ldentification of virus diseases of grapevine and production of disease-free plants

Der Nachweis von Rebvirosen und die Erzeugung virusfreien PflanzgutesIn dem vorliegenden Übersichtsbericht werden symptomatologische Probleme, der Virusnachweis mit Hilfe von krautigen Testpflanzen und Indikatorreben, serologische Nachweismethoden sowie die Möglichkeiten elektronenmikroskopischer Verfahren behandelt. Abschließend werden die bislang praktizierten Programme für die Erzeugung virusfreien Vermehrungsmaterials diskutiert

Virus diseases of the grapevine in a Sicilian herbarium of the past century

Dried grapevine specimens, collected in Sicily between 1880 and 1886, and showing different morphological and chromatic modifications, were found in a herbarium established in 1830 by Dr. FRANCESCO MINA PALUMBO, a physician of Castelbuono (Palermo). On the basis of symptoms still visible on the specimens and of the herbarium's original explanatory notes, the diseased material was identified as being affected by fanleaf, yellow mosaic and leafroll.Rebvirosen in einem sizilianischen Herbarium aus dem letzten JahrhundertGetrocknete Exemplare von Reben, die zwischen 1880 und 1886 in Sizilien für ein von Dr. FRANCESCO MINA PALUMBO, einem Arzt aus Castelbuono (Palermo), begründetes Herbarium gesammelt worden waren, zeigten verschiedene morphologische und farbliche Modifikationen. Die noch sichtbaren Symptome an den Herbarexemplaren erlauben zusammen mit den erläuternden Originalnotizen eine Diagnose auf Befall durch Reisigkrankheit, Gelbmosaik und Blattrollkrankheit

The viroses and virus-like diseases of the grapevine

A bibliographic report, 1979-198

Considerations on grapevine selection and certification

Different viruses and virus-like diseases can be detrimental to grapevines and their products. The protocols of the assays used to evaluate the impact of viruses have evolved with the progress of the knowledge in aetiology and diagnosis. A wrong interpretation of the data from experiments that compare the performance of virus-infected and non-infected vines may lead to erroneous conclusions. Even if some experiments show that virus infections induce an increase of sugar content, a better evaluation of the experimental data may show that the conclusion drawn is incorrect. The role viruses may play in clonal variability is also discussed

Non-radioactive molecular probes for the detection of three filamentous viruses of the grapevine

Digoxigenin-labelled riboprobes (DIG-RNA) were developed for the detection in infected tissue extracts of grapevine trichovirus A (GVA), grapevine trichovirus B (GVB) and grapevine leafroll-associated closterovirus III (GLRaV III). The probes were virus-specific and could be used for the identification of the respective viruses in sap expressed from infected Nicotiana species (GVA and GVB) and in total nucleic acid extracts from infected grapevines (GVA, GVB and GLRaV III). The efficiency of detection was the same as (GLRaV III), or slightly less than (GVA), with ELISA. No difference was found in detection efficiency between DIG-RNA and cDNA radioactive probes

Further studies on the use of molecular probes to grapevine closterovirus A

Two cloned cDNA probes to genomic RNA of grapevine closterovirus A (GVA) were utilized successfully for the detection of viral sequences in infected herbaceous hosts (Nicotiana benthamiana) and grapevines. One of the probes (pGA112) was complementary to the central part of the viral genome and gave light false positive signals with healthy grapevine extracts, whereas the other (pGA240), which is presumably colinear with the 3' terminus, was virus-specific and hybridized only with infected sample extracts. The two probes recognized smaller than genome RNAs in electrophoresed N. benthamiana extracts and hybridized differentially with the bands, thus suggesting that these represent subgenomic RNAs. Probe pGA240 may be used for GVA detection, but the preparation of samples for hybridization needs further improvement for routine testing.Weitere Untersuchungen über die Verwendung von Molekülsonden beim Grapevine-Closterovirus AZwei klonierte cDNA-Sonden für genomische RNA des Grapevine-Closterovirus A (GVA} wurden mit Erfolg zum Nachweis von Virussequenzen in infizierten krautigen Wirtspflanzen (Nicotiana benthamiana) und Reben benützt. Die eine Sonde (pGA112} war komplementär zum zentralen Teil des Virusgenoms und lieferte schwache falsch-positive Nachweisreaktionen mit Extrakten aus gesunden Reben; die andere Sonde (pGA240}, die vermutlich kolinear mit dem 3'-Terminus ist, war dagegen virusspezifisch und hybridisierte nur mit Extrakten aus infizierten Proben. In elektrophoretisch aufgetrennten N. benthamiana-Extrakten "erkannten" die beiden Sonden RNAs von weniger als Genomgröße; sie hybridisierten differenziert mit den Banden, so daß diese subgenomische RNAs darstellen könnten. Die Sonde pGA240 kann für den GVA-Nachweis verwendet werden; für Routinetests muß die Vorbereitung der Proben für die Hybridisierung noch verbessert werden

Detection of grapevine closterovirus A in infected grapevine tissue by reverse transcription-polymerase chain reaction

Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was successfully applied to detection of GVA RNA in nucleic acid extracts of infected grapevines. In particular, an artificially synthesized DNA primer set designed to amplify a GVA cDNA fragment of 430 base pairs, specifically detected GVA RNA sequences in extracts from infected grapevine tissues such as leaves from in vitro-grown explants, leaves from greenhouse-grown rooted cuttings, and bark scrapings of mature canes from field-grown vines. The detection limit of GVA RNA by RT-PCR was estimated to be 200 fold higher than that obtained by molecular hybridization or ELISA

Viroids of grapevines in Italy

Rebviroide in ItalienEs wird über das Vorkommen niedermolekularer RNAs bei 48 Vitis-vinifera-Stämmen und 15 amerikanischen Vitis-Arten und Kreuzungen aus Italien, Osteuropa, Mittelmeer- und Nahost-Ländern berichtet. In den Sämlingen zweier Sorten wurden keine derartigen RNAs gefunden. Aufgrund ihres elektrophoretischen Verhaltens wurden diese RNAs vorläufig identifiziert als Grapevine yellow speckle-Viroid (GYSVd), Grapeivine-Viroid 2 (GVd2) und Hop stunt-Viroid (HSVd). Das letztere Viroid löste bei künstlich infizierten Pflanzen von Tomate cv. Rutgers und Gurke cv. Suyo Befallssymptome aus. HSVd, GYSVd und GVd2 wurden in 97, 92 bzw. 11 % der untersuchten Proben wiedergefunden. In der Regel lagen Mischinfektionen vor, wobei die Kombination von HSVd mit GYSVd überwog. Diese beiden Viroide kamen regelmäßig in Reben mit den Symptomen von Yellow speckle oder Vein banding vor. Es wurde keine eindeutige Beziehung zwischen dem Vorkommen eines der Viroide und Rebkrankheiten mit unklarer Ätiologie, wie Vein necrosis oder Fleck, gefunden

Virus-like particles and ultrastructural modifications in the phloem of leafroll-affected grapevines

Ultrastructural studies were carried out on thin-sectioned phloem and mesophyll tissues of 42 grapevine accessions with leafroll symptoms, coming from 12 different countries (Italy, Portugal, Spain, France, Yugoslavia, Hungary, Soviet Union, Bulgaria, Greece, Cyprus, Malta and Nigeria). A total of 47 specimens were observed with the electron microscope. About half (48 %) the samples examined contained isometric virus-like particles in one or more phloem elements (sieve tubes, companion and parenchyma cells), whereas only 15 % of the samples contained filamentous virus-like particles in the same type of cells. None of these viruses could be transmitted by sap inoculation. Ultrastructural features of major importance were double-membraned vesiculated bodies possibly representing profoundly modified cell organelles (mitochondria and/or plastids) and bundles of tubular structures 40-45 nm or 60-100 nm in diameter, the !arger of which exhibited a central core seemingly made up of one or more filaments of tubular P-protein. The present results are discussed in the light of the findings reported in the literature on leafroll-infected grapevine tissues.Virusartige Partikeln und Veränderungen der Ultrastruktur im Phloem blattrollkranker RebenBei 42 Rebenstämmen mit Blattrollsymptomen wurde die Ultrastruktur des Blattphloems und Mesophylls untersucht. Die Reben stammten aus 12 verschiedenen Ländern (Italien, Portugal, Spanien, Frankreich, Jugoslawien, Ungarn, Sowjetunion, Bulgarien, Griechenland, Cypern, Malta und Nigeria). Insgesamt wurden 47 Exemplare elektronenmikroskopisch untersucht. Etwa die Hälfte der Proben (48 %) enthielt isometrische virusartige Partikeln in einem oder mehreren Phloemelementen (Siebröhren, Geleit- und Parenchymzellen); bei 15 % der Proben waren in denselben Zelltypen filamentöse virusartige Partikeln enthalten. Eine Saftübertragung der Viren war in keinem Falle möglich. Wichtige ultrastrukturelle Bildungen waren doppelwandige vesiculäre Körper, die möglicherweise stark abgewandelte Zellorganellen (Mitochondrien und/oder Plastiden) darstellen, sowie Bündel tubulärer Strukturen vom Durchmesser 40-45 nm oder 60-100 nm; die größeren Tubuli zeigten einen zentralen Kern, der anscheinend von einem oder mehreren Filamenten tubulären P-Proteins gebildet wurde. Die vorliegenden Ergebnisse werden im Zusammenhang mit den Literaturbefunden über blattrollinfiziertes Rebengewebe diskutiert

The effects of Sepiolite-SPLF on heavy pigs fed liquid diets

The effects of the addition of Sepiolite for Pig Liquid Feeding (SPLF) at 1% on growing performance and carcass quality of heavy pigs fed practical diets were evaluated by using 330 Duroc x (Landrace x Large White) pigs, half castrated males and half females, from 63.5 to 170 kg body weight