ETUDE DES CARACTERISTIQUES ET DE LA SIGNIFICATION PHYSIOPATHOGENIQUE DES REPONSES LYMPHOCYTAIRES T DIRIGEES CONTRE DES HERPESVIRUS COMMUNS CHEZ DES PATIENTS ATTEINTS D'ARTHRITE CHRONIQUE

NANTES-BU Sciences (441092104) / SudocSudocFranceF

Analyse de la contribution des réponses lymphocytaires T spécifiques d'herpesvirus au répertoire alloréactif par criblage de lymphocytes T CD4+ ou CD8+ spécifiques du cytomégalovirus ou du virus d'Epstein-Barr

Les lymphocytes T exprimant des récepteurs pour l'antigène de type ab sont sélectionnés dans le thymus et ils sont de ce fait restreints à reconnaître des molécules du Complexe Majeur d'Histocompatibilité (CMH) du soi chargées en peptide. Néanmoins, les lymphocytes T sont fréquemment cross-réactifs vis à vis de molécules du CMH allogéniques. Bien que l'association entre des infections virales persistantes et le rejet d'allogreffes soit connue de longue date, peu d'exemples de cross-réactivités entre un complexe CMH du soi/peptide viral et des molécules du CMH allogéniques ont été décrits à ce jour. Nous avons criblé des populations de lymphocytes T CD4+ ou CD8+, dont la spécificité antigénique vis à vis de deux herpesvirus infectant une large partie de la population humaine, le virus d'Epstein-Barr et le cytomegalovirus, a été bien caractérisée afin d'évaluer la contribution de ces réponses au répertoire alloréactif. La plupart des lignées criblées ont été obtenues par tri immunomagnétique à l'aide de billes recouvertes de complexes CMH/peptide recombinants. Nos résultats montrent que des cellules T spécifiques d'épitopes d'herpesvirus montrent des réactions croisées avec des molécules du CMH allogéniques, manifestant une forte cytotoxicité vis à vis de différentes catégories de cellules cibles, et qu'elles pourraient ainsi contribuer au rejet d'allogreffes. Nous avons d'autre part mis en évidence que des lymphocytes T CD8+ peuvent manifester une alloréactivité médiée par un récepteur activateur de type NKR (récepteur de cellules Natural Killer) de la famille des LIR/ILT, renforçant la notion que des NKR activateurs contribuent à l'alloréactivitéT lymphocytes expressing ab T cell antigen receptors are selected in the thymus, and are thus restricted to recognize self Major Histocompatibility Complex (MHC) molecules loaded with peptides. Yet, T lymphocytes frequently cross-react with allogeneic MHC molecules. Though association between persistent viral infection and allograft rejection is well admitted, few examples of T-cell cross-reactivity between self-MHC/viral and allogeneic HLA molecules have been documented so far. We appraised in this study the alloreactive potential of CD8+ or CD4+ T cell populations, specific for immunodominant epitopes derived from cytomegalovirus (HCMV) or Epstein-Barr virus (EBV), two herpesviruses that infect a large fraction of the human population. Most T cell lines that were screened were obtained by immunomagnetic sorting, using beads covered with recombinant peptide/MHC multimeric complexes. Our results show that herpesvirus-specific T cells frequently cross-react with allogeneic MHC molecules, exhibiting vigorous cytotoxicity toward different types of target cells. Thus, virus-specific T cells recognizing allo-MHC alleles may play an essential role in solid organ rejection. On the other hand, we bring evidence that CD8+ T lymphocytes can mediate alloresponses through an activating NKR receptor (Natural Killer cell receptor) of the LIR/ILT family, supporting the notion that activating NKR contribute to alloreactivityNANTES-BU Sciences (441092104) / SudocSudocFranceF

Analyse de réponses lymphocytaires T CD8+ dirigées contre le virus de l'hépatite C (corrélation avec le statut clinique)

La majorité des individus infectés par le virus de l'hépatite C (VHC) restent chroniquement infectés et sont prédisposés à une cirrhose ou à un hépatocarcinome. Pour mieux comprendre les mécanismes qui influencent la progression vers l'infection chronique, nous avons fait une analyse fonctionnelle et moléculaire de lymphocytes T (LT) VHC-spécifiques chez des individus séropositifs, ayant ou non résolu leur infection, ainsi que chez des individus séronégatifs. Nous avons isolé par tri immunomagnétique, des LT CD8+ dirigés contre trois épitopes VHC immunodominants restreints par HLA-A*0201. Des LT spécifiques de ces complexes antigéniques ont pu être isolés pour tous les individus. Les patients chroniquement infectés ont montré des réponses T VHC-spécifiques plus faibles que les patients qui avaient résolu leur infection, en termes de production d'IFN-gamma, de cytotoxicité et de tests de dégranulation. Ces différences fonctionnelles seraient liées à une moindre fréquence de LT spécifiques exprimant un TCR de forte affinité chez les patients chroniquement infectés, plutôt qu à des défauts fonctionnels intrinsèques ou à une down-modulation par des récepteurs inhibiteurs. Les individus sains ont montré majoritairement des réponses de faible avidité, analogues à celles observées chez des patients en infection chronique, bien que des populations de forte avidité aient été observées chez certains individus. Nos résultats indiquent qu'un enrichissement en LT de forte avidité est associé à une clairance virale efficace et suggèrent un lien entre la qualité du répertoire lymphocytaire T VHC-spécifique initial et la susceptibilité à l'infection chroniqueUp to 170 million people are infected by hepatitis C virus (HCV), among whom 4/5 remain chronically infected and are predisposed to cirrhosis and/or hepatocarcinoma. To better understand the mechanisms that influence progression to HCV chronic infection versus viral control, we performed an in-depth functional and molecular analysis of highly purified HCV-specific T cells in seropositive donors, having resolved their infection or not, and in HCV-seronegative healthy donors. We managed to isolate from blood samples HCV-specific CD8+ T cells directed against three immunodominant HCV epitopes restricted by HLA-A*0201, using magnetic beads coated with HLA class I/peptide complexes. T cell populations specific to those antigens were isolated from almost all donors, irrespective of their serological status. Chronically infected patients yielded weaker HCV-specific CD8+ responses than those having cleared their infection, as assessed by IFN- production, cytotoxicity and degranulation assays. These functional differences were primarily accounted for by decreased frequency of specific T cells expressing high-affinity TCR in chronically infected patients rather than by intrinsic T cell functional defects or by active downmodulation by inhibitory receptors. Healthy donors yielded mainly low avidity HCV-specific T cell responses, very similar to chronic patients, although high avidity subsets were detected in some individuals. Our results indicate that enrichment for high avidity T cells is associated with successful viral clearance and suggest a link between the quality of the initial HCV-specific T cell repertoire and susceptibility to chronic infectionNANTES-BU Sciences (441092104) / SudocSudocFranceF