Caractérisation du facteur assistant de la transmission du virus de la mosaïque du chou-fleur (CaMV) (aspects structuraux et fonctionnels )

MONTPELLIER-BU Sciences (341722106) / SudocSudocFranceF

Étude expérimentale de l'évolution du mode de transmission du Cauliflower mosaic virus

PARIS-BIUSJ-Thèses (751052125) / SudocPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF

Faisabilité d'un test de biodiagnostic environnemental basé sur l'utilisation d'un biomarqueur moléculaire de toxicité chez le protozoaire cilié Tetrahymena pyriformis

La détection de substances polluantes toxiques constitue un enjeu majeur pour atteindre un bon état chimique et écologique des eaux. Notre projet vise à exploiter la sensibilité d'un modèle cellulaire pour détecter de manière précoce et fiable la présence de concentrations cytotoxiques de polluants. La faisabilité d'un test de biodiagnostic environnemental, basé sur l'utilisation du gène codant la Métallothionéine en tant que biomarqueur moléculaire de toxicité a été envisagée chez le protozoaire cilié Tetrahymena pyriformis. L'expression du gène MT a été analysée par RT-PCR pour vérifier la pertinence de ce gène en tant que biomarqueur moléculaire de toxicité. Quatre polluants reconnus dangereux ont été testés: le cadmium, le mercure, le nonyl- et l'octylphénol. Parmi les technologies transposables sur le terrain, les organismes transformés constituent des outils performants afin de détecter de faibles concentrations de substances cytotoxiques dans l'eau. Nous avons cherché à mettre au point des cellules T. pyriformis transformées par une construction constitutive ou par une construction inductible par les polluants. La région du gène histone H4I a été clonée, et celle du gène MT devra être clonée pour développer un modèle cellulaire transgénique capable de renseigner sur la présence de concentrations cytotoxiques de polluants dans l'eau.The detection of toxic chemicals constitutes a major stake to reach a good chemical and ecological state of environmental water. Our project aims to exploit the sensitivity of a cellular model to detect in an early and reliable way the presence of cytotoxic concentrations of pollutants. The feasibility of an environmental test, based on the induction of the Metallothionein gene as a molecular toxicity biomarker, was investigated in the ciliate protozoan Tetrahymena pyriformis. The expression of the MT gene was analysed by RT-PCR to check the relevance of this gene as a molecular biomarker of toxicity. Four dangerous pollutants were tested: cadmium, mercury, the nonyl- and the octyl-phenol. Among technologies transposable in the field, genetically transformed organisms constitute powerfull tools to detect weak concentrations of chemicals in the water. We aim to develop T. pyriformis cells transformed with a constitutive or pollutants-inducible construction. The region of the histone H4I gene was cloned, and the region of the MT gene has to be cloned to develop transgenic cells able to inform about weak concentrations of pollutants in the environmental water.ST ETIENNE-ENS des Mines (422182304) / SudocSudocFranceF

Rôle du polydnavirus Hyposoter didymator Ichnovirus dans l'interaction entre l'ichneumonide Hyposoter didymator et l'hôte lépidoptère Spodoptera frugiperda

Les polydnavirus sont des virus associés à des hyménoptères parasitoïdes Ichneumonoïdes caractérisés par un génome ADN segmenté. Les polydnavirus sont injectés lors de la ponte dans l hôte lépidoptère. Ils induisent une inhibition de la réponse immunitaire de l hôte et modifient son développement, et sont indispensables au succès du parasitisme. La recherche des gènes effecteurs des polydnavirus ainsi que l étude de leurs effets sur le lépidoptère sont en cours dans de nombreux laboratoires. Dans l introduction de mon travail, je présente l état actuel des connaissances acquises sur les polydnavirus. Il en ressort que la fonction de nombreux gènes viraux, ainsi que leurs effets sur l hôte, est encore inconnue. Afin d apporter des éléments de réponse à ces questions, nous avons étudié dans le cadre du modèle de l Ichnovirus HdIV associé à l ichneumonide Hyposoter didymator, la transcription de 9 gènes de la famille multigénique des repeated element , famille de gènes conservée chez les ichnovirus. Nous montrons que seuls certains gènes de HdIV sont transcrits dans l hôte Spodoptera frugiperda infecté et que les tissus ciblés sont majoritairement le corps gras et l épithélium cuticulaire. La transcription d un des gènes, rep1, est également détectée dans les femelles de H. didymator. Dans une seconde partie, nous nous sommes intéressés à l effet de l infection de HdIV sur le transcriptome du lépidoptère de S. frugiperda. Cette étude montre que la transcription de plusieurs gènes de l hôte, notamment des gènes potentiellement liés à l immunité, sont affectés par le virusPolydnaviruses are viruses associated with Ichneumonoid wasps characterized by poly segmented circular DNA molecules. Polydnaviruses penetrate into lepidopteran hosts through the parasitoid wasp oviposition. They induce an inhibition of the host s immune system along with alteration of its development, and are necessary for successful parasitism. Polydnaviruses effector genes and their effects on lepidopteran physiology are studied in many laboratories. In the introduction of my work, I review the current knowledge acquired on polydnaviruses. It shows that the function of numerous polydnavirus genes as well as their effects on the lepidopteran host are still poorly known. To help respond those interrogations we focused on the Ichnovirus associated with Hyposoter didymator wasps. In the first part of this work, we studied the transcriptional pattern of 9 genes that belong to a multigenic family found in all ichnoviruses studied so far, the repeated element gene family. Our results indicate that only some genes are transcribed in infected Spodoptera frugiperda larvae, and that transcription occurs primarily in fat body and cuticular epithelium tissues. One of those, the rep1 gene, is also transcribed in Hyposoter didymator female wasp. In the second part of this work, we present the effects of HdIV infection on the S. frugiperda transcriptome, based on a micro-array analysis. Our results indicate that numerous genes are transcriptionally affected by HdIV infection, notably genes putatively linked to immunityMONTPELLIER-BU Sciences (341722106) / SudocSudocFranceF

Dissociation of the CD4 and CXCR4 Binding Properties of Human Immunodeficiency Virus Type 1 gp120 by Deletion of the First Putative Alpha-Helical Conserved Structure

To evaluate conserved structures of the surface gp120 subunit (SU) of the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) envelope in gp120-cell interactions, we designed and produced an HIV-1 IIIB (HXB2R) gp120 carrying a deletion of amino acids E61 to S85. This sequence corresponds to a highly conserved predicted amphipathic alpha-helical structure located in the gp120 C1 region. The resultant soluble mutant with a deleted alpha helix 1 (gp120 ΔαHX1) exhibited a strong interaction with CXCR4, although CD4 binding was undetectable. The former interaction was specific since it inhibited the binding of the anti-CXCR4 monoclonal antibody (12G5), as well as SDF1α, the natural ligand of CXCR4. Additionally, the mutant gp120 was able to bind to CXCR4(+)/CD4(−) cells but not to CXCR4(−)/CD4(−) cells. Although efficiently expressed on cell surface, HIV envelope harboring the deleted gp120 ΔαHX1 associated with wild-type transmembrane gp41 was unable to induce cell-to-cell fusion with HeLa CD4(+) cells. Nevertheless, the soluble gp120 ΔαHX1 efficiently inhibited a single round of HIV-1 LAI infection in HeLa P4 cells, with a 50% inhibitory concentration of 100 nM. Our data demonstrate that interaction with the CXCR4 coreceptor was maintained in a SUgp120 HIV envelope lacking αHX1. Moreover, in the absence of CD4 binding, the interaction of gp120 ΔαHX1 with CXCR4 was sufficient to inhibit HIV-1 infection

Normal sonoanatomy of small joints in healthy children: changes in cartilage and vascularisation according to age and gender.

International audienceThe metacarpophalangeal (MCP) and metatarsophalangeal (MTP) joints may be involved in juvenile idiopathic arthritis. Our goal was to describe their normal sonoanatomy in healthy children, according to age and gender

Normal sonoanatomy of small joints in healthy children: changes in cartilage and vascularisation according to age and gender.

International audienceThe metacarpophalangeal (MCP) and metatarsophalangeal (MTP) joints may be involved in juvenile idiopathic arthritis. Our goal was to describe their normal sonoanatomy in healthy children, according to age and gender