Klonierung und Charakterisierung von Genen der Hopanoid-Biosynthese in Zymomonas mobilis\textit{Zymomonas mobilis}

Das Gram-negative, obligat fermentative Bakterium $\textit{Zymomonas mobilis}$ weist mit 30 mg/g Trockengewicht den höchsten bisher ermittelten Hopanoidgehalt auf. Die Hopanoide, pentacyclische Triterpenoide (Isoprenoide), sind als Membrankomponenten wesentlich an der hohen Ethanoltoleranz von $\textit{Z. mobilis}$ beteiligt. Über die Genetik der Isoprenoid- und Hopanoid-Biosynthese in Prokaryonten sind bisher nur wenige Daten verfügbar. Ziel dieserdf Arbeit war es, durch die Klonierung und Charakterisierung von Genen der Hopanoid-Biosynthese aus $\textit{Z. mobilis}$ zur Aufklärung dieses Biosyntheseweges beizutragen. Mit Hilfe einer heterologen Gensonde aus Alicyclobacillus acidocaldarius konnte das Gen der Squalen-Hopen-Cyclase, eines Schlüsselenzyms der Hopanoid-Biosynthese, aus $\textit{Zymomonas mobilis}$ kloniert werden. Das Gen (shs) codiert ein Polypeptid mit 658 Aminosäuren und einem abgeleiteten Molekulargewicht von 74,1 kDa. Die Aminosäuresequenz weist signifikante Übereinstimmungen mit der Squalen-Cyclasen zeigen eine deutliche Ähnlichkeit mit der carboxyterminalen Region der bisher einzigen klonierten und sequenzierten, eukaryontischen Squalenoxid-Cyclase aus $\textit{Candida albicans}$. Allen drei Enzymen ist das mehrfache Auftreten des [...