LIQUID CHROMATOGRAPHY TANDEM MASS SPECTROMETRY DETERMINATION METHOD OF BENCYCLOQUIDIUM BROMIDE: APPLICATION TO DRUG INTERACTION STUDY IN HUMAN

Objective: This study was conducted to develop a sensitive and effective LC-MS/MS method for the determination of bencycloquidium bromide (BCQB) and its application in pharmacokinetic drug interaction study between BCQB and paroxetine. Methods: The chromatographic separation was performed on Hedera ODS-2 C18 column with a mobile phase consisted of acetonitrile-10 mmol/l ammonium acetate containing 0.2% acetic acid (33:67, v/v) at 550 μl/min, and the plasma samples were processed using solid-phase extraction. The MS/MS transitions were m/z 330.2 → 142.0 for BCQB and m/z 344.2 → 156.1 for the I. S in positive ESI mode. Results: The validated method was linear over the concentration range of 2-1200 pg/ml with the correlation coefficient r2>0.998. The intra-and inter-batch precisions of the assay were lower than 8.2% and 9.1%, respectively. The lower limit of quantification (LLOQ) was 2 pg/ml. The stability data at different storage conditions of BCQB were within±5% RE. The mean AUC0-36 of BCQB was increased by approximately 33%, after the administration of BCQB alone and upon co-administration with paroxetine during the drug interaction study. Conclusion: The LC-MS/MS method validated in this study was robust, reproducible, accurate, precise and reliable and was successfully applied in the pharmacokinetic drug interaction studies

IDENTIFICATION AND QUANTIFICATION OF PHOSPHODIESTERASE-5 INHIBITOR AS FALSIFIED IN ‘‘NATURAL’’ MALAYSIAN HERBAL APHRODISIACS SOLD IN SOME BENINESE MARKETS

Objective: Nowadays, there have been several reports of herbal products falsified with well-known synthetic molecules, leading to harmful health consequences for the consumer. The aim of this study was to assess the profile of ‘natural' herbal aphrodisiacs in the local markets of the municipalities of Cotonou and Abomey-Calavi in Benin and to screen some of them for the presence of additives such as sildenafil and tadalafil. Methods: A non-probability survey was conducted to identify the available aphrodisiacs and their characteristics. Some of them were then selected for analysis. Thin Layer Chromatography (TLC) was adopted for qualitative detection. The TLC positive extracts were then analyzed by HPLC on a C18 column with a mobile phase consisting of a mixture of 0.05M phosphate buffer (pH 5.8), acetonitrile and methanol (30:50:20). The Detection was performed at 290 nm. Results: Seventy-seven aphrodisiacs were identified and from these, 18 were selected for analysis. Six of them were adulterated with tadalafil. The concentration of tadalafil in the samples was 1.7 to 4.6 times higher than the recommended dose of 20 mg. Conclusion: This work opens the door to the need to control ‘‘natural’’ labeled products in order to ensure their quality

HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY QUANTIFICATION OF OLEANOLIC ACID IN LAUNAEA TARAXACIFOLIA AND LARVICIDAL ACTIVITY AGAINST ANOPHELES GAMBIAE

Objective: One of the measures used to prevent malaria is the management of breeding sites. For preventive and ecologically profitable control, the use of bio-larvicides made from active plant extracts would be an asset for the control of malaria vectors, in particular Anopheles gambiae. Advances in pharmacognosy have revealed the benefits of several phytochemicals with very rich and varied therapeutic effects. Among the latter, oleanolic acid (OA) is quite remarkable because of its various and multiple properties, much of which is demonstrated with the leaves of Launaea taraxacifolia. Methods: After a liquid-liquid fractionation with different organic solvents of the hydro-methanolic extract of Launaea taraxacifolia, we obtained three fractions named Fhex (hexane fraction), FDCM (dichloromethane fraction) and FHM (hydro-methanolic fraction) which were tested on 3rd instar Anopheles gambiae larvae. Results: Fhex proved to be the most active with LC50 of 120.11 ppm and 69.50 ppm respectively in 24 and 48 hours of contact. We then developed a new method of Ultra-Violet High Performance Liquid Chromatography (HPLC / UV) method and determined the quantity of oleanolic acid in the Fhex and FDCM fractions to be respectively 0.46% and 0.23% . Conclusion: Launaea taraxacifolia has a larvicidal potential due to the presence of oleanolic acid whose inhibitory effect against Anopheles gambiae larvae

Major decline in malaria morbidity and mortality in the Union of Comoros between 2010 and 2014: The effect of a combination of prevention and control measures

Background. Malaria remains a public health challenge in sub-Saharan Africa. In response to this, many countries are working towards achieving the World Health Assembly and Roll Back Malaria Partnership target of a 75% decline in malaria incidence.Objective. To assess trends in malaria morbidity and mortality in the three islands of the Comoros Archipelago from 2010 to 2014.Methods. This was a retrospective study in which all confirmed malaria cases and deaths recorded between 2010 and 2014 were accessed from the national malaria control database. Trends and comparisons in malaria incidence and case fatality rates for all age groups, including under-5 children and pregnant women, were analysed using Microsoft Excel and SPSS version 16.Results. A substantial decline in malaria incidence was observed for each island between 2010 and 2014; from 75.98 cases per 1 000 population in 2010 to 0.14 in 2014 in Moheli, 60.60 to 0.02 in Anjouan and 235.36 to 5.47 in Grand Comoro. Additionally, a general reduction in malaria case fatalities was observed. In Moheli, there were no case fatalities between 2010 and 2014, while there was a decline in the case fatality rate in Anjouan (from 1.20 fatalities per 1 000 cases to 0) and Grand Comoros (0.51 to 0). There were also significant differences (p<0.05) in malaria incidence and case fatalities between the three islands. A similar trend was observed for pregnant women and under-5 children.Conclusions. Our study indicates a significant decline in malaria morbidity and mortality in the islands of Moheli, Anjouan and Grand Comoro from 2010 to 2014. This considerable reduction is attributed to a combination of malaria prevention and control interventions implemented during the study period

C43 - Essai de formulation d’un collutoire à base d’huile essentielle de Cymbopogon giganteus, chiov (poaceae) pour traiter l’angine de gorge

Introduction : Sur la base d’études antérieures, ayant démontré une efficacité in vitro de l’huile essentielle de Cymbopogon giganteus sur les germes impliqués dans l’angine de gorge, l’objectif de cette étude était de développer une formulation adaptée pour la prise en charge de cette pathologie. Matériel et méthodes : L’huile d’olive vierge, le TWEEN 60 et le SPAN 60 ont été utilisés pour le développement du collutoire à 0,5% v/v d’huile essentielle de Cymbopogon giganteus. La caractérisation du collutoire a été effectuée au moyen de tests organoleptiques et microscopiques (Balla et al 2022). Le sens de l’émulsion est déterminé par la méthode des colorants et confirmé par le test de conductivité électrique. L’absence d’instabilité du collutoire vérifiée au moyen du test à la centrifugeuse. En prélude à des futurs essais cliniques, la stérilité du collutoire a été recherchée par ensemencement sur différents milieux gélosés. Résultats et Discussion : Après plusieurs essais, seule la préparation à 40% d’huile d’olive à l’aspect blanc laiteux et au toucher gras était stable avec une absence de floculation et de coalescence et sans observation de phénomènes d’instabilités à type de crémage ou de sédimentation. Les tests de conductivité (49,2 µS/cm) ont bien confirmé le sens de l’émulsion H/E. Les tests de stérilité ont été concluants en l’absence de prolifération de microorganisme après 5 jours d’incubation. Conclusion : Cette étude a permis la formulation d’un collutoire à base d’huile essentielle de Cymbopogon giganteus présentant un bon profil de stabilité et de qualité

C4 - Formulation d’un émulgel à base d’un mélange d’huile essentielle d’Ocimum gratissimum L. (Lamiaceae) et du gel d’Aloe vera (L.) Burm. F. (Asphodelaceae) contre les acnés vulgaires

Introduction : L’acné due à une production excessive de sébum associée ou non à une prolifération bactérienne est habituellement traitée avec des topiques. L’Aloe vera (AV) et l’Ocimum gratissimum (OG) sont deux plantes traditionnellement utilisées dans le traitement de l’acné. Ainsi, notre étude a consisté en des essais de formulation et d’évaluation de l’efficacité antibactérienne d’un émulgel combinant ces deux plantes. Méthodologie : Les essais ont été faits à partir du gel d’AV à la proportion de 10% et 20% respectivement associée à l’huile essentielle (HE) d’OG à 5% et 10% permettant d’élaborer un émulgel à base de l’HE gélifiée avec du carbomère 980 à 1%. La stabilité de nos formulations a été évaluée par des tests pharmaco-techniques que sont la détermination des caractères organoleptiques, l’examen microscopique, le test de stérilité et la mesure de quelques paramètres physico-chimiques (conductivité, pH, viscosité et aptitude à l’étalement) et l’activité antibactérienne a été déterminée sur les germes du genre Staphylococcus. Résultats : La formule à 10% d’AV et 5% d’OG a été retenue au regard de sa plus grande stabilité. Au plan organoleptique, elle présentait un aspect homogène, une uniformité de couleur, une bonne consistance et une odeur caractéristique de l’OG. Sa conductivité évaluée à 1935µS/cm a confirmé le sens de l’émulsion Huile/Eau. Quant à la viscosité, elle était de 344400 mPa.s suggérant une bonne aptitude de l’émulgel à l’étalement. Enfin le pH (7,38) indiquait une bonne compatibilité avec celui de la peau, confirmée par les tests d’irritabilité sur le lapin albinos (Indice d’irritabilité IIP ˂ 0.5). L’activité antibactérienne sur les germes du genre Staphylococcus méticillino-résistante a montré une bonne sensibilité à cette formulation avec des zones d’inhibition ayant des diamètres > 8mm. Conclusion : Les résultats, concluant sur la stabilité et l’efficacité in vitro de l’émulgel à 5% d’HE d’OG, ouvrent la voie à la réalisation d’une étude clinique avant mise sur le marché

Evaluation of National Quality Control Capacity for Herbal Medicines in West Africa: the Case of Benin and Burkina Faso

OBJECTIVE: To assess the capacity of quality control of herbal medicines in two countries in West Africa, thus, Benin and Burkina Faso. METHODS: This is a cross-sectional descriptive study, through surveys of 33 manufacturing facilities and 5 independent quality control laboratories listed in the two countries. RESULTS: Among the 33 production units surveyed, only six had space or premises dedicated to quality control. Furthermore, 29 out of the 33 manufacturers used geographic, organoleptic and macroscopic criteria to verify the quality of the raw materials when buying or harvesting. For finished products, they checked the organoleptic characteristics themselves. For more complex analysis, such as the search for microbial contaminants or pesticide residues, they most often used public laboratories at the national level, which are better equipped with skilled staff. CONCLUSION: These results show that a lot of effort needs to be done in this area by these two countries in order to better ensure the quality and safety of locally produced herbal medicines.[Évaluation des capacités nationales de contrôle de la qualité des médicaments à base de plantes en Afrique de l’Ouest : cas du Benin et du Burkina Faso.] OBJECTIF : Evaluer les capacités nationales de contrôle qualité des médicaments à base plantes médicinales au Bénin et au Burkina Faso. MATÉRIELS ET MÉTHODE : étude transversale descriptive, par enquête auprès des 33 établissements de fabrication et des 5 laboratoires indépendants de contrôle de qualité répertoriés dans les deux pays. RÉSULTATS : Sur les 33 établissements de production enquêtés, seulement six disposaient d’espace ou de local dédié au contrôle de qualité. Par ailleurs, 29 des 33 fabricants utilisaient des critères de localisation géographique, organoleptiques et macroscopiques pour vérifier la qualité des matières premières lors de l’achat ou de la récolte. Pour les produits finis, ils vérifiaient eux-mêmes les caractères organoleptiques. En revanche, en ce qui concerne les analyses plus complexes comme la recherche de contaminants microbiens et des résidus de pesticides, ils faisaient le plus souvent recours à des laboratoires publics au niveau national, qui disposaient de matériels, d’équipements et de compétences plus conséquents. CONCLUSION : Ces résultats montrent que beaucoup d’efforts restent à faire par les Etats africains pour mieux assurer la qualité des médicaments à base de plantes produits localement dont la majorité de la population a toujours recours

Anti-inflammatory and antipyretic properties of Kang 601 heji, a traditional Chinese oral liquid dosage form

Objective: To evaluate the scientific basis for the use of Kang 601 heji (K-601) as an anti-inflammatory and antipyretic agent using appropriate animal models. Methods: Carrageenan-induced rat paw and xylene-induced ear oedemas were models used to investigate anti-inflammatory actions of K-601. Lipopolysaccharide-induced pyrexia model was used to evaluate antipyretic activity in Wistar rats. The anti-inflammatory and antipyretic mechanisms were evaluated by detecting prostaglandins E2, nitric oxide, interleukin-1β and tumour necrosis factor-α levels using appropriate reagents and ELISA kits. Results: The results revealed that K-601 reduced the level of inflammations in both anti-inflammatory models in a dose-dependent manner. The same was true for the antipyretic model. The possible mechanisms of actions were through the inhibition of prostaglandins E2, interleukin-1β, tumour necrosis factor-α and nitric oxide. Conclusions: K-601 has proven anti-inflammatory and antipyretic actions. The findings provide a scientific basis for the use of K-601 as anti-inflammatory and antipyretic agent in traditional Chinese medicinal practice

P30 Etude clinique d’un collutoire à base d’huile essentielle de Cymbopogon giganteus, chiov (poaceae) chez les adultes souffrant de l’angine de gorge au CHU de SURU-LERE de Cotonou

Introduction : L’angine de gorge est une inflammation de la gorge et en particulier des amygdales, d’origine infectieuse, induisant souvent un recours inapproprié aux antibiotiques. La prise de phyto médicaments peut être envisagée afin de contourner le risque d’antibiorésistance. D’où l’intérêt de cette étude à évaluer l’efficacité antimicrobienne d’un collutoire à base de C. giganteus en clinique.   Matériel et méthodes : L’étude clinique phase 2 à un bras, réalisée a porté sur des patients adultes (18 ans à 65 ans) dont le diagnostic positif a été posé par un médecin et qui ont été traités en ambulatoire durant 07 jours à raison de deux pulvérisations dans la gorge chaque 4h en association avec 1g de paracétamol pris matin, midi et soir pendant 48 h puis si douleur. L’efficacité thérapeutique a été évaluée à l’aide des principaux signes cliniques spécifiques relevés à J0, J3 et J7 à travers un même score préétabli. Résultats et Discussion : Sur 36 patients inclus, 34 efficacités thérapeutiques ont été observées contre 02 échecs. Aucun évènement indésirable majeur signalé, excepté une hypersalivation et une sécheresse de la gorge chez 4 patients, rapidement résorbés par la prise d’eau. Conclusion : Les données recueillies au cours de l’étude suggèrent que le collutoire à base C. giganteus associés au paracétamol soulage l’angine de gorge et les symptômes associés et s’avère un candidat intéressant pour une demande de mise sur le marché

P35 Comparaison de l’interaction moléculaire entre le Taxol@ et les nanoparticules à base de poly (alkyl méthylidène malonate) PMM 2.1.2 et à base de poly (alkylcynoacrylate)(PACA

L’administration et le ciblage contrôlés de médicaments représentent un défi passionnant pour améliorer l’efficacité thérapeutique et/ou prophylactique des molécules biologiquement actives tout en réduisant leurs effets secondaires. Ainsi, différents systèmes tels que les supports macromoléculaires solubles, les liposomes et les particules polymériques ont été intensivement décrits et testés cliniquement. Pour cette étude, le taxol@ (TX, paclitaxel) a été choisi comme médicament hôte modèle pour comparer son encapsulation dans des nanoparticules à base de poly- alkylcynamoacrylates (PACA) et de poly-alkylmethylidenemalonate (PAMM en particulier le PMM 2.1.2).   Une trajectoire de dynamique moléculaire pour chaque espèce a été générée à 300 K et étendue sur 1000 ps par pas de 1 fs. Les conformères échantillonnés toutes les 10 ps ont ensuite été minimisés en énergie en utilisant d'abord la méthode MM2 d'Allinger et la méthode Newton-Raphson bloc-diagonal jusqu'à ce que le gradient obtenu soit inférieur à 0,01 kcal/mol. Nous avons aussi utilisé les méthodes AMI et PM3, COSMO ainsi que les calculs théoriques et enfin les méthodes semi-empiriques SCF-MO AMI et PM3, telles qu'elles sont mises en œuvre dans l'ensemble CS MOPAC trouvé dans CS Chem3DPro 7.0.0. Nous avons adopté une approche tout à fait différente par rapport à celle précédemment combinant la dynamique moléculaire et la mécanique semi-quantique (AMI, PM3 et PM3 COSMO). Les oligomères de PAMM ont tendance à adopter une forme en U, contrairement à ceux de PACA qui adoptent préférentiellement des conformations hélicoïdales avec une disposition radiale des chaînes latérales. Ce résultat a été confirmé par plusieurs publications qui rapportent que, pendant la polymérisation anionique du monomère MM 2.1.2, un processus important de cyclotrimérisation a lieu, produisant un mélange de 4 diastéréo-isomères racémiques de cyclohexanone, c'est-à-dire 2S,4R,6R et 2S,4S,6S, et leurs contreparties énantiomériques. Ces études donnent un aperçu de l'architecture et de la dynamique des nanoparticules. L'approche in silico utilisée ici permet de prédire que le Taxol serait piégé plus efficacement dans le PAAM que dans le PACA, ce qui est en accord avec les résultats expérimentaux