Involvement of Interleukin-10 in the Anti-Inflammatory Effect of Sanyinjiao (SP6) Acupuncture in a Mouse Model of Peritonitis

In this study, we determined the anti-inflammatory effect of manual acupuncture at the Sanyinjiao or Spleen 6 (SP6) point on carrageenan-induced peritonitis in mice and investigated mechanisms that may underlie this effect. In the first set of experiments, male Swiss mice were allocated into five groups: the control (sterile saline), dexamethasone (DEXA), invasive sham-acupuncture (non-acupoint), SP6 acupuncture and carrageenan-treated groups. Ten minutes after needle retention or 30 min after DEXA treatment, mice received an intraperitoneal injection of carrageenan (750 μg/mouse). After 4 h, total leukocyte and differential cell counts (neutrophils and mononuclear), myeloperoxidase (MPO) activity, vascular permeability and cytokine levels were evaluated. In another set of experiments, adrenalectomized (ADX) mice were used to study the involvement of the adrenal gland on the therapeutic effects of acupuncture. Mice were allocated into two groups: the ADX and sham-operated animals (Sham ADX) that were subdivided into four subgroups each: the control (sterile saline), DEXA, SP6 acupuncture and carrageenan-treated groups. The SP6 and DEXA treatments inhibited the inflammatory cell infiltration, vascular permeability and MPO activity in carrageenan-injected mice. In addition, the SP6 treatment also increased interleukin (IL)-10 levels. In contrast, when the animals were adrenalectomized, the SP6 treatment failed to reduce total leukocyte and the plasma extravasation. In conclusion, this study clearly demonstrates the anti-inflammatory effect of SP6 acupuncture in a model of carrageenan-induced peritonitis. Our results demonstrated that SP6 acupuncture depends of the adrenal glands and increased IL-10 levels to produce its anti-inflammatory action

Original Article Involvement of Interleukin-10 in the Anti-Inflammatory Effect of Sanyinjiao (SP6) Acupuncture in a Mouse Model of Peritonitis

In this study, we determined the anti-inflammatory effect of manual acupuncture at the Sanyinjiao or Spleen 6 (SP6) point on carrageenan-induced peritonitis in mice and investigated mechanisms that may underlie this effect. In the first set of experiments, male Swiss mice were allocated into five groups: the control (sterile saline), dexamethasone (DEXA), invasive sham-acupuncture (non-acupoint), SP6 acupuncture and carrageenan-treated groups. Ten minutes after needle retention or 30 min after DEXA treatment, mice received an intraperitoneal injection of carrageenan (750 μg/mouse). After 4 h, total leukocyte and differential cell counts (neutrophils and mononuclear), myeloperoxidase (MPO) activity, vascular permeability and cytokine levels were evaluated. In another set of experiments, adrenalectomized (ADX) mice were used to study the involvement of the adrenal gland on the therapeutic effects of acupuncture. Mice were allocated into two groups: the ADX and sham-operated animals (Sham ADX) that were subdivided into four subgroups each: the control (sterile saline), DEXA, SP6 acupuncture and carrageenan-treated groups. The SP6 and DEXA treatments inhibited the inflammatory cell infiltration, vascular permeability and MPO activity in carrageenan-injected mice. In addition, the SP6 treatment also increased interleukin (IL)-10 levels. In contrast, when the animals were adrenalectomized, the SP6 treatment failed to reduce total leukocyte and the plasma extravasation. In conclusion, this study clearly demonstrates the anti-inflammatory effect of SP6 acupuncture in a model of carrageenan-induced peritonitis. Our results demonstrated that SP6 acupuncture depends of the adrenal glands and increased IL-10 levels to produce its anti-inflammatory action

Participação das endotelinas na hiperalgesia mecânica associada à neuropatia periférica induzida por citoplasma em camundongos

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2019.Desde 1970, a cisplatina é um quimioterápico muito utilizado para o tratamento de diversos tipos de tumores sólidos. No entanto, um dos efeitos colaterais mais limitantes deste fármaco é o aparecimento de neuropatias periféricas, que acometem cerca de metade dos pacientes submetidos a tratamento com ele. A patofisiologia deste tipo de dor causada por cisplatina ainda é bem pouco conhecida e de difícil manejo clínico. Por outro lado, alguns trabalhos demonstram o envolvimento do sistema das endotelinas em diversos tipos de neuropatia, mas sua participação na mediação de neuropatias associadas à quimioterapia ainda é desconhecida. O presente estudo teve como objetivo maior verificar se as endotelinas estão implicadas na manutenção da neuropatia induzida por cisplatina em camundongos. Verificou-se que injeções semanais de Cisplatina, na dose de 3 mg/kg (i.p.) por 4 semanas, causavam hiperalgesia mecânica de longa duração tanto na pata posterior quanto na face dos animais tratados. A resposta hiperalgésica mecânica dos animais tratados com cisplatina não foi modificada pelo tratamento neonatal com capsaicina. Drogas de referência para controle de dor e inflamação, tais como morfina, dexametasona, indometacina e celecoxibe reverteram parcialmente a hiperalgesia mecânica na pata e na face dos animais na primeira e na segunda semana após o início do tratamento com cisplatina, mas não foram efetivos na quarta semana. A gabapentina, um dos fármacos de referência para controle de dores neuropáticas, foi efetivo em reverter a hiperalgesia em ambas as regiões e em todos os períodos avaliados. O tratamento com antagonistas peptídicos seletivos para receptores ET A (BQ-123) e ET B (BQ-788) foram efetivos em reverter a hiperalgesia mecânica da face em todos os períodos avaliados, mas o mesmo não aconteceu na pata posterior, cuja hiperalgesia só foi reduzida por estes fármacos na primeira semana após o início do tratamento com cisplatina. Ensaios de RT-PCR quantitativo detectaram aumentos significativos de RNAm para receptores ET A e ET B no gânglio trigeminal dos camundongos após 2 e 4 semanas de tratamento com o quimioterápico. Também foram observados aumentos na expressão protéica de receptores ET B (mas não ET A ) em imunoensaios de Western Blot no gânglio trigeminal, bem como de ambos os receptores em ensaios de imunofluorescência com gânglios de raízes dorsais lombares obtidos de animais após 2 e 4 semanas de tratamento com cisplatina. Este conjunto de resultados implica o sistema das endotelinas na manifestação da hiperalgesia mecânica associada à neuropatia promovida pelo tratamento prolongado com cisplatina em camundongos. O sistema das endotelinas pode vir a constituir um alvo atrativo para manejo terapêutico da neuropatia causada por este quimioterápico.Abstract: Since 1970, cisplatin has been widely used as a chemotherapeutic drug to treat various types of solid tumors. One of the most limiting side effects of this drug is the occurrence of peripheral neuropathy, which affects about half of the patients and is poorly responsive to currently available analgesics. Currently, the pathophysiology of cisplatin-induced neuropathic pain is still incompletely understood, which hampers its effective clinical management. On the other hand, some studies have implicated the endothelin system in various types of neuropathy, but evidence for the participation of endothelins in mediating chemotherapy-associated neuropathies is lacking. Thus, the present study aimed to examine if endothelins are implicated in the maintenance of cisplatin- induced neuropathy in mice. It was found that weekly injections of cisplatin (3 mg/kg per week, i.p.) for 4 weeks caused long-lasting mechanical hyperalgesia in both the hind paw and forehead. Neonatal capsaicin treatment failed to modify the development of mechanical hyperalgesia in response to cisplatin. Acute treatment with the reference analgesic and/or anti-inflammatory drugs morphine, indomethacin, celecoxib and dexamethasone transiently and partially reversed paw and forehead mechanical hyperalgesia when injected at 1 or 2 weeks after initiating cisplatin treatment, but were effective at 4 weeks. In contrast, gabapentin, a reference drug to control neuropathic pain, was effective in reversing hyperalgesia in both regions in all 3 examined periods. Treatment with peptidergic antagonists selective for ET A (BQ-123) and ET B (BQ-788) receptors effectively reversed mechanical hyperalgesia in the forehead at 1, 2 or 4 weeks after starting cisplatin treatment, but hind paw hyperalgesia was only attenuated by these drugs after the first week. Quantitative RT-PCR assays detected significant increases in mRNA for ET A and ET B receptors in trigeminal ganglia collected at 2 and 4 weeks of cisplatin treatment. At 2 and 4 weeks of treatment with cisplatin, an increase in ET B (but not ET A ) receptor protein expression was observed in trigeminal ganglia by Western blot immunoassay of the trigeminal ganglion, as well as of both receptors in lumbar dorsal root ganglia by immunofluorescence assays. Altogether, the results obtained show that prolonged treatment of mice with cisplatin activates the endothelin system to sustain neuropathic mechanical hyperalgesia of the forehead, but not of the hind paw, where endothelins seem to be involved only during the initial, non- neuropathic, sensory changes. The endothelin system could be an attractive target for therapeutic management of chemotherapy-induced craniofacial neuropathy

Análise da atividade farmacológica do extrato etanólogico da Melissa officinalis L.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em FarmacologiaO presente estudo analisou a possível ação antinociceptiva do extrato etanólico (EE) obtido da Melissa officinalis em modelos de nocicepção química, mecânica e térmica em camundongos e ratos. O EE administrado pela via oral (v.o.), 1 h antes do teste, inibiu significativamente as contorções abdominais induzidas pelo ácido acético, bem como as duas fases do teste da formalina e a nocicepção mediada por glutamato. Além disso, o ácido rosmarínico (0.3-3 mg/kg, v.o.), presente em grandes quantidades no EE, administrado 60 min antes do teste, também reduziu de forma dependente da dose a nocicepção induzida pelo glutamato. O EE ainda mostrou-se eficaz em reverter a nocicepção causada pela constrição parcial do nervo ciático em camundongos por até 12 horas e parece não induzir tolerância e nem ter efeito cumulativo com o tratamento prolongado. Além disso, o EE foi capaz de reverter a hiperalgesia térmica e mecânica induzida pela injeção intraplantar de BK, PGE2 e PMA. Igualmente, o EE foi capaz de prevenir os efeitos deletérios da colite induzida por injeção retal de ácido acético. O EE facilitou a aquisição e a retenção da memória de longa e curta duração, quando analisado no modelo da esquiva inibitória em ratos, facilitação esta revertida pelo pré-tratamento dos animais via i.p. com MK-801, L-NAME, mecamilanima e atropina. A antinocicepção ou facilitação da memória causada pelo EE não está associada a efeitos inespecíficos, como relaxamento muscular ou sedação. Em conjunto, estes resultados sugerem que o EE de Melissa officinalis apresenta importante atividade antinociceptiva em vários modelos experimentais de nocicepção e inflamação em camundongos e ratos, além de atividade facilitadora da memória em ratos no modelo da esquiva inibitória. O seu mecanismo de ação antinociceptiva e facilitadora da memória não estão completamente esclarecidos, mas o presente estudo mostrou que esta ação é dependente, pelo menos em parte, de uma interação com os sistemas glutamatérgico, colinérgico e com a via L-arginina-óxido nítrico