Optimización de la criopreservación (refrigeración y congelación) de espermatozoides de morueco para su aplicación en inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) transcervical

La presente tesis doctoral fue diseñada para optimizar los procesos de criopreservación de espermatozoides de morueco y conseguir una mejor respuesta celular basada en el incremento del vigor cinético, supervivencia, funcionalidad e integridad morfológica. Los espermatozoides preservados deben ser capaces de atravesar la barrera cervical luego de una inseminación artificial (IA) cervical o transcervical. Las técnicas de reproducción asistida (TRA) usadas en los actuales programas de selección y mejora genética ovina están orientadas a mejorar la respuesta espermática para incrementar la fertilidad. En este sentido, la presente tesis está enfocada en la elección de un método de purificación celula rmás eficaz, diluyentes y nuevos aditivos que preserven exitosamente los espermatozoides tanto en refrigeración como en congelación, así como a la optimización de rampas de congelación que minimicen el daño a la células espermática..

Carta de reconhecimento ao Dr. Ricardo Horacio Alberio

Letter of recognition to Dr. Ricardo Horacio AlberioCarta de reconocimiento al Dr. Ricardo Horacio AlberioCarta de reconhecimento ao Dr. Ricardo Horacio Alberi

Comparison Between Intracornual Artificial Insemination and Uterine Body Deposition in Holstein-Friesian Heifers.

Two insemination types were compared: intracornual  and uterine body  deposition  in  40  Holstein-Friesian  heifers in  the province of Azuay, Cuenca Region, Cumbe and Victoria Portete Parishes. The animals were over 18 months old,  weighing more than 300 kg; physical condition  score of  2.5-3.5, and similar management and hygiene cond i-tions. Each treatment was randomized in 4  blocks with 5  heifers each. Functional corpus luteum was determined by ultrasound scanning. PGF2α (250 mcg d-cloprostenol) was used for estrus synchronization. Estrus occurred at 48 and 72 h,  and the size of the pre-ovulatory follicle was measured.  Then, the two techniques were used to inseminate the animals. Gynecological checkup was performed 30 days after to assess pregnancy percent. Uterine body deposition was 35 %, whereas intracornual deposition was significantly higher (70 %)

Comparación entre la inseminación artificial con deposición intracornual y deposición en el cuerpo del útero en novillas Holstein-Friesian.

Se compararon dos inseminaciones:  con deposición  en el cuerpo del útero  y con  deposición intracornual  en 40 novillas Holstein-Friesian, de la provincia  del Azuay, cantón Cuenca, Parroquias Cumbe y Victoria del Portete. Los animales eran mayores de 18  meses,  con peso superior a los 300 kg, condición corporal de 2,5 a 3,5 y  similares condiciones de manejo y sanidad.  Cada tratamiento estuvo distribuido aleatoriamente en 4 bloques de  5 novillas.  Se determinó por ultrasonido el cuerpo lúteo funcional. Para la sincronización de los celos se utilizó PGF2α (250 mcg d-cloprostenol).  A las 48 y 72 h se presentó celo y se midió el tamaño del folículo preovulatorio. Luego  se inseminó con las dos técnicas.  A los 30 días se realizó el chequeo ginecológico para evaluar el por ciento de preñez, que  en el tratamiento con deposición  en el cuerpo del útero  fue  de 35 %, inferior significativamente al tratamiento con deposi-ción intracornual (70 %).Comparison between Artificial Insemination with Intracornual and Uterine Body Deposition in Holstein-Friesian Heifers.ABSTRACTTwo insemination types were compared:  intracornual and uterine body  deposition  in Holstein-Friesian 40  heifers the province of Azuay, Cuanca Region, Cumbe and Victoria Portete Parishes. The animals were over 18 months old, weighing more than 300 kg; physical condition 2.5-3.5, and similar management and hygiene conditions. Each treatment was randomized in 4 blocks with 5 heifers each. Functional corpus luteum was determined by ultrasound. PGF2α (250 mcg d-cloprostenol)  was used for estrus synchronization. Estrus occurred at 48 and 72 h, and the size of the pre-ovulatory  follicle was measured.  Then, the two techniques were used to inseminate the animals. Gynecological checkup was  performed 30 days after to assess pregnancy percent. Uterine body  deposition accounted for 35 %, whereas intracornual deposition was significantly higher (70 %)

Eficacia de dos diluyentes: tris + lectina de soya (AndroMed) y tris + yema de huevo (Triladyl), en la crioconservación de semen de toro de la raza Jersey en Cuenca - Ecuador

El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de dos diluyentes: TRIS + lecitina de soya (androMed®) y TRIS + yema de huevo (Triladyl ®), sobre tres tiempos de equilibrio a 4º C (2, 4 y 7 horas) en refrigeración antes de la congelación y evaluar los porcentajes de motilidad individual progresiva, vitalidad espermática y anomalías post descongelación. Se utilizó el semen de un toro de raza Jersey, colectado en una vagina artificial, diluido y envasado en pajuelas de 0,25 cc a concentración de 20 x 106 espermatozoides, los cuales fueron congelados con vapores de nitrógeno líquido bajando la temperatura en 15 minutos hasta -140º C y luego rápidamente hasta – 196º C. Se evaluó motilidad, viabilidad y anomalías espermáticas. Los datos fueron analizados por medio del diseño completamente al azar (DCA), con las pruebas de significación de Duncan con el 95% de confiabilidad. La motilidad individual progresiva post descongelado con el diluyente AndroMed® (41,81 %), y Triladyl® (40,65%) se comportaron en igual forma (P<0,05), pero se encontraron diferencias significativas en los tiempos de equilibrio, siendo el porcentaje más alto de 2 horas (43,53%), comparado con las 5 horas (41,25%) y 7 horas (38,91%). En vitalidad espermática se obtuvo porcentajes más altos con Triladyl® (51,73%), que con AndroMed® (48,96%) y el mejor tiempo de equilibrio fue el de dos horas (54,06%). Con respecto a anomalías espermáticas se obtuvo mejores resultados con el diluyente Triladyl® (10,19%), que con AndroMed® (10,48) y el mejor tiempo de equilibrio fue de dos horas (9,69%). En conclusión los dos diluyentes utilizados no mostraron diferencias significativas, salvo la prueba de vitalidad espermática que mostró mejores resultados con el Triladyl y en los tiempos de equilibrios se obtuvo mejores resultados a las 2 horas, en el proceso de descongelación.Magíster en Reproducción AnimalCuenc

Usos de sustitutos de leche en la alimentación de terneros

los sustitutos de leche en la alimentación de terneros es un nuevo método de manejo ya que permite conseguir una fuente de alimento a través de derivados de la leche entera de vaca y de materias primas de la zona, abaratando costos de alimentación e incrementando ganancias de peso y producción. Las materias primas más conocidas en la elaboración son: leche en polvo, suero de leche, levadura torula, proteína de soya y harina de pescado, mezclándolos en proporciones recomendadas para satisfacer necesidades de mantenimiento y crecimiento en terneros, puede ser una nueva táctica en la crianza artificial de ternerosDoctor en Medicina Veterinaria y ZootecniaCuenc

Suplementação de geleia real para meios de congelamento e vitrificação melhora a criosobrevivência de espermatozoides de touro

Royal Jelly (RJ) is a substantial nutrient produced by the hypopharynx and mandibular glands of worker bees from 4 to 11 days of age, and its composition is mainly based on water (60–70%), protein (27–41% ) and carbohydrates (30%), lipids (8–19%), vitamins (A, B, C, E), salts, and amino acids. Due to its composition, JR has been successfully used in sperm cryopreservation at concentrations from 0.2 to 1% (w/v) supplemented with synthetic base extenders (eg TRIS or TALP). Its effect has been evidenced in the increase of motility, viability, functionality of the plasmatic membrane and fertilizing capacity of fresh and cryopreserved ram sperm. Conventional freezing requires the use of penetrating cryoprotectants (eg glycerol) to prevent damage caused by ice crystal formation, however, vitrification requires high concentrations (0.1 to 6 M) of non-penetrating cryoprotectants (eg sucrose or trehalose) and rapid cooling, passing rapidly to the glass transition without forming ice crystals. This research evaluated the effect of JR (0.2%) supplemented to freezing (TCG-YH + 5% glycerol) and vitrification (TCG-YH + 100 mM sucrose) media on cryosurvival of bull sperm.La Jalea Real (RJ) es un sustancioso nutriente producido por la hipofaringe y glándulas mandibulares de las abejas obreras de 4 a 11 día de edad, y su composición de basa principalmente en agua (60–70 %), proteína (27–41%) y carbohidratos (30%), lípidos (8–19%), vitaminas (A, B, C, E), sales y aminoácidos. Debido a su composición, la JR ha sido usada exitosamente en la criopreservación de espermatozoides en concentraciones desde 0,2 al 1% (p/v) suplementado a diluyentes de base sintética (ej. TRIS o TALP). Su efecto ha sido evidenciado en el incremento de la motilidad, viabilidad, funcionalidad de la membrana plasmática y capacidad fecundante de esperma fresco y criopreservado de carnero. La congelación convencional requiere el uso de agentes crioprotectores penetrantes (ej. glicerol) para evitar los daños causados por la formación de cristales de hielo, sin embargo, la vitrificación requiere altas concentraciones (0,1 a 6 M) de crioprotectores no penetrantes (ej. sacarosa o trehalosa) y un enfriamiento veloz, pasando rápidamente a la transición vítrea sin formar cristales de hielo. Esta investigación evaluó el efecto de la JR (0,2%) suplementado a los medios de congelación (TCG-YH + 5% glicerol) y vitrificación (TCG-YH + 100 mM sacarosa) sobre criosupervivencia de espermatozoides de toro.A Geleia Real (RJ) é um nutriente substancial produzido pela hipofaringe e glândulas mandibulares de abelhas operárias de 4 a 11 dias de idade, e sua composição é baseada principalmente em água (60–70%), proteína (27–41%) e carboidratos (30%), lipídios (8-19%), vitaminas (A, B, C, E), sais e aminoácidos. Devido à sua composição, JR tem sido utilizado com sucesso na criopreservação de sêmen em concentrações de 0,2 a 1% (p/v) suplementado com extensores de base sintética (ex. TRIS ou TALP). Seu efeito tem sido evidenciado no aumento da motilidade, viabilidade, funcionalidade da membrana plasmática e capacidade fertilizante de sêmen de carneiro fresco e criopreservado. O congelamento convencional requer o uso de crioprotetores penetrantes (por exemplo, glicerol) para evitar danos causados ​​pela formação de cristais de gelo, no entanto, a vitrificação requer altas concentrações (0,1 a 6 M) de crioprotetores não penetrantes (por exemplo, sacarose ou trealose) e resfriamento rápido, passando rapidamente à transição vítrea sem formar cristais de gelo. Esta pesquisa avaliou o efeito de JR (0,2%) suplementado com meios de congelamento (TCG-YH + 5% glicerol) e vitrificação (TCG-YH + 100 mM de sacarose) na criosobrevivência de espermatozoides de touro

Efeito da L-carnitina e da melatonina na criosobrevivência e fertilidade de espermatozóides de galos crioulos (Gallus gallus domesticus)

The production of Creole chicken (Gallus gallus domesticus) in Ecuador is of transcendental importance in the economy and nutrition of rural and city families. Creole chicken has been considered a valuable genetic resource in backyard production, constituting an important economic resource and a basic product in the traditional diet. Therefore, it is necessary to search for biotechnological alternatives to maximize the use of this indigenous genetic material. Sperm cryopreservation and artificial insemination (AI) of birds has been used successfully in hens of different breeds; however, as far as we know, the use of these reproductive biotechnologies in Creole birds in Ecuador is deficient or null. Avian spermatozoa become vulnerable to free radicals (eg H2O2, O2- and OH-) due to polyunsaturated fatty acids (PUFA) present in the plasma membrane. Consequently, ROS easily combine with PUFAs and lead to the production of lipid peroxidation (LPO), causing decreased motility, viability and fertilizing capacity of rooster sperm. In this sense, this research evaluated the effects of ME and LC supplemented to the freezing medium on the cryosurvival and fertility of spermatozoa from Creole roosters (Gallus gallus domesticus).La producción de pollo criollo (Gallus gallus domesticus) en el Ecuador es de trascendental importancia en la economía y nutrición de las familias rurales y citadinas. El pollo criollo ha sido considerado como un valioso recurso genético en la producción de traspatio, constituyendo un importante recurso económico y un producto básico en la dieta tradicional. Por lo tanto, es necesario buscar alternativas biotecnológicas para maximizar el uso de este material genético autóctono. La criopreservación espermática e inseminación artificial (IA) de aves ha sido usado satisfactoriamente en gallinas de diferentes razas; sin embargo, hasta donde conocemos, el uso de estas biotecnologías reproductivas en aves criollas en Ecuador, es deficiente o nula. Los espermatozoides aviares se hacen vulnerables a los radicales libres (ej. H2O2, O2- y OH-) debido a los ácidos grasos poliinsaturados (PUFA) presentes en la membrana plasmática. Consecuentemente, las ROS se combinan fácilmente con los PUFAs y conducen a la producción de una peroxidación lipídica (LPO), causando una disminución de la motilidad, viabilidad y capacidad fecundante de los espermatozoides de gallo. En este sentido, esta investigación evaluó los efectos de la ME y LC suplementado al medio de congelación sobre la criosupervivencia y fertilidad de espermatozoides de gallos criollos (Gallus gallus domesticus).A produção de frango crioulo (Gallus gallus domesticus) no Equador é de importância transcendental na economia e nutrição das famílias rurais e urbanas. O frango crioulo tem sido considerado um valioso recurso genético na produção de quintal, constituindo um importante recurso econômico e um produto básico na dieta tradicional. Portanto, é necessário buscar alternativas biotecnológicas para maximizar o uso desse material genético indígena. A criopreservação de espermatozóides e a inseminação artificial (IA) de aves têm sido utilizadas com sucesso em galinhas de diferentes raças; no entanto, até onde sabemos, o uso dessas biotecnologias reprodutivas em aves crioulas no Equador é deficiente ou nulo. Os espermatozoides aviários tornam-se vulneráveis ​​aos radicais livres (por exemplo, H2O2, O2- e OH-) devido aos ácidos graxos poliinsaturados (PUFA) presentes na membrana plasmática. Consequentemente, ROS combinam-se facilmente com PUFAs e levam à produção de peroxidação lipídica (LPO), causando diminuição da motilidade, viabilidade e capacidade de fertilização do esperma de galo. Nesse sentido, esta pesquisa avaliou os efeitos de ME e LC suplementados ao meio de congelamento na criosobrevivência e fertilidade de espermatozoides de galos crioulos (Gallus gallus domesticus)

Effect of zeolite on return of ovarian activity, involution and uterine health in postpartum dairy grazing bred cows [Efecto de la zeolita sobre retorno de la actividad ovárica, involución y salud uterina en vacas lecheras postparto criadas en pastoreo]

The objective was to evaluate the effect of natural zeolite in dairy cows for 105 days which included the pre-partum (60 days) and post-partum (45 days) period, on the return of ovarian activity (ROA), uterine involution (UI), uterine health (UH), and body score condition (BSC). Fifty Holstein Friessian grazing cows were used, with ? 3.5 BSC at drying off, between 2 and 5 calving, clinically healthy, with similar sanitary and management conditions. The cows were randomly divided in two groups: control (CG; n1 = 25) fed basal diet; and experimental (EG: n2 = 25) with basal diet + zeolite (2%) of dry matter intake (DMI), equivalent to 180 and 270 g/cow/day, for dry and lactation period, respectively. The ROA was determined by transrectal ultrasonography at 15, 22, 35 and 45 days by the presence of follicles ? 10 mm diameter; UI by rectal palpation at 22 and 45 ppd evaluated by uterus position with respect to the pelvis (UP) and symmetry of the uterine horns (SUH); UH by cytobrush at 35 days; and BSC at 15 days pre-partum, at calving and 45 days post-partum, were evaluated. The zeolite effect was assessed by “U Mann Whitney and Kruscall Wallis” test. The results obtained of the ovarian and uterine variables and BSC were better (P < 0.001) for EG than CG; higher percentage of cows with ROA to 35 days for EG than CG, 52.0% of CG cows and 4% of EG did not return their post-partum ovarian activity; higher percentage of cows that involved her uterus at 45 days regarding UP and SUH; better UH at 35 days expressed by PMN (%); and better BSC at 15 bpd, birth and 45 ppd. Finally, a significant correlation (P < 0.001) between the BSC at 45 days with the percentage of cows that returned their post-partum ovarian activity, UH at 35 days and UI at 45 days. In conclusion, the addition of natural zeolite in the basal diet of grazing dairy cows, before and after calving, was effective in stimulating the return of ovarian activity, improving involution and uterine health, and body score condition, recommending its use in the dairy herds

Kinematic characterization of cryopreserved sperm from three biotypes of ecuadorian creole roosters

La crianza de gallinas criollas de traspatio constituye un importante recurso económico que contribuye a la seguridad alimentaria en el Ecuador (Tolombo, 2020). No obstante, los modos convencionales de cruzamiento supone una alta variabilidad genética (Wang et al., 2020). El manejo extensivo de las explotaciones avícolas tradicionales (en traspatio) ha facilitado una alta endogamia entre las poblaciones de gallinas, de modo tal que un mismo individuo presenta características comunes de varios biotipos (Villacís et al., 2016). En el Ecuador, se han identificado morfométricamente a tres principales biotipos (líneas) de gallos criollos: la barbona, cubana y guarica.Cuenc