract; in two Sections, Salivaria and Stercoaria, in addition to the divisions in several Clados, based on molecular phylogeny; and the separation into three subgenera: Herpetosoma, Megatrypanum and Schizotrypanum. In the subgenus Schizotrypanum, the species Trypanosoma Cruzi is classified, which has a lot of epidemiological complexity, and is capable of infecting mammals of all orders, including humans. In humans, T. cruzi causes Chagas disease, transmitted by several species of triatomines of the genera Triatoma, Rodnius and Panstrongylus. Chagas' disease is also classified in the WHO Neglected Tropical Diseases group. The present study aimed to investigate the occurrence of parasites of the genera Trypanosoma and Leishmania in the Legado das Aguas Reserve - Votorantim, in the Vale do Ribeira region, south of the state of São Paulo, a region of preserved Atlantic Forest, in order to contribute to better understanding of the transmission cycles of these parasites, and adding knowledge to the study of these zoonoses. 324 small mammals of the orders Rodentia, Chiroptera and Marsupialia were captured, using cage-type traps and mist nets. Blood and tissues were collected from these animals, where the blood was distributed in blood cultures and both subjected to molecular tests. Triatomines and tabanids were also captured, through active search and fog nets (for tabanids). Blood cultures did not show parasite growth, and molecular analysis corroborated these negative results. 16 specimens of triatomines, of the genera Triatoma and Panstrongylus, were captured. Through these 11 isolates classified as Trypanosoma cruzi II were obtained, and a sequence obtained classified as Trypanosoma cruzi IV. Three tabanids were captured, which made it possible to obtain two sequences of intestinal content, characterized as Trypanosoma terrestris. These tabanids will still be classified at the species level through molecular analysis. Through the capture of animals it was possible to attest to the biodiversity and environmental preservation level of the Legado das Aguas Reserve - Votorantim, and to demonstrate that there is the circulation of parasites of the genus Trypanosoma in vectors and potential vectors, requiring further studies to determine which vertebrates keeps the cycles active, and also determine the vectorial capacity of tabanids for the species Trypanosoma terrestris, which does not yet have characterized vectors

DIVERSIDADE DE CARRAPATOS E INFECÇÃO NATURAL POR RICKETTSIA EM REMANESCENTE PRIMÁRIO DE MATA ATLÂNTICA NO ESTADO DE SÃO PAULO, BRASIL

Introdução: Os carrapatos são ectoparasitas hematófagos obrigatórios que parasitam diversos vertebrados, incluindo o ser humano. São vetores de diversos patógenos e o gênero Amblyomma possui grande importância em saúde pública por transmitirem as diferentes espécies do gênero Rickettsia. As riquétsias são bactérias causadoras de enfermidades graves em humanos. O objetivo do estudo foi mapear a área de Mata Atlântica primária na Reserva Legado das Águas – Votorantim no Vale do Ribeira – SP, para carrapatos vetores e riquétsias, com a finalidade epidemiológica. Métodos: As capturas foram realizadas de 01/2018 a 12/2021. Os carrapatos foram coletados de pequenos mamíferos capturados em armadilhas do tipo Shermann e Tomahawk. Os carrapatos obtidos de humanos foram retirados dos humanos após o retorno das trilhas. Os espécimes de vida livre foram coletados através de inspeção de folhagens, e todos os indivíduos foram identificados através de chaves dicotômicas. A extração de DNA foi feita utilizando a técnica de isotiocianato de guanidina e a detecção de riquétsias através de qPCR e cPCR utilizando como alvo os genes gltA e ompA. Após esta etapa os amplicons foram sequenciados e submetidos a análise de similaridade pelo BLAST. Resultados: Foram coletados 2.669 espécimes de três gêneros e 13 espécies, e a única espécie encontrada parasitando humanos foi Amblyomma incisum. Dos carrapatos coletados, 6.8% foram positivos para Rickettsia nos genes testados. A análise de similaridade identificou três espécies infectando carrapatos: Rickettsia bellii, em Amblyomma ovale, Amblyomma brasiliense, Ixodes loricatus e Haemaphysalis juxtakochi; Rickettsia parkeri cepa Mata Atlântica em A. ovale e Rickettsia rhipicephali em Há. Juxtakochi. Conclusão: A área de estudo é constituída por mata primária com grande densidade e diversidade de mamíferos refletindo diretamente na densidade e diversidade de carrapatos identificados. A espécie mais abundante foi A. incisum, única encontrada parasitando humanos, negativa para a infecção por Rickettsia. R. parkeri cepa Mata Atlântica causa Febre Maculosa branda em humanos e foi detectada em A. ovale, única espécie incriminada na transmissão dessa doença. As demais espécies de riquétsias detectadas não apresentam relatos de doença em humanos. As áreas preservadas possuem menor circulação de riquétsias quando comparado a áreas com antropizadas, estando a doença intimamente relacionada ao desmatamento e urbanização de ambiente naturais