Caracterización de micelas de gangliósidos modificadas con moléculas de reconocimiento celular como estrategia de direccionamiento de fármacos

Una de las estrategias terapéuticas actuales contra el cáncer está orientada a mejorar la efectividad de los fármacos anticancerígenos existentes mediante el desarrollo de sistemas innovadores de transporte [13,14] que permitan modificar las características farmacocinéticas y de biodistribución de los principios activos. En esta línea, recientemente desarrollamos una nanoestructura micelar compuesta por monosialoglicoesfingolípidos (GM1) capaces de transportar fármacos hidrofóbicos (Ptx) y anfipáticos (Doxo) con alta eficiencia [80,81]. En este trabajo se planteó modificar estas micelas mediante la incorporación de una molécula de reconocimiento celular, con el objetivo de focalizar la acción citotóxica del fármaco vehiculizado hacia las células tumorales. Se evaluó la incorporación de moléculas de reconocimiento celular como el ácido fólico, anticuerpos, espermidina y lipoproteínas en las micelas de GM1, se caracterizaron las estructuras resultantes y se determinó la actividad farmacológica de las micelas modificadas. Algunas de las estructuras obtenidas, como GM1-espermidina y GM1-LDL mostraron diferencias significativas respecto a las micelas de GM1 en la internalización de fármacos frente a líneas tumorales in vitro. En el caso de GM1-IgG, si bien los resultados de actividad biológica in vitro de los fármacos vehiculizados no mostraron diferencias respecto al efecto de los mismos fármacos transportados en micelas de GM1 sin anticuerpos, se demostró que los anticuerpos forman complejos estables con las micelas, mantienen su capacidad de reconocimiento específico y no son desplazados por otras proteínas plasmáticas. Esto permite proponer al complejo GM1-IgG/fármaco como un sistema mixto, en el cual se puede combinar la acción efectora de los anticuerpos con el efecto biológico de los fármacos. Finalmente, se demostró que moléculas pequeñas como el ácido Fólico (AF) pueden ser incorporadas en la estructura micelar aplicando diferentes estrategias. En las condiciones evaluadas, las micelas modificadas con AF no revelaron diferencias significativas de actividad respecto a las micelas de GM1 frente a células tumorales RF positivas. El conjunto de resultados presentados en este trabajo nos permiten concluir que es posible modificar las micelas de GM1 con moléculas de reconocimiento celular de diferente naturaleza, posibilitando el diseño de micelas funcionales con características adecuadas para aplicaciones farmacológicas.Fil: Garro, Ariel Gustavo. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin

Antibodies can be spontaneously loaded onto monosialoganglioside micelles containing oncological drugs

Recently, we demonstrated that GM1 micelles transport paclitaxel and doxorubicin with high efficiency. Whenthis GM1-drugs complex is incubated with whole serum, albumin was the only one protein that binds spontaneouslyto form GM1-drug-albumin complex. Here, we show that, under specific physicochemical conditions, these micellesinteract with antibodies forming GM1-IgG complexes. The load of IgG in GM1 reaches a maximum at ratios of 1/4(w / w) incubating to 4.5 and preheating the micelles of GM1 at 55-60°C. The IgG of the GM1-IgG complex obtainedunder these experimental conditions retains the biological activity against the soluble and cellular antigens and is notdisplaced from the micelles in the presence of albumin, the main competitive binding protein.Treatment of GM1-IgG with pepsin, does not show the breakage of the IgG like control of free IgG, suggesting thatIgG is deeply bound into GM1, probably via Fc. Moreover, the presence of 1 M NaCl does not prevent neither dissociatethe complex, suggesting the hydrophobic nature of the interaction. The DLS and TEM results shows that GM1-IgGcomplexes have sizes significantly higher than those of GM1 micelles; this is directly related to the amount of IgGloaded. On the other hand GM1-IgG complex also retain the ability to encapsulate oncological drugs, but, an adequatesequence must be followed during the preparation, in order to obtain efficient GM1-drug-IgG ternary complexes. Moreover, the presence of IgG into GM1-oncological drugs complex do not affect the release or the citotoxic activity ofthe encapsulated molecules such as Ptx or Doxo.Fil: Garro, Ariel Gustavo. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Alasino, Roxana Valeria. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Leonhanrd, Victoria. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Heredia, Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Beltramo, Dante Miguel. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

LDL-conjugated to GM1 micelles incorporating anticancer drugs to improve tumor cell uptake

Objective(s): The role of lipoproteins (LDL) as active molecules with preferential tumor interaction, but limited drug delivery capacity, has been previously reported. On the other hand, in a previous report, we demonstrated the high capacity of monosialogangliosides (GM1) micelles as drug transporters. Materials and Methods: In this work, GM1 was loaded with high doses of oncologic drugs such Paclitaxel or Doxorubicin and binded to LDL lipoproteins to form GM1-drug-LDLwater soluble complex. Evidence suggests that both, hydrophobic and electrostatic forces, participate in the interaction, regulated by conditions such as pH, temperature and ionic strength. Results: Results of DLS and TEM show that GM1-LDL complexes are considerably larger than the sum of their individual compounds, with a high charge of electronegative surface (-55.9 mV). In addition, the cytotoxic effect on cell cultures is greater when drugs are contained in GM1-LDL complexes than when loaded in GM1 micelles. Conclusion: The results suggest the participation of active energy-dependent mechanism in the uptake of GM1-LDL drug, probably linked to the LDL receptor by the tumor cells. However, we could not confirm that the transport through LDL receptors is the only one that participates in the cellular uptake of the micelles.Fil: Garro, Ariel Gustavo. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Alasino, Roxana Valeria. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Leonhard, Victoria. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Heredia, Valeria. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Beltramo, Dante Miguel. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Universidad Católica de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentin

Polyamines in the Surface of Lipid Micelles Improve the Cellular Uptake of Antitumoral Agents

Purpose: The ability of spermidine to increase the selectivity of anticancer agents has been studied extensively. In this research we report the combination of this polyamine and GM1 ganglioside micelles and characterize their behavior for drug delivery.Methods: Dynamic light scattering and electron microscopy were used to characterize size and morphology of micelles. Zeta potential was determined using a Nano-zeta potential analyzer. Sizeexclusion chromatography was used to separate different populations. Cytotoxic effect of micelles was evaluated on Hep2 cell line.Results: Covalent conjugation of spermidine to gangliosides produces a clear reduction of the electronegative z potential of micelle surface. DLS analysis shows no significant differences between both micelles, while TEM image shows a smaller size of Spermidine-GM1.These modified micelles load hydrophilic or hydrophobic antitumor drugs and conjugation does not affect the stability of micelles/drug in solution. Spermidine-GM1/Doxo micelles show faster drug release into cells as compared with GM1/Doxo micelles; however, no evidence can be found for the participation of the polyamine transport system in the uptake of modified micelles.Conclusion: While Spermidine-GM1 and GM1 micelles show similar physical properties, spermidine modified micelles are most efficient to release drugs, making this an interesting alternative to consider for drug delivery.Fil: Garro, Ariel Gustavo. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Alasino, Roxana Valeria. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Leonhard, Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Heredia, Valeria. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Beltramo, Dante Miguel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentin

An in silico analysis of Ibuprofen enantiomers in high concentrations of sodium chloride with SARS-CoV-2 main protease

2020 will be remembered worldwide for the outbreak of Coronavirus disease (COVID-19), which quickly spread until it was declared as a global pandemic. The main protease (Mpro) of SARS-CoV-2, a key enzyme in coronavirus, represents an attractive pharmacological target for inhibition of SARS-CoV-2 replication. Here, we evaluated whether the anti-inflammatory drug Ibuprofen, may act as a potential SARS-CoV-2 Mpro inhibitor, using an in silico study. From molecular dynamics (MD) simulations, we also evaluated the influence of ionic strength on the affinity and stability of the Ibuprofen–Mpro complexes. The docking analysis shows that R(−)Ibuprofen and S(+)Ibuprofen isomers can interact with multiple key residues of the main protease, through hydrophobic interactions and hydrogen bonds, with favourable binding energies (−6.2 and −5.7 kcal/mol, respectively). MM-GBSA and MM-PBSA calculations confirm the affinity of these complexes, in terms of binding energies. It also demonstrates that the ionic strength modifies significantly their binding affinities. Different structural parameters calculated from the MD simulations (120 ns) reveal that these complexes are conformational stable in the different conditions analysed. In this context, the results suggest that the condition 2 (0.25 NaCl) bind more tightly the Ibuprofen to Mpro than the others conditions. From the frustration analysis, we could characterize two important regions (Cys44-Pro52 and Linker loop) of this protein involved in the interaction with Ibuprofen. In conclusion, our findings allow us to propose that racemic mixtures of the Ibuprofen enantiomers might be a potential treatment option against SARS-CoV-2 Mpro. However, further research is necessary to determinate their possible medicinal use. Communicated by Ramaswamy H. Sarma.Fil: Clemente, Camila Mara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico Pedagógico de Ciencias Básicas y Aplicadas; ArgentinaFil: Freiberger, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Ravetti, Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico de Ciencias Humanas; ArgentinaFil: Beltramo, Dante Miguel. Universidad Católica de Córdoba; Argentina. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Garro, Ariel Gustavo. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico de Ciencias Humanas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentin

Sistemas nanoparticulados de vehiculización de fármacos: transportador vs fármaco

La eficacia terapéutica de un fármaco está condicionada por muchos factores, dentro de los cuales la solubilidad y el acceso al sitio de acción juegan un rol primordial. Se estima que aproximadamente el 40% de los medicamentos que se encuentran actualmente en el mercado y cerca del90% de las moléculas en desarrollo presentan baja solubilidad en agua. Así, las propiedades de solubilidad de los compuestos continúa siendo uno de los mayores obstáculos en el desarrollo de sistemas de administración de fármacos.Fil: Alasino, Roxana Valeria. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Leonhard, Victoria. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Garro, Ariel Gustavo. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Beltramo, Dante Miguel. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentin

Naringin: nanotechnological strategies for potential pharmaceutical applications

Polyphenols comprise a number of natural substances, such as flavonoids, that show interesting biological effects. Among these substances is naringin, a naturally occurring flavanone glycoside found in citrus fruits and Chinese medicinal herbs. Several studies have shown that naringin has numerous biological properties, including cardioprotective, cholesterol-lowering, anti-Alzheimer’s, nephroprotective, antiageing, antihyperglycemic, antiosteoporotic and gastroprotective, anti-inflammatory, antioxidant, antiapoptotic, anticancer and antiulcer effects. Despite its multiple benefits, the clinical application of naringin is severely restricted due to its susceptibility to oxidation, poor water solubility, and dissolution rate. In addition, naringin shows instability at acidic pH, is enzymatically metabolized by β-glycosidase in the stomach and is degraded in the bloodstream when administered intravenously. These limitations, however, have been overcome thanks to the development of naringin nanoformulations. This review summarizes recent research carried out on strategies designed to improve naringin’s bioactivity for potential therapeutic applications.Fil: Ravetti, Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Garro, Ariel Gustavo. Universidad Nacional de Villa Maria. Instituto Academico de Ciencias Humanas; ArgentinaFil: Gaitán, Agustina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Murature, Mariano. No especifíca;Fil: Galiano, Mariela. No especifíca;Fil: Brignone, Sofía Gisella. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Palma, Santiago Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; Argentin

Enhancing the Functional Properties of Tea Tree Oil: In Vitro Antimicrobial Activity and Microencapsulation Strategy

In the context of addressing antimicrobial drug resistance in periocular infections, Tea TreeOil (TTO) has emerged as a promising therapeutic option. This study aimed to assess the efficacy ofTTO against bacterial strains isolated from ocular infections, with a particular focus on its ability toinhibit biofilm formation. Additionally, we designed and analyzed microcapsules containing TTOto overcome certain unfavorable physicochemical properties and enhance its inherent biologicalattributes. The quality of TTO was confirmed through rigorous analysis using GC-MS and UV-Vistechniques. Our agar diffusion assay demonstrated the effectiveness of Tea Tree Oil (TTO) againstocular bacterial strains, including Corynebacterium spp., coagulase-negative Staphylococcus spp.,and Staphylococcus aureus, as well as a reference strain of Staphylococcus aureus (ATCC 25923). Notably, the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC)for all tested microorganisms were found to be 0.2% and 0.4%, respectively, with the exception ofCorynebacterium spp., which exhibited resistance to TTO. Furthermore, TTO exhibited a substantial reduction in biofilm biomass, ranging from 30% to 70%, as determined by the MTT method.Through the spray-drying technique, we successfully prepared two TTO-containing formulationswith high encapsulation yields (80–85%), microencapsulation efficiency (90–95%), and embeddingrates (approximately 40%). These formulations yielded microcapsules with diameters of 6–12 µm,as determined by laser scattering particle size distribution analysis, and exhibited regular, sphericalmorphologies under scanning electron microscopy. Importantly, UV-Vis analysis post-encapsulationconfirmed the presence of TTO within the capsules, with preserved antioxidant and antimicrobialactivities. In summary, our findings underscore the substantial therapeutic potential of TTO and itsmicrocapsules for treating ocular infections.Fil: Manzanelli, Franco Antonio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Ravetti, Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Brignone, Sofía Gisella. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Garro, Ariel Gustavo. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica; ArgentinaFil: Martinez, Sol Romina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones en Tecnologías Energéticas y Materiales Avanzados. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Tecnologías Energéticas y Materiales Avanzados; ArgentinaFil: Vallejo, Mariana Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Palma, Santiago Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; Argentin

Biochemical characterization of GM1 micelles-amphotericin B interaction

In this work a thorough characterization of the GM1 micelle-Amphotericin B (AmB) interaction was performed. The micelle formation as well as the drug loading occurs spontaneously, although influenced by the physicochemical conditions, pH and temperature. The chromatographic profile of GM1-AmB complexes at different molar ratios shows the existence of two populations. The differential absorbance of GM1, monomeric and aggregate AmB, allowed us to discriminate the presence of all of them in both fractions. Thus, we noted that at higher proportion of AmB in the complex, increases the larger population which is composed mainly of aggregated AmB. The physical behavior of these micelles shows that both GM1- AmB complexes were stable in solution for at least 30 days. However upon freeze-thawing or lyophilization-solubilization cycles, only the smallest population, enriched in monomeric AmB, showed a complete solubilization. In vitro, GM1-AmB micelles were significantly less toxic on cultured cells than other commercial micellar formulations as Fungizone, but had a similar behavior to liposomal formulations as Ambisome. Regarding the antifungal activity of the new formulation, it was very similar to that of other formulations. The characterization of these GM1-AmB complexes is discussed as a potential new formulation able to improve the antifungal therapeutic efficiency of AmB.Fil: Leonhard, Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Alasino, Roxana Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Bianco, Ismael Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentina. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Garro, Ariel Gustavo. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Heredia, Valeria. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; ArgentinaFil: Beltramo, Dante Miguel. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentin