Determination of fat-soluble vitamins A, D2, D3, E and K3 by isotope dilution and LC-MS/MS instrument assembly

The purpose of our publication is the determination of the total amount (of natural origin and added) of fat-soluble vitamins A, D2, D3 and E in low amounts in foods (wheat flour, soft drinks, effervescent tablets) and dietary supplements using a liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method. The samples were diluted with isotope-labeled derivatives of the target components (vitamin A-d6, vitamin D2-d3, vitamin D3-d3, vitamin E-d6), and after extraction and saponification, they were purified by liquid-liquid extraction. After a solvent exchange, the concentration of the vitamins was determined on a C8 HPLC column using acidic mobile phases (0.1% formic acid in water/methanol) and LC-MS/MS technique. In dietary supplements, the analysis of the fat-soluble vitamin K3 may also be important, because the use of vitamin K3 is currently not approved in human formulations. During the determination of vitamin K3, saponification is not necessary, due to its structure, alkaline hydrolysis would lead to the decomposition of vitamin K3, so this component was analyzed by a method different from the one used for the other vitamins. LC-MS/MS analysis of small amounts of vitamin K3 is more complicated than that of other vitamins due to the low sensitivity of the MS instrument to vitamin K3. The determination of vitamin K3 was therefore carried out after chemical derivatization with L-cysteine as a derivatizing reagent, also with isotope dilution and LC-MS/MS technique. After intralaboratory validation, the methods were successfully used in domestic and international proficiency tests in infant formulas and liquid vitamin preparations

Zsírban oldódó A-, D2-, D3-, E- és K3-vitaminok meghatározása izotóphígítással és LC-MS/MS műszeregyüttessel

Közleményünk célja élelmiszerekben (búzaliszt, üdítő, pezsgőtabletta) és étrendkiegészítőkben alacsony mennyiségben előforduló zsírban oldódó A-, D2-, D3-, E-vitaminok teljes (természetes eredetű és hozzáadott) meghatározása folyadékkromatográfiás tandem tömegspektrometriai (LC-MS/MS) módszerrel. A mintákat a célkomponensek izotópjelölt származékaival hígítottuk (A-vitamin-d6, D2-vitamin-d3, D3-vitamin-d3, E-vitamin-d6), majd az extrakciót és szappanosítást követően folyadék-folyadék extrakcióval tisztítottuk azokat. Egy oldószercserét követően C8-as HPLC oszlopon savas mozgófázisok (0,1% hangyasav vízben/ metanolban) alkalmazásával és LC-MS/MS technikával határoztuk meg a vitaminok koncentrációját. Táplálék kiegészítőkben fontos lehet a zsírban oldódó K3-vitamin vizsgálata is, mert a K3-vitamin alkalmazása humán készítményekben jelenleg nem engedélyezett. A K3-vitamin meghatározása során szappanosításra nincs szükség, szerkezetéből adódóan a lúgos hidrolízis a K3-vitamin bomlásához vezetne, így ezt a komponenst egy, a többi vitamintól eltérő módszerrel vizsgáltuk. A K3-vitamin kis mennyiségben történő LC-MS/MS jellegű vizsgálata a K3-vitamin MS készülékben mutatott alacsony érzékenysége miatt bonyolultabb, mint a többi vitaminé. A K3- vitamin meghatározását ezért L-ciszteinnel, mint származékképző reagenssel történő kémiai származékképzést követően végeztük, szintén izotóphígítással és LC-MS/MS technikával. A módszereket laboratóriumon belüli validálását követően hazai és nemzetközi körvizsgálatokban sikeresen alkalmaztuk csecsemő tápszerben és folyékony vitamin készítményben

Fenantrolin mono-N-oxidok előállítása és jellemzése

A munkám során 1,10-fenantrolinból és szubsztituált származékaiból kiindulva állítottam elő mono-N-oxidokat, savas körülményeket alkalmazva (pH≈2) közel sztöchiometrikus mennyiségű peroxomonoszulfát-ion felhasználásával. Munkám fő célja volt az aszimmetrikus kiindulási anyagokból (4MPO, 5MPO, 5NPO és 5KPO) kapott izomer mono-N-oxidok egymástól történő szétválasztása, mivel kutatócsoportunkban ezeknek az izomereknek az elválasztására, illetve részletes vizsgálatára még nem került sor. A korábban meghatározott savi disszociációs állandókat felhasználva eljárást dolgoztam ki a termékelegyek elválasztására analitikai HPLC technikával. A módszereket a 4MPO és 7MPO kivételével sikeresen alkalmaztam preparatív HPLC-vel történő elválasztásra is, így három izomerelegyben sikerült szétválasztani a komponenseket ezáltal hat új anyagot állítva elő.MSc/MAVegyész MScg

Fe(II)-ion hatása a vas(II)bisz-terpiridin komplex és oxon redoxireakciójára

A vas(II)bisz-terpiridin komplex és a peroxomonoszulfát-ion redoxireakcióját tanulmányoztuk szabad Fe(II)-ion jelenlétében és hiányában UV-látható spektroszkópiás módszerrel. A Fe(II)-mentes körülmények közt tapasztalható változások konvencionális spektrofotometriás módon történtek, míg Fe(II)-ion jelenlétében stopped-flow technikát használtunk.Stopped-flow módszerrel vizsgáltuk a szabad Fe(II)-ion jelenlétében lejátszódó jelenségeket: vas(II)-ion jelenlétében sokkal gyorsabb az oxidáció.BSc/BAKémia BScg