Agent based modelling helps in understanding the rules by which fibroblasts support keratinocyte colony formation

Background: Autologous keratincoytes are routinely expanded using irradiated mouse fibroblasts and bovine serum for clinical use. With growing concerns about the safety of these xenobiotic materials, it is desirable to culture keratinocytes in media without animal derived products. An improved understanding of epithelial/mesenchymal interactions could assist in this. Methodology/Principal Findings: A keratincyte/fibroblast o-culture model was developed by extending an agent-based keratinocyte colony formation model to include the response of keratinocytes to both fibroblasts and serum. The model was validated by comparison of the in virtuo and in vitro multicellular behaviour of keratinocytes and fibroblasts in single and co-culture in Greens medium. To test the robustness of the model, several properties of the fibroblasts were changed to investigate their influence on the multicellular morphogenesis of keratinocyes and fibroblasts. The model was then used to generate hypotheses to explore the interactions of both proliferative and growth arrested fibroblasts with keratinocytes. The key predictions arising from the model which were confirmed by in vitro experiments were that 1) the ratio of fibroblasts to keratinocytes would critically influence keratinocyte colony expansion, 2) this ratio needed to be optimum at the beginning of the co-culture, 3) proliferative fibroblasts would be more effective than irradiated cells in expanding keratinocytes and 4) in the presence of an adequate number of fibroblasts, keratinocyte expansion would be independent of serum. Conclusions: A closely associated computational and biological approach is a powerful tool for understanding complex biological systems such as the interactions between keratinocytes and fibroblasts. The key outcome of this study is the finding that the early addition of a critical ratio of proliferative fibroblasts can give rapid keratinocyte expansion without the use of irradiated mouse fibroblasts and bovine serum

Establishment of a murine epidermal cell line suitable for in vitro and in vivo skin modelling

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Skin diseases are a major health problem. Some of the most severe conditions involve genetic disorders, including cancer. Several of these human diseases have been modelled in genetically modified mice, thus becoming a highly valuable preclinical tool for the treatment of these pathologies. However, development of three-dimensional models of skin using keratinocytes from normal and/or genetically modified mice has been hindered by the difficulty to subculture murine epidermal keratinocytes.</p> <p>Methods</p> <p>We have generated a murine epidermal cell line by serially passaging keratinocytes isolated from the back skin of adult mice. We have termed this cell line COCA. Cell culture is done in fully defined media and does not require feeder cells or any other coating methods.</p> <p>Results</p> <p>COCA retained its capacity to differentiate and stratify in response to increased calcium concentration in the cell culture medium for more than 75 passages. These cells, including late passage, can form epidermis-like structures in three-dimensional <it>in vitro </it>models with a well-preserved pattern of proliferation and differentiation. Furthermore, these cells form epidermis in grafting assays <it>in vivo</it>, and do not develop tumorigenic ability.</p> <p>Conclusions</p> <p>We propose that COCA constitutes a good experimental system for <it>in vitro </it>and <it>in vivo </it>skin modelling. Also, cell lines from genetically modified mice of interest in skin biology could be established using the method we have developed. COCA keratinocytes would be a suitable control, within a similar background, when studying the biological implications of these alterations.</p

Il sito archeologico di Ostia Antica: tecniche costruttive, materiali, restauri

La ricerca ha come oggetto l’analisi di alcuni edifici dell’area archeologica di Ostia Antica attraverso la lettura tipologica e l’approfondimento delle tecniche costruttive. Analizzando le apparecchiature murarie e, in particolare, l’opera a concrezione viene messa in evidenza la sequenza, molto articolata, delle diverse fasi edilizie, essendosi la città formata nella seconda metà del IV sec. a. C., sviluppatasi alla fine dell’epoca repubblicana e, seppure con fasi alterne, durante tutto il periodo imperiale, e quindi abbandonata nel corso del IV e V secolo. In particolare, vengono analizzate alcune strutture ritenute particolarmente eloquenti: il Mitreo delle Terme, il Molino del Silvano, le Terme del Foro e la cosiddetta ‘Basilica cristiana’, a dimostrazione di come l’opus caementicium, vero ‘protagonista’ del rinnovamento tecnologico del mondo romano, abbia sostanzialmente modificato, a partire dal III-II sec. a. C., l’organizzazione strutturale dell’opera muraria e, di conseguenza, la stessa immagine di architettura enucleata dalla tradizione greca

Il sistema del verde nel litorale romano tra storia e interventi di tutela. Recupero e riconnessione delle risorse ambientali attraverso parchi archeologici e naturalistici

Il territorio del litorale romano mostra ancora oggi i segni della sua lunga evoluzione nel tempo; si tratta di un ambito di grande interesse ma dopo gli interventi di bonifica della fine del XIX secolo e la successiva intensa antropizzazione, parte dei segni morfologici e antropici di questa lunga Storia sono andati perduti. Al riguardo si comprende quanto siano più che mai necessarie operazioni di riordino di tutto il settore ripensando complessivamente il sistema delle relazioni, cosicché, attraverso il consolidamento di funzioni compatibili, si riesca a perseguire la riqualificazione paesaggistica dell’area attraverso un’attività correlata a ipotesi di “pianificazione” del territorio e studi di “fattibilità” diretti a definire nuovamente le peculiarità e le dinamiche di trasformazioni dei luoghi. È certo essenziale partire da una specie di ‘Piano Quadro’ attraverso il quale sia possibile definire studi e progetti di dettaglio relativi a singoli temi e singole zone; ciò che significa ribadire nuovamente come la pluralità di interessi implicita in ogni operazione che si collochi entro realtà, di certo articolate e complesse, non può essere risolta se non attraverso differenziati strumenti, di volta in volta adeguati alla situazione specifica