New species of Ehrlichia isolated from Rhipicephalus (Boophilus) microplus shows an ortholog of the E. canis major immunogenic glycoprotein gp36 with a new sequence of tandem repeats

Background: Ehrlichia species are the etiological agents of emerging and life-threatening tick-borne human zoonoses that inflict serious and fatal infections in companion animals and livestock. The aim of this paper was to phylogeneticaly characterise a new species of Ehrlichia isolated from Rhipicephalus (Boophilus) microplus from Minas Gerais, Brazil. Methods: The agent was isolated from the hemolymph of Rhipicephalus (B.) microplus engorged females that had been collected from naturally infested cattle in a farm in the state of Minas Gerais, Brazil. This agent was then established and cultured in IDE8 tick cells. The molecular and phylogenetic analysis was based on 16S rRNA, groEL, dsb, gltA and gp36 genes. We used the maximum likelihood method to construct the phylogenetic trees. Results: The phylogenetic trees based on 16S rRNA, groEL, dsb and gltA showed that the Ehrlichia spp isolated in this study falls in a clade separated from any previously reported Ehrlichia spp. The molecular analysis of the ortholog of gp36, the major immunoreactive glycoproteins in E. canis and ortholog of the E. chaffeensis gp47, showed a unique tandem repeat of 9 amino acids (VPAASGDAQ) when compared with those reported for E. canis, E. chaffeensis and the related mucin-like protein in E. ruminantium. Conclusions: Based on the molecular and phylogenetic analysis of the 16S rRNA, groEL, dsb and gltA genes we concluded that this tick-derived microorganism isolated in Brazil is a new species, named E. mineirensis (UFMG-EV), with predicted novel antigenic properties in the gp36 ortholog glycoprotein. Further studies on this new Ehrlichia spp should address questions about its transmissibility by ticks and its pathogenicity for mammalian hosts

New species of Ehrlichia isolated from Rhipicephalus (Boophilus) microplus shows an ortholog of the E. canis major immunogenic glycoprotein gp36 with a new sequence of tandem repeats

Background: Ehrlichia species are the etiological agents of emerging and life-threatening tick-borne human zoonoses that inflict serious and fatal infections in companion animals and livestock. The aim of this paper was to phylogeneticaly characterise a new species of Ehrlichia isolated from Rhipicephalus (Boophilus) microplus from Minas Gerais, Brazil. Methods: The agent was isolated from the hemolymph of Rhipicephalus (B.) microplus engorged females that had been collected from naturally infested cattle in a farm in the state of Minas Gerais, Brazil. This agent was then established and cultured in IDE8 tick cells. The molecular and phylogenetic analysis was based on 16S rRNA, groEL, dsb, gltA and gp36 genes. We used the maximum likelihood method to construct the phylogenetic trees. Results: The phylogenetic trees based on 16S rRNA, groEL, dsb and gltA showed that the Ehrlichia spp isolated in this study falls in a clade separated from any previously reported Ehrlichia spp. The molecular analysis of the ortholog of gp36, the major immunoreactive glycoproteins in E. canis and ortholog of the E. chaffeensis gp47, showed a unique tandem repeat of 9 amino acids (VPAASGDAQ) when compared with those reported for E. canis, E. chaffeensis and the related mucin-like protein in E. ruminantium. Conclusions: Based on the molecular and phylogenetic analysis of the 16S rRNA, groEL, dsb and gltA genes we concluded that this tick-derived microorganism isolated in Brazil is a new species, named E. mineirensis (UFMG-EV), with predicted novel antigenic properties in the gp36 ortholog glycoprotein. Further studies on this new Ehrlichia spp should address questions about its transmissibility by ticks and its pathogenicity for mammalian hosts

Dinâmica populacional de Rhipicephalus sanguineus (Latrielle, 1806), em Belo Horizonte, Minas Gerais

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-13T06:40:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 disserta__o_formatada_da_j_lia_05_5.pdf: 2103707 bytes, checksum: 5d20716159e7456b3655d77090f820bb (MD5) Previous issue date: 18O objetivo deste estudo foi caracterizar a dinâmica populacional do Rhipicephalus sanguineus no município de Belo Horizonte, Minas Gerais, no período de agosto de 2006 a julho de 2007. Foram realizadas coletas mensais de ínstares de R. sanguineus em 12 cães adultos, pertencentes à nove residências, localizadas nos distritos sanitários Norte e Venda Nova do município. No momento da coleta, questionários foram aplicados aos proprietários para obter dados referentes ao parasitismo humano pelo ixodídeo e considerações, sobre o manejo dos cães, que poderiam interferir na dinâmica populacional do R. sanguineus. Todos os estágios do ciclo biológico do ixodídeo foram encontrados nos cães durante todos os meses e foram constatados três picos na população total, sugerindo que o R. sanguineus realiza três gerações por ano em cães de Belo Horizonte. O total de carrapatos colhidos foi de 7.318, dos quais 5.422 eram adultos, sendo que a infestação apresentou três picos: outubro, março e julho. O total de ínstares imaturos (larvas e ninfas) encontrados parasitando os cães foi de 1.896, sendo 744 larvas e 1.152 ninfas. Foram observados quatro picos na população de larvas (agosto, novembro, janeiro e abril ) e quatro picos na população de ninfas (agosto, fevereiro, abril e junho). O mês de agosto, foi o período em que foram coletados o maior número de ínstares e o mês de maio o menor. Considerando o total de ixodídeos colhidos, a taxa de infestação foi significativamente maior (p<0,05) no inverno e no outono, em relação a primavera e o verão. Os principais sítios de fixação do carrapato foram: pescoço, membro anterior, axila, peito, tórax e dorso até a inserção da última costela. Pelo questionário verificou-se que não houve relato de parasitismo em seres humanos durante o período experimental. Neste trabalho, também foi determinada a taxa de infestação por carrapato em 2.848 cães que freqüentaram o setor de banho e tosa de uma clínica veterinária, localizada no distrito sanitário de Venda Nova. Foi constatado que 7,8% dos cães que freqüentaram o setor de banho e tosa tinham carrapatos, sendo que no inverno e no outono a taxa de infestação foi significativamente maior (p<0,05) se comparado com primavera e verão. Cães machos e animais de pêlo longo foram significativamente (p<0,05) mais notificados quanto à presença de carrapatosThe present study aimed to evaluate the population dynamics of R. sanguineus on dogs living in Belo Horizonte, state of Minas Gerais, Brazil. From August 2006 to July 2007, ticks were collected monthly from 12 adult dogs in nine houses, which were located in the northern and the Venda Nova sanitary districts of the municipal district. Upon collection, questionnaires were applied to owners to obtain data on human parasitism by ixodids and considerations on the management of dogs, which could interfere with the population dynamics of R. sanguineus. All stages of the life cycle of ixodid were found in dogs during every month and were found three peaks in the total population, suggesting that the R. sanguineus holds three generations per year in dogs from Belo Horizonte. The total number of ticks collected was 7,318, of which 5,422 were adults, and the infestation presented three peaks: October, March and July. The total instars immature (larvae and nymphs) found infecting the dogs was 1,896, from this 744 larvae and 1,152 nymphs. Four peaks were observed in the population of larvae (August, November, January and April) and four peaks in the population of nymphs (August, February, April and June). August was the month in which they were collected the largest number of instars and the lowest month of May. Considering the total ixodids collected, the rate of infestation was significantly higher (p<0.05) in winter and in autumn, regarding the spring and summer. The main sites for fixing ticks were: neck, a toracic member, axilla, chest, chest by back to the insertion of the last rib. For the questionnaire it was found that there was no report of parasitism in humans during the trial period. This work was also determined the rate of tick infestation in 2,848 dogs who attended of a pet care department of the small animal veterinary clinic, located in the sanitary district of Venda Nova. It was found that 7.8% of the dogs were infested with ticks and the infestation was higher in the winter and autumn (p<0.05) than in the spring and the summer. The percentage of male dogs infested with ticks was significantly higher (58.29%) than the percentage of infested female dogs (41.70%

Ocorrência de hemoparasitos e ectoparasitos em veado-catingueiro (Mazama gouzoubira Fischer, 1814), veado-campeiro (Ozotocerus bezoarticus Linnaeus, 1758) e cervo-do-pantanal (Blastocerus dichotomus Illiger, 1815): utilização de métodos parasitológicos e moleculares

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-10T11:52:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_julia.pdf: 2379659 bytes, checksum: 3f1df51ab50946e474c9f1b02e30cb00 (MD5) Previous issue date: 1Os cervídeos são ruminantes selvagens que estão em contato com os ruminantes domésticos em várias regiões do Brasil, facilitando, assim, o trânsito de patógenos entre os dois grupos. Esse grupo de ruminantes possui espécies ameaçadas de extinção. Em relação aos animais de cativeiro, o trânsito de animais entre zoológicos ou criatórios favorece a introdução de micro-organismos infecciosos em outro plantel. O objetivo deste trabalho foi pesquisar a presença de hemoparasitos e ectoparasitos em populações de cervídeos brasileiros, já que esse conhecimento é importante para os profissionais envolvidos na preservação e sanidade desses animais, além do papel desses ruminantes como possível reservatório desses agentes infecciosos para os animais domésticos e seres humanos. Foram analisadas amostras sanguíneas de 89 cervídeos, sendo 29 amostras de animais pertencentes ao estado de Minas Gerais (MG) e 60 amostras de Mato Grosso do Sul (MS). As amostras de MS foram de veados-campeiros (Ozotocerus bezoarticus) de vida livre, e as amostras dos animais de Minas Gerais originaram-se de veados-catingueiros (Mazama gouazoubira) e cervos-do-pantanal (Blastocerus dichotomus). Nas amostras sanguíneas, foi realizada a pesquisa de DNA dos parasitos dos gêneros Anaplasma, Ehrlichia, Babesia, Theileria e Trypanosoma, através de nested ou semi-nested PCR seguido de sequenciamento das amostras positivas. Quanto às riquétsias, dos 29 animais pertencentes ao estado de Minas Gerais, 27 (93,1%) apresentaram-se positivos para espécies de Anaplasmataceae, sendo 79,3% para A. marginale, 17,2% para Anaplasma spp. (similaridade com A. phagocytophilum e A. platys), 3,4% para E. chaffeensis e 3,4% para A. bovis. Dos 60 veados-campeiros do MS, 29 (48,3%) foram positivos para A. marginale. Na pesquisa de hemoprotozoários, 72,4% dos cervídeos de Minas Gerais estavam infectados. Desses, 80,9% por Theileria cervi, 9,5% por Theileria sp., 4,7% por B. bovis e um 4,7% por B. bigemina. Dos cervídeos do Mato Grosso do Sul, 38,3% foram positivos. Desses, 52,2% para T. cervi, 8,7% para B. bigemina, 13,0% para B. bovis e 10,0% não obtiveram sucesso no sequenciamento. Trypanosoma evansi foi detectado em 24,1% dos 29 cervídeos de Minas Gerais e em 18,3% dos veados-campeiros do Mato Grosso do Sul. Nenhum animal foi positivo para T. vivax. Além dos hemoparasitos, nos animais de MG foram detectados carrapatos das espécies Dermacentor nitens, Amblyomma cajennense e Rhipicephalus (Boophilus) microplus, além de pulgas da espécie Rhopalopsyllus lugubris lugubris, piolhos da espécie Solenopotes binipilosus e sarnas do gênero Psoroptes. Através de análises moleculares, foi verificada a ocorrência de A. marginale nas glândulas salivares de carrapatos da espécie R. microplus, e foi sugestivo a presença de Theileria sp. nas glândulas salivares de carrapatos da espécie D. nitens. O cultivo em células IDE8 de A. marginale oriundo de cervídeo não apresentou estabelecimento efetivo, e as amostras de A. marginale oriundas dos cervídeos mostraram baixa virulência ao serem inoculadas em ruminantes domésticos. De acordo com a literartura pesquisada, o presente trabalho envolve os primeiros registros de parasitos da espécie A. bovis em cervídeos brasileiros e de Theileria spp. neles e em carrapatos D. nitens que parasitavam esses animais, sendo que foi observada uma alta percentagem de animais infectados por Theileria.Os cervídeos são ruminantes selvagens que estão em contato com os ruminantes domésticos em várias regiões do Brasil, facilitando, assim, o trânsito de patógenos entre os dois grupos. Esse grupo de ruminantes possui espécies ameaçadas de extinção. Em relação aos animais de cativeiro, o trânsito de animais entre zoológicos ou criatórios favorece a introdução de micro-organismos infecciosos em outro plantel. O objetivo deste trabalho foi pesquisar a presença de hemoparasitos e ectoparasitos em populações de cervídeos brasileiros, já que esse conhecimento é importante para os profissionais envolvidos na preservação e sanidade desses animais, além do papel desses ruminantes como possível reservatório desses agentes infecciosos para os animais domésticos e seres humanos. Foram analisadas amostras sanguíneas de 89 cervídeos, sendo 29 amostras de animais pertencentes ao estado de Minas Gerais (MG) e 60 amostras de Mato Grosso do Sul (MS). As amostras de MS foram de veados-campeiros (Ozotocerus bezoarticus) de vida livre, e as amostras dos animais de Minas Gerais originaram-se de veados-catingueiros (Mazama gouazoubira) e cervos-do-pantanal (Blastocerus dichotomus). Nas amostras sanguíneas, foi realizada a pesquisa de DNA dos parasitos dos gêneros Anaplasma, Ehrlichia, Babesia, Theileria e Trypanosoma, através de nested ou semi-nested PCR seguido de sequenciamento das amostras positivas. Quanto às riquétsias, dos 29 animais pertencentes ao estado de Minas Gerais, 27 (93,1%) apresentaram-se positivos para espécies de Anaplasmataceae, sendo 79,3% para A. marginale, 17,2% para Anaplasma spp. (similaridade com A. phagocytophilum e A. platys), 3,4% para E. chaffeensis e 3,4% para A. bovis. Dos 60 veados-campeiros do MS, 29 (48,3%) foram positivos para A. marginale. Na pesquisa de hemoprotozoários, 72,4% dos cervídeos de Minas Gerais estavam infectados. Desses, 80,9% por Theileria cervi, 9,5% por Theileria sp., 4,7% por B. bovis e um 4,7% por B. bigemina. Dos cervídeos do Mato Grosso do Sul, 38,3% foram positivos. Desses, 52,2% para T. cervi, 8,7% para B. bigemina, 13,0% para B. bovis e 10,0% não obtiveram sucesso no sequenciamento. Trypanosoma evansi foi detectado em 24,1% dos 29 cervídeos de Minas Gerais e em 18,3% dos veados-campeiros do Mato Grosso do Sul. Nenhum animal foi positivo para T. vivax. Além dos hemoparasitos, nos animais de MG foram detectados carrapatos das espécies Dermacentor nitens, Amblyomma cajennense e Rhipicephalus (Boophilus) microplus, além de pulgas da espécie Rhopalopsyllus lugubris lugubris, piolhos da espécie Solenopotes binipilosus e sarnas do gênero Psoroptes. Através de análises moleculares, foi verificada a ocorrência de A. marginale nas glândulas salivares de carrapatos da espécie R. microplus, e foi sugestivo a presença de Theileria sp. nas glândulas salivares de carrapatos da espécie D. nitens. O cultivo em células IDE8 de A. marginale oriundo de cervídeo não apresentou estabelecimento efetivo, e as amostras de A. marginale oriundas dos cervídeos mostraram baixa virulência ao serem inoculadas em ruminantes domésticos. De acordo com a literartura pesquisada, o presente trabalho envolve os primeiros registros de parasitos da espécie A. bovis em cervídeos brasileiros e de Theileria spp. neles e em carrapatos D. nitens que parasitavam esses animais, sendo que foi observada uma alta percentagem de animais infectados por Theileria