17 research outputs found
ZaÄetak oplemenjivanja božiÄnih drvaca u Hrvatskoj
U Hrvatskoj je registrirano 1305 uzgajivaÄa (tzv. dobavljaÄa) i 358 ha nasada božiÄnih drvaca. U 2016. godini proizvedeno je 2 574 212 božiÄnih drvaca (minimalne visine 20 cm). NaÅ”i uzgajivaÄi uglavnom nemaju genetski kvalitetan, testiran reprodukcijski materijal koji bi se odlikovao stabilnoÅ”Äu poželjnih fenotipskih svojstava, Å”to, meÄu ostalim, rezultira velikim varijacijama u kvaliteti njihova konaÄnoga proizvoda. MeÄutim, za proizvodnju ornamentalno visokovrijednih božiÄnih drvaca potrebno je raspolagati kvalitetnim genotipovima koji Äe se uzgajati u primjereno optimalnim okoliÅ”nim uvjetima. Samo podjednakom brigom za obje navedene sastavnice (genotip i okoliÅ”) može se postiÄi uspjeÅ”na proizvodnja visokokvalitetnih drvaca. Zbog toga smo odluÄili pokrenuti proces oplemenjivanja radi stvaranja i proizvodnje domaÄega genetski poboljÅ”anoga reprodukcijskoga materijala božiÄnih drvaca. U ovom su radu opisane faze i dinamika izvedbe zapoÄetoga oplemenjivanja naÅ”ih dviju autohtonih vrsta ā obiÄne smreke i obiÄne jele. Kao ciljna fenotipska svojstva izabrane su gustoÄa kroÅ”nje, oblik kroÅ”nje i debla te raspored iglica na izbojcima. Definirani su i opisani kriteriji za ocjenjivanje ciljnih fenotipskih svojstava odnosno kriteriji provedene selekcije plus stabala u dostupnim matiÄnim populacijama. Kandidati jedinke su izabrani u kategoriju plus jedinke ako im je ponderirana ukupna ocjena fenotipske kvalitete bila barem jednu standardnu devijaciju viÅ”a od aritmetiÄke sredine pripadajuÄe populacije. Teorijski raspon ponderiranih ocjena kretao se od 2,0 (2,6) do 5,0, pri Äemu je viÅ”a ocjena znaÄila veÄu fenotipsku kvalitetu. Ukupno je ocijenjeno 65 kandidata stabala obiÄne smreke. Selekcijski kriterij zadovoljilo je Å”est kandidata s ocjenama u rasponu od 4,0 do 4,5. U matiÄnoj populaciji obiÄne jele ukupno je ocijenjeno 90 kandidata stabala. Od toga je selekcijski kriterij zadovoljilo 15 kandidata s ocjenama u rasponu od 4,1 do 4,8. Izabrane plus jedinke zaÄetak su kolekcije biljnoga materijala koji Äe poslužiti za daljnje faze procesa oplemenjivanja
ZaÄetak oplemenjivanja božiÄnih drvaca u Hrvatskoj
U Hrvatskoj je registrirano 1305 uzgajivaÄa (tzv. dobavljaÄa) i 358 ha nasada božiÄnih drvaca. U 2016. godini proizvedeno je 2 574 212 božiÄnih drvaca (minimalne visine 20 cm). NaÅ”i uzgajivaÄi uglavnom nemaju genetski kvalitetan, testiran reprodukcijski materijal koji bi se odlikovao stabilnoÅ”Äu poželjnih fenotipskih svojstava, Å”to, meÄu ostalim, rezultira velikim varijacijama u kvaliteti njihova konaÄnoga proizvoda. MeÄutim, za proizvodnju ornamentalno visokovrijednih božiÄnih drvaca potrebno je raspolagati kvalitetnim genotipovima koji Äe se uzgajati u primjereno optimalnim okoliÅ”nim uvjetima. Samo podjednakom brigom za obje navedene sastavnice (genotip i okoliÅ”) može se postiÄi uspjeÅ”na proizvodnja visokokvalitetnih drvaca. Zbog toga smo odluÄili pokrenuti proces oplemenjivanja radi stvaranja i proizvodnje domaÄega genetski poboljÅ”anoga reprodukcijskoga materijala božiÄnih drvaca. U ovom su radu opisane faze i dinamika izvedbe zapoÄetoga oplemenjivanja naÅ”ih dviju autohtonih vrsta ā obiÄne smreke i obiÄne jele. Kao ciljna fenotipska svojstva izabrane su gustoÄa kroÅ”nje, oblik kroÅ”nje i debla te raspored iglica na izbojcima. Definirani su i opisani kriteriji za ocjenjivanje ciljnih fenotipskih svojstava odnosno kriteriji provedene selekcije plus stabala u dostupnim matiÄnim populacijama. Kandidati jedinke su izabrani u kategoriju plus jedinke ako im je ponderirana ukupna ocjena fenotipske kvalitete bila barem jednu standardnu devijaciju viÅ”a od aritmetiÄke sredine pripadajuÄe populacije. Teorijski raspon ponderiranih ocjena kretao se od 2,0 (2,6) do 5,0, pri Äemu je viÅ”a ocjena znaÄila veÄu fenotipsku kvalitetu. Ukupno je ocijenjeno 65 kandidata stabala obiÄne smreke. Selekcijski kriterij zadovoljilo je Å”est kandidata s ocjenama u rasponu od 4,0 do 4,5. U matiÄnoj populaciji obiÄne jele ukupno je ocijenjeno 90 kandidata stabala. Od toga je selekcijski kriterij zadovoljilo 15 kandidata s ocjenama u rasponu od 4,1 do 4,8. Izabrane plus jedinke zaÄetak su kolekcije biljnoga materijala koji Äe poslužiti za daljnje faze procesa oplemenjivanja
Utjecaj hormonskih tretiranja na zakorjenjivanje odrvenjelih reznica obiÄne smreke (Picea abies /L./ Karsten)
U Hrvatskoj je selekcijom plus stabala u jednoj matiÄnoj populaciji pokrenuto oplemenjivanje obiÄne smreke kao božiÄnoga drvca. IduÄi je cilj toga procesa utrÄivanje optimalne procedure kloniranja izabranih plus stabala radi masovne proizvodnje reprodukcijskoga materijala (sadnica). Pretpostavka je da Äe se takvim naÄinom stvoriti kvalitetan reprodukcijski materijal koji Äe se odlikovati stabilnoÅ”Äu ciljnih fenotipskih svojstava. U radu su predstavljeni prvi rezultati istraživanja moguÄnosti kloniranja plus stabala obiÄne smreke metodom zakorjenjivanja odrvenjelih reznica. Glavni cilj istraživanja bio je utvrÄivanje uspjeÅ”nosti primjene raznovrsnih hormonskih tretmana na zakorjenjivanje odrvenjelih reznica starijih (10ā12 godina) stabala obiÄne smreke uzetih u ranoproljetnom i kasnojesenskom razdoblju s razliÄitih visinskih etaža kroÅ”anja (gornja, srednja i donja treÄina kroÅ”nje). Provedena su dva eksperimenta. U prvom je po 270 reznica odrezano u rano proljeÄe iz svake od triju visinskih etaža kroÅ”anja, na uzorku od 10 stabala. Po 10 reznica iz svake etaže tretirano je s 27 razliÄitih tretmana (2 tipa hormona Ć 4 koncentracije otopine Ć 3 vremena trajanja tretiranja + Clonex + kontrola 1 + kontrola 2). Drugo je istraživanje provedeno na po 80 reznica odrezanih iz donje treÄine kroÅ”anja od 13 izabranih plus stabala u kasnu jesen. Po 30 reznica tretirano je u trajanju od 10 sekundi sa: (i) hormonom IBA koncentracije 2500 ppm, (ii) hormonom IBA koncentracije 500 ppm. Ostatak od 20 reznica poslužio je kao kontrola. Nakon tretiranja hormonom reznice su pikirane u tzv. Ā»paper pot saÄaĀ« (sadrže 80 heksagonalnih otvora dubine 15 cm, napunjenih supstratom treset : pijesak u omjeru 3 : 1). U listopadu nakon pikiranja obavljena je determinacija uspjeÅ”nosti zakorjenjivanja svake pojedine reznice, utvrÄivanje broja korijenskih žila zakorijenjenih reznica te izmjere duljine najdulje razvijene korijenske žile na svakoj zakorijenjenoj reznici.
Rezultati su pokazali da se stabla obiÄne smreke u dobi od desetak godina u prosjeku mogu relativno uspjeÅ”no klonirati metodom zakorjenjivanja odrvenjelih reznica uzetih iz donje treÄine kroÅ”anja u kasnu jesen ili rano proljeÄe, i to bez ikakva tretiranja (50 %-tni uspjeh). Postotak zakorijenjenih reznica i kvaliteta novostvorenoga korijena mogu se poboljÅ”ati jeftinim, ali Äini se uÄinkovitim tretiranjem baze reznica destiliranom vodom u trajanju od dva sata. MeÄutim, rezultati su pokazali da bi se tretiranjem baze odrvenjelih reznica uzetih u rano proljeÄe hormonskom otopinom IBA koncentracije 500 ppm u trajanju od 10 s postotak uspjeÅ”noga zakorjenjivanja mogao znaÄajno poveÄati (u prosjeku do 80 %-tne zakorijenjenosti). Odrvenjele reznice uzete iz donje treÄine kroÅ”anja najbolje se zakorjenjuju, Äak i bez ikakvih tretiranja (50 % kontrolnih reznica, u usporedbi s 40 % kontrolnih reznica iz srednje i 20 % zakorijenjenih kontrolnih reznica iz gornje treÄine kroÅ”nje). Rezultati su otkrili izrazite individualne razlike u uspjehu zakorjenjivanja reznica uzetih iz donje etaže (postotak zakorjenjivanja kretao se od 0 % do 100 %)
Utjecaj hormonskih tretmana na zakorjenjivanje odrvenjelih reznica obiÄne jele (Abies alba Mill.)
Cilj je istraživanja bio utvrÄivanje uspjeÅ”nosti primjene raznovrsnih hormonskih tretmana na zakorjenjivanje odrvenjelih reznica obiÄne jele (20+ godina). Provedena su dva pokusa. U prvom su reznice odrezane u rano proljeÄe iz triju visinskih etaža kroÅ”anja. Baze su reznica umakane u hormonske otopine IBA i NAA koncentracije 250, 500, 2500 i 5000 ppm u trajanju od 10 s, 1 h i 2 h. Dio je reznica tretiran komercijalnim preparatom Clonex. Drugi je pokus proveden s reznicama uzetim iz donje treÄine kroÅ”anja u kasnu jesen koje su tretirane 10 s sa: (i) hormonom IBA koncentracije 2500 ppm, (ii) hormonom IBA koncentracije 10 000 ppm, te (iii) kombinacijom hormona IBA 2500 ppm + NAA 500 ppm. Nakon tretiranja reznice su pikirane u kontejnere napunjene supstratom od treseta, pijeska i perlita. U listopadu je determinirana uspjeÅ”nost zakorjenjivanja reznica, utvrÄen je broj korijenskih žila te izmjerena duljina najdulje razvijene korijenske žile. Kloniranje stabala obiÄne jele metodom zakorjenjivanja odrvenjelih reznica imalo je vrlo nisku uspjeÅ”nost (0ā20 %). Primijenjene metode nisu se pokazale uÄinkovitima za potrebe masovnoga kloniranja stabala u dobi od 20 i viÅ”e godina, premda je hormonsko tretiranje poveÄalo uspjeÅ”nost zakorjenjivanja i kvalitativna svojstva korijena. NajveÄi je uspjeh postignut primjenom hormona IBA u koncentraciji 2500 ppm u trajanju od 10 s, i to na reznice uzete u rano proljeÄe iz donje treÄine kroÅ”anja. Reznice se uglavnom nisu zakorijenile bez hormonskoga tretiranja. MeÄutim, identificirani su genotipovi Äije su se reznice zakorijenile i bez hormonskoga tretiranja, premda u vrlo niskom postotku. UtvrÄena je velika meÄugenotipska varijabilnost i u sposobnosti zakorjenjivanja netretiranih reznica, i u reakciji na hormonsko tretiranje
Seed Yield and Morphological Variations of Beechnuts in Four European Beech (Fagus sylvatica L.) Populations in Croatia
Background and Purpose: Since the last decade, the amount and periodicity of European beech seed crops in Croatia have been disrupted, and thus the regeneration of its forests has become increasingly questionable. The aim of this study was to determine: (1) seed yield variations within and among four European beech populations and its relation with tree crowns projection, (2) variation in seed morphometric traits of the studied populations, and (3) various methods of seed yield estimates.
Materials and Methods: Research was carried out in four populations of registered European beech seed stands. Experimental plots 80Ć60 m in size were established in 2016. Horizontal crown projections were calculated for 25 dominant beech trees at each plot. Seed yield per tree was estimated based on seed traps, and by visual scoring of seeding intensity. On a sample of twenty trees (five trees per population) total seed crops were collected by large nets covering their whole crown projections. Different methods of seed yield estimates were compared. The amount of seed yield per population (number of beechnuts per ha) was estimated as well. The length, width and mass of beechnuts were measured. Data were analysed to establish differences within and between populations. Relationships between seed yield and horizontal crown projection, as well as among seed morphometric traits were analysed.
Results and Conclusions: The seed trap method overestimated yields when compared with the real yields caught in the large nets. When crown projections were decreased by 25% the seed trap estimation method was improved. A positive correlation between visual scores of seeding intensity and seed yield estimates proved highly unreliable and therefore inaccurate. The results showed high variability of seed yields within and between the populations. The average yields per population varied from 2.4 to 5.9 million seedsĀ·haā1. A positive and significant correlation between seed yields and crown horizontal projections was shown (R2=0.6285), indicating that stand density is an important factor for seed production. A positive and statistically significant correlation between beechnut mass and width was obtained (R2=0.5875)
The importance and benefits of using the film in the production of vegetables
U ovom radu ispitan je utjecaj kadmija na rast kelja (Brassica oleracea var. sabauda) i kupusa (Brassica oleracea var. capitata), distribucija kadmija u pojedine dijelove biljaka uzgojenih u tlu s razliÄitim udjelima kadmija te njihov fitoekstrakcijski potencijal. TakoÄer je praÄen i utjecaj poveÄanog udjela kadmija u tlu na sadržaj polifenola, kako bi se utvrdila moguÄa povezanost tih sekundarnih metabolita i odgovora biljke na stres uzrokovan prisutnoÅ”Äu teÅ”kih metala u tlu. Dobiveni rezultati mogu biti od osobitog znaÄaja za naÅ”e podruÄje buduÄi da su kupus i kelj važne i relativno Äesto koriÅ”tene namirnice u naÅ”oj prehrani te iznimno dobro uspijevaju u naÅ”em podneblju, stoga bitna je spoznaja kako one mogu akumulirati znaÄajne koliÄine teÅ”kih metala prilikom rasta na oneÄiÅ”Äenom tlu. Njihova dugotrajna konzumacija može nepovoljno utjecati na zdravlje ljudi i životinja.In this work the effect of cadmium on the growth of kale (Brassica oleracea var. sabauda) and cabbage (Brassica oleracea var. capitata), distribution of cadmium in certain parts of the plants grown in soil with different concentrations of cadmium and their phytoextraction potential, was investigated. As well as the impact of an increased effect of cadmium content in the soil on polyphenol content, to be able to determine the possible relationship of these secondary metabolites and plant responses to stress caused by the presence of heavy metals in soil. The obtained results could be of particular importance for our region since cabbage and kale are important and relatively frequently used food in our diet and they extremely grow well in our climate in our climate. Their long-term consummation can have adversely effect on the human and animal health
EFFECT OF DIFFERENT LEVELS OF SOIL POLLUTION BY CADMIUM ON POPLAR SEEDLINGS (Populus nigra var. Italica)
Fitoremedijacija je uspjeÅ”na tehnologija koja iskoriÅ”tava biljke za proÄiÅ”Äavanje tla, ekoloÅ”ki je prihvatljiva, potencijalno jeftina, vizualno nenametljiva i nudi moguÄnost bioobnove tla oneÄiÅ”Äenog teÅ”kim metalima. Potencijal upotrebe drveÄa kao prikladne biljne vrste za fitoremedijaciju tla zagaÄenim teÅ”kim metalima privlaÄi veliku pozornost zadnjih desetljeÄa upravo zbog svojstava kao Å”to su
brzi rast, velika biomasa, dubok korijenski sustav te jeftin uzgoj. U ovom radu ispitani su fitoekstrakcijski potencijal i morfoloÅ”ke znaÄajke jablana (Populus nigra var. Italica) kao odgovor biljke na stres uzrokovan akumulacijom razliÄitih koncentracija kadmija.
Dobiveni rezultati pokazuju da ispitivani jablan (Populus nigra var. Italica) može biti razmatran kao vrsta s fitoekstrakcijskim potencijalom za ÄiÅ”Äenje tala oneÄiÅ”Äenih kadmijem.Phytoremediation is considered the new technology that uses plant for soil purification. It is economically acceptable, inexpensive and aesthetically acceptable and gives the opportunity to remediate heavy metals from contaminated soils. The potential use of trees in the
phytoremediation of soil contaminated with heavy metals has been recognized in the past decades because of trees properties: fast growth, huge biomass, deep root system and cheap cultivation. In this study the phytoextraction potential and morphological properties of poplar (Populus nigra var. Italica) in response to plant stress caused by the accumulation different concentration of cadmium was investigated. Results indicate that the tested poplar (Populus nigra var. Italica) can be considered as a species with fitoextraction potential for the soil polluted with cadmium
Preservation of the Gene Pool of Protected and Significant Trees in the Republic of Croatia
Hrvatski Å”umarski institut (HÅ I) veÄ viÅ”e od 10 godina se bavi projektima oÄuvanja genofonda
zaÅ”tiÄenih i znamenitih stabala na podruÄju Republike Hrvatske (RH). ZnaÄaj ovakvih projekata prepoznat je od strane brojnih javnih ustanova, lokalne samouprave i udruga za zaÅ”titu prirode koje žele saÄuvati genetski materijal takvih stabala za sva vremena. Diljem RH nalaze se brojna znamenita stabla koja nose povijesnu, kulturnu i estetsku simboliku pojedinog kraja, a neka se nalaze i na popisu zaÅ”tiÄenih stabala. Djelatnici HÅ I-a obavljaju struÄne poslove vezane uz proizvodnju klonskog materijala koji obuhvaÄaju: proizvodnju podloga (biljke na koje se cijepe plemke), sakupljanje plemki (granÄice od matiÄnog stabla koje se klonira), vegetativno razmnožavanje (cijepljenje vegetativnog materijala na pripremljene podloge) u plasteniku te uzgoj, Å”kolovanje, njegu i zaÅ”titu biljaka u rasadniku instituta. Navedeni postupci dovode do stvaranja genetski identiÄnih ānovih stabalaā Äime se omoguÄuje trajno zadržavanje starih, izvornih stabala na lokalitetima pojedinog kulturnog dobra.The Croatian Forest Research Institute (CFRI) has been involved in projects for the preservation of the gene pool of protected and significant trees in Croatia for more than 10 years. The importance of this projects has been recognized by numerous public institutions, local governments and nature conservation associations that want to preserve the genetic material of significant trees for future generations. In Croatia, there are numerous trees that have the historical, cultural and aesthetic value of a particular area, and some of them are on the list of protected trees. CFRI employees perform professional work related to the production of clonal material, which includes: root-stocks production (plants on which scions are grafted), scions collection (twigs from the mother tree), vegetative propagation (grafting of vegetative material on prepared root-stocks) in the greenhouse and the cultivation, schooling, care and protection of plants in the instituteās nursery. These procedures lead to the creation of genetically identical ānew treesā, which allows the permanent retention of old, original trees in the localities of individual cultural assets
The influence of soil conditioner āHerbafertilā on the growth and development of amur maple (Acer tataricum L. ssp. ginnala Maxim.) in a nursery trial
Prilikom sadnje stabala u urbanom okruženju Äesto postoji potreba za popravljanjem kvalitete tla, Å”to se može postiÄi primjenom mineralnih gnojiva (utjecaj na kemijska svojstva tla) ili poboljÅ”ivaÄa tla (utjecaj na kemijska i fizikalna svojstva tla). Kineski javor (Acer tataricum L. ssp. ginnala Maxim.) je listopadni grm ili niže stablo zanimljivo za uporabu u hortikulturi zbog atraktivne boje liÅ”Äa, otpornosti na suÅ”u i patogene, te dobrog podnoÅ”enja oneÄiÅ”Äenja. Istraživanje je provedeno radi testiranja utjecaja poboljÅ”ivaÄa tla āHerbafertilā na prirast i stanje ishrane sadnica kineskog javora u usporedbi s klasiÄnom gnojidbom kompleksnim mineralnim gnojivom u poljskom pokusu. Pokus je postavljen kao sluÄajni blok dizajn s tri tretiranja i Äetiri ponavljanja. NajveÄi postotak visinskog prirasta ostvaren je kod tretiranja Herbafertilom, a najveÄa vrijednost postotka debljinskog prirasta utvrÄena je u tretiranju Yara Mila Complex gnojivom. U oba ta tretiranja postignute su adekvatne koncentracije duÅ”ika u biljnom materijalu, ali uz neravnotežu prema ostalim biogenim elementima, Å”to posebice vrijedi za tretiranje Herbafertilom.When planting trees in urban environment, often there is a need for enhancing the soil quality, which can be achieved by the use of mineral fertilizers (for enhancing chemical soil properties) or soil conditioners (influencing both soil chemical and physical properties). Amur maple (Acer tataricum L. ssp. ginnala Maxim.) is a broadleaved bush or a small tree which is interesting for use in horticulture because of attractive leaf colour and drought, pollution and patogen tolerance. We tested the influence of soil conditioner Herbafertil on the growth and nutrition of Amur maple young trees in comparison with classic fertilization with complex mineral fertilizer (YaraMila Complex 12-11-18) in a field trial. The trial was established as a random block design with three treatments and four repetitions. The highest height increment percentages, nitrogen concentration and content were achieved in Herbafertil treatment (Figure 1,2 and 3). We determined that the use of Herbafertil has effects similar to fertilizers, which is due to large quantities suggested for use. Herbafertil may have an edge over mineral fertilizers due to the possibility of its use after planting and its potential beneficial effects in deeper soil horizons
Controlled Germination and Inoculation of Holm Oak (Quercus ilex L.) with Two Species of the Genus Tuber
Tartufi (rod Tuber) su podzemne gljive koje se intenzivno uzgajaju zbog svoje gastronomske vrijednosti i pada prirodne proizvodnje. Suvremeni uzgoj tartufa temelji se na sadnji okuliranih
sadnica na prikladnim zemljiÅ”tima odgovarajuÄih ekoloÅ”kih uvjeta za dovrÅ”etak životnog ciklusa gljive. Svrha istraživanja je pronaÄi optimalnu metodu inokulacije koja Äe osigurati adovoljavajuÄi stupanj mikorizacije. Kao biljka domaÄin izabrana je crnika (Quercus ilex L.) jer je ona prirodni simbiont crnog i ljetnog tartufa, naÅ”a je autohtona vrsta hrasta te ekoloÅ”ki odgovara staniÅ”tu planiranih plantaža. Upotreba inokuliranih sadnica s micelijem tartufa vrlo je Å”iroka, kao npr. podizanje plantaža, poÅ”umljavanje i rekuperacija degradiranih staniÅ”ta ili pak slobodna prodaja istih. Istraživanjem su testirane tri metode Äuvanja i naklijavanja žira, dvije metode inokulacije (inokulacija supstratom i inokulacija ubrizgavanjem u supstrat) s razliÄitim dozama mineralnog gnojiva i razliÄitim tretmanima fulvinskom kiselinom. Postavljeno je 19 razliÄitih pokusa s ukupno 1320 sadnica hrasta crnike inokuliranih s dvjema vrstama roda Tuber, crnim tartufom (Tuber melanosporum (Vittad.)) te ljetnim tartufom (Tuber aestivum (Wulfen) Spreng.)).Truffles (genus Tuber) are hypogeous mushrooms that are intensively cultivated due to their gastronomic value and the decline of natural production. Modern truffle cultivation is based on planting inoculated seedlings on suitable soils of appropriate ecological conditions to complete the life cycle of the fungus. The purpose of the research is to find the optimal inoculation method that will ensure a satisfactory degree of mycorrhization. Holm oak was chosen as the host plant because it is a natural symbiont of black and summer truffles, our indigenous specie and ecologically suitable for the habitat of planned plantations. The use of inoculated seedlings with truffle mycelium is very wide, such as raising plantations, reforestation and recuperation of degraded habitats or their free sale. The research tested three methods of storage and germination of acorns, two methods of inoculation (inoculation with substrate and inoculation by injection into substrate) with different doses of mineral fertilizer and different treatments with fulvic acid. 19 different experiments were set up with a total of 1 320 holm oak seedlings inoculated with two species of the genus Tuber, black truffle (Tuber melanosporum (Vittad.)) and summer truffle (Tuber aestivum (Wulfen) Spreng.))