Efecto de los niveles de oxígeno (O2) en la expresión del ARNm de los componentes angiogénicos y antiangiogénicos del Factor de Crecimiento del Endotelio Vascular (VEGF) en cultivo de células de la granulosa de folículos de bovinos

Granulosa cells have had to adapt to carry out their metabolic functions under conditions of lower oxygen concentration, for this produces molecules essential for their metabolism. The angiogenic components of the VEGF system play an important role in the migration, proliferation and cell survival of granulosa. The objective of this work was to evaluate the effects of oxygen level on the expression of VEGFxxx mRNA, VEGFxxxb and its receptors in bovine granulosa cells in culture. The granulosa cells of healthy bovine follicles were cultured with modified MacCoys 5a medium (37°C, 5% CO2 and 95% humidity). They were maintained for 48 hours in anaerobic jugs under the following conditions: treatment 1: 2% oxygen, 5% CO2, nitrogen balance, treatment 2: 5% oxygen, 5% CO2, nitrogen balance. Control group: 18-20% oxygen, 5% CO2. The expression of each gene was quantified by real time PCR (qPCR) using TaqMan primers and probes designed specifically for each of the genes. VEGF120, VEGF120b and VEGF164 mRNA expression was higher (P 0.05) was observed in the number of copies due to the effect of the level of oxygen in the granulosa cell cultures. However, mRNA expression of the sVEGFR1 and sVEGFR2 soluble receptors showed a linear increase (P 0.05) en el número de copias por efecto del nivel de oxígeno en los cultivos de células de la granulosa. Sin embargo, la expresión del ARNm de los receptores solubles sVEGFR1 y sVEGFR2 mostraron un incremento lineal (P<0.05) en el número de copias con el aumento en el nivel de oxígeno (20%). Podemos concluir que un ambiente con 2% de oxígeno favorece la mayor expresión del ARNm de VEGF120, VEGF120b y VEGF164 en las células de la granulosa de bovino en cultivo y la expresión más baja de ARNm de sVEGFR1 y sVEGFR2, con lo cual seguramente se propiciar un medio autócrino que favorece los efectos proliferativos y de sobrevivencia de las células de la granulosa. Es probable que la condición de hipoxia fisiológica que viven las células de la granulosa in vivo, produzca un ambiente similar a lo que observamos en este experimento y con ello se favorezca el desarrollo folicular