Sensibilisation de cellules tumorales au cyclophosphamide par transfert de gène (de l'in vitro à l'in vivo)

Les thérapies anticancéreuses ont connu ces dernières années un développement important ayant pour conséquence une amélioration dans la qualité de vie des patients. Cependant la survenue de résistances et la part significative de cancer sans traitement efficace nous oblige à envisager le développement de nouvelles stratégies anticancéreuses. Nous avons développé une nouvelle technique basée sur le principe du gène suicide en utilisant le gène du cytochrome P450 2B6 associé au cyclophosphamide (CPA). Cette technique qui consiste au transfert d un gène métabolisant une prodrogue anticancéreuse dans la tumeur permet une sensibilisation des tumeurs à cette prodrogue. Le premier objectif de ce travail a consisté à améliorer le métabolisme de la prodrogue en construisant un gène muté du CYP2B6 en fusion avec la réductase, partenaire indispensable du CYP. Dans un deuxième temps nous avons transféré le gène CYP2B6TM-RED dans des cellules tumorales qui sont devenues sensibles au CPA entrainant une éradication des tumeurs. Ces résultats ont été confirmés in vivo sur des modèles de souris immunocompétentes. Nous avons, en plus de l effet cytotoxique, mis en évidence un important effet bystander et le développement d une immunité antitumorale spécifique. Ceci nous laisse penser que cette méthode peut permettre de protéger contre les récidives et les métastases. Les bons résultats obtenus dans le développement de cette nouvelle stratégie anticancéreuse, nous laissent espérer d un futur passage en clinique. Pour cela de nouveaux modèles animaux devront être mis au point pour optimiser le transfert du transgène dans les tumeurs.Anticancer therapies had, in recent years, an important development that results in an improvement in the quality of life of patients. However, the occurrence of resistance and the significant proportion of untreated cancer force us to consider the development of new anticancer strategies. We have developed a new technique based on the principle of suicide gene using the gene of cytochrome P450 2B6 associated with cyclophosphamide (CPA). This technique involves the transfer of a gene metabolizing an anticancer prodrug within the tumor allowing tumors sensitization to this prodrug. The first objective of this work was to improve the metabolism of the prodrug in building a mutated CYP2B6 fused with the reductase gene essential partner of CYP. In a second step we transferred the CYP2B6TM-RED gene in tumor cells that have been significantly sensitized. These results were confirmed on in vivo models of immunocompetent mice. In addition to the cytotoxic effect, mice were able to develop a specific anti-tumor immunity. This suggests to us that this method can protect against recurrence and metastasis. The good results obtained in the development of this new anticancer strategy, let us hope for a future transition into clinic. For this, new animal models will be developed to definitively validate the method.PARIS5-Bibliotheque electronique (751069902) / SudocPARIS-BIUM-Bib. électronique (751069903) / SudocSudocFranceF

Combined transcriptomic-(1)H NMR metabonomic study reveals yhat monoethylhexyl phthalate stimulates adipogenesis and glyceroneogenesis in human adipocytes

Adipose tissue is a major storage site for lipophilic environmental contaminants. The environmental metabolic disruptor hypothesis postulates that some pollutants can promote obesity or metabolic disorders by activating nuclear receptors involved in the control of energetic homeostasis. In this context, monoethylhexyl phthalate (MEHP) is of particular concern since it was shown to activate the peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in 3T3-L1 murine preadipocytes. In the present work, we used an untargeted, combined transcriptomic-(1)H NMR-based metabonomic approach to describe the overall effect of MEHP on primary cultures of human subcutaneous adipocytes differentiated in vitro. MEHP stimulated rapidly and selectively the expression of genes involved in glyceroneogenesis, enhanced the expression of the cytosolic phosphoenolpyruvate carboxykinase, and reduced fatty acid release. These results demonstrate that MEHP increased glyceroneogenesis and fatty acid reesterification in human adipocytes. A longer treatment with MEHP induced the expression of genes involved in triglycerides uptake, synthesis, and storage; decreased intracellular lactate, glutamine, and other amino acids; increased aspartate and NAD, and resulted in a global increase in triglycerides. Altogether, these results indicate that MEHP promoted the differentiation of human preadipocytes to adipocytes. These mechanisms might contribute to the suspected obesogenic effect of MEHP

GSTP1 et p53 (marqueurs prédictifs de la réponse à la chimiothérapie associant le 5-Fluorouracile et le Cisplatine dans les cancers des voies aérodigestives supérieures)

L' optimisation de la stratégie thérapeutique nécessite la détermination préalable des paramètres prédictifs de la réponse des patients aux médicaments anticancéreux. Chez des patients atteints de carcinomes épidermoïdes des voies aérodigestives supérieures (VADS) et traités par chimiothérapie néo-adjuvante à base de Cisplatine et de 5-Fluorouracile, nous avons montré le lien entre la présence de l' allèle GSTP1105val et la présence plus importante de mutations du gène p53, que la délétion du gène GSTM1 est un facteur de risque des cancers du larynx (2,6 fois), que la réponse à la chimiothérapie est associée à une faible concentration de GSTP1 plasmatique. La présence de mutations p53 entraîne une réduction de la chimio-sensibilité au CDDP et 5-FU. Nous avons mis en évidence une différence significative entre la présence de mutations p53 chez les patients répondeurs et les patients..PARIS5-BU-Necker : Fermée (751152101) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Application des puces à ADN aux cytochromes P450

PARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Conséquences toxicogénomiques de la surexpression du CYP2C9 dans les cellules HepG2

PARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Etude de la régulation post-transcriptionnelle du CYP2B1 par l'insuline

LYON1-BU Santé (693882101) / SudocRENNES1-BU Santé (352382103) / SudocSudocFranceF

Etude de la régulation post-transcriptionnelle du CYP2B1 et 2E1 par l'insuline (mise en évidence et localisation d'une interaction ARN-protéines)

PARIS5-BU Saints-Pères (751062109) / SudocSudocFranceF

Idiosyncratiques et « omiques » peuvent-ils rimer ?

Les toxicités idiosyncratiques sont des effets indésirables rares induits par des médicaments. Ces réactions ne sont généralement pas prédites pendant la phase de développement des médicaments, mais peuvent conduire au décès des patients. L’utilisation d’outils puissants comme les technologies « omiques » (génomiques, transcriptomiques, protéomiques, métabonomiques, etc.) permet-elle de prédire ces réactions ? Nous présentons dans cette revue des études génomiques qui ont permis d’identifier de nouveaux biomarqueurs utilisés pour prévenir les effets indésirables chez les patients et des études transcriptomiques. Celles-ci ont mis en évidence des processus biologiques altérés par l’exposition au médicament et ont ainsi amélioré la compréhension mécanistique des toxicités

Modification of hepatic drug-metabolizing enzymes in rat fed naturally occurring allyl sulphides

42 ref.International audienc