Generación de modelos de xenoinjerto derivados de pacientes (PDX) portadores de cáncer cervicouterino avanzado y evaluación de la eficacia antitumoral de la terapia antisentido

Tesis (Magíster en Biotecnología)El cáncer cervicouterino (CaCu) es uno de los cánceres diagnosticado con mayor frecuencia en mujeres, junto con el de mama y estómago. En Chile, cerca de 1.441 nuevos casos son diagnosticados anualmente con una tasa de mortalidad cercana al 50%. Los tratamientos existentes, como las cirugías y la quimioterapia, son agresivos y afectan la calidad de vida del paciente. Además, estos tratamientos no son del todo efectivos, y la aparición de resistencia al tratamiento y recurrencia de enfermedad son un importante problema de salud. Es por esto que es urgente desarrollar nuevas terapias que sean más eficientes y que tengan pocos efectos secundarios. En nuestro laboratorio se ha descrito una familia de RNAs no codificantes de origen mitocondrial (ncmtRNAs) compuesta por los transcritos sentido (SncmtRNA) y antisentido (ASncmtRNAS). Estos transcritos tienen una expresión diferencial según el estado proliferativo; en células y biopsias de tejido normal proliferante se detectan ambos transcritos. Células en reposo muestran nula expresión de estos transcritos, mientras que, células tumorales expresan el transcrito sentido y regulan negativamente el transcrito antisentido. La interferencia de los ASncmtRNAs, con oligonucleótidos (ASOs), produce una muerte masiva y selectiva de las células tumorales independiente de su origen. Esto se ha observado in vitro en cultivos primarios de cáncer cervicouterino avanzado. Para validar la terapia en modelos in vivo, se estableció un modelo xenoinjerto derivado de paciente (PDX) portador de cáncer cervicouterino avanzado donde se evaluaron las características histológicas y moleculares de una biopsia inicial a través de las diferentes generaciones. Los resultados de la terapia mostraron que no hubo diferencias en la cinética de crecimiento del tumor, pero si a nivel de metástasis y sobrevida. En un futuro ensayo, el régimen de administración debe ser evaluado en el modelo PDX.Cervical cancer (CaCu) is one of the most frequently diagnosed cancer in women together with breast and stomach cancer. In Chile, about 1.441 new cases are diagnosed annually with a mortality rate close to 50%. The existing treatments, like surgeries and chemotherapy, are aggressive and affect the life quality of the patient. Besides, these treatments are not entirely effective, and emergence of treatment resistance and sickness recurrence are an important health problem. Therefore, developing new therapies with more efficiency and less side effects is urgent. In our laboratory, it has been described a family of non-coding RNAs of mitochondrial origin (ncmtRNAS), which is composed by sense (SncmtRNA) and antisense transcripts (ASncmtRNAS). These transcripts have a differential expression, in cells and biopsies of normal tissue they are both expressed. Resting cells show no expression of these transcripts, while tumorous cells express the sense transcript and downregulate the antisense. The interference of the ASncmtRNAs with oligonucleotides (ASOs) causes a massive and selective cell death of tumorous cells independent of their origin. This has been observed on in vitro primary cultures of advanced cervical cancer, and to validate this therapy on in vivo models, an advanced cervical cancer carrier patient derived xenograft model (PDX) was stablished, from which, histological and molecular characteristics were evaluated from an initial biopsy through several generations. The therapy results showed that there was not differences on the kinetics of the tumor growth, but there was at metastasis and survival levels. In future assays, the administration regimen should be evaluated on the PDX model