Analyse de réponses lymphocytaires T CD8+ dirigées contre le virus de l'hépatite C (corrélation avec le statut clinique)

Abstract

La majorité des individus infectés par le virus de l'hépatite C (VHC) restent chroniquement infectés et sont prédisposés à une cirrhose ou à un hépatocarcinome. Pour mieux comprendre les mécanismes qui influencent la progression vers l'infection chronique, nous avons fait une analyse fonctionnelle et moléculaire de lymphocytes T (LT) VHC-spécifiques chez des individus séropositifs, ayant ou non résolu leur infection, ainsi que chez des individus séronégatifs. Nous avons isolé par tri immunomagnétique, des LT CD8+ dirigés contre trois épitopes VHC immunodominants restreints par HLA-A*0201. Des LT spécifiques de ces complexes antigéniques ont pu être isolés pour tous les individus. Les patients chroniquement infectés ont montré des réponses T VHC-spécifiques plus faibles que les patients qui avaient résolu leur infection, en termes de production d'IFN-gamma, de cytotoxicité et de tests de dégranulation. Ces différences fonctionnelles seraient liées à une moindre fréquence de LT spécifiques exprimant un TCR de forte affinité chez les patients chroniquement infectés, plutôt qu à des défauts fonctionnels intrinsèques ou à une down-modulation par des récepteurs inhibiteurs. Les individus sains ont montré majoritairement des réponses de faible avidité, analogues à celles observées chez des patients en infection chronique, bien que des populations de forte avidité aient été observées chez certains individus. Nos résultats indiquent qu'un enrichissement en LT de forte avidité est associé à une clairance virale efficace et suggèrent un lien entre la qualité du répertoire lymphocytaire T VHC-spécifique initial et la susceptibilité à l'infection chroniqueUp to 170 million people are infected by hepatitis C virus (HCV), among whom 4/5 remain chronically infected and are predisposed to cirrhosis and/or hepatocarcinoma. To better understand the mechanisms that influence progression to HCV chronic infection versus viral control, we performed an in-depth functional and molecular analysis of highly purified HCV-specific T cells in seropositive donors, having resolved their infection or not, and in HCV-seronegative healthy donors. We managed to isolate from blood samples HCV-specific CD8+ T cells directed against three immunodominant HCV epitopes restricted by HLA-A*0201, using magnetic beads coated with HLA class I/peptide complexes. T cell populations specific to those antigens were isolated from almost all donors, irrespective of their serological status. Chronically infected patients yielded weaker HCV-specific CD8+ responses than those having cleared their infection, as assessed by IFN- production, cytotoxicity and degranulation assays. These functional differences were primarily accounted for by decreased frequency of specific T cells expressing high-affinity TCR in chronically infected patients rather than by intrinsic T cell functional defects or by active downmodulation by inhibitory receptors. Healthy donors yielded mainly low avidity HCV-specific T cell responses, very similar to chronic patients, although high avidity subsets were detected in some individuals. Our results indicate that enrichment for high avidity T cells is associated with successful viral clearance and suggest a link between the quality of the initial HCV-specific T cell repertoire and susceptibility to chronic infectionNANTES-BU Sciences (441092104) / SudocSudocFranceF