Platelet-activating factor acetylhydrolase and haemophagocytosis in the sepsis syndrome.

Sepsis syndrome (SS) is associated with depressed PAF acetylhydrolase, the enzyme responsible for the degradation of platelet activating factor. PAF acetylhydrolase is in a large part produced by macrophages, whose inadequate activation with haemophagocytosis is frequent in patients with SS. The aim of this study was to test the hypothesis that PAF acetylhydrolase levels could be affected in these critically ill patients, because of the large amounts produced by activated macrophages in vitro and in vivo in animal models. The levels of serum PAF acetylhydrolase were assessed in 90 SS patients, who were divided into three groups: patients with (n = 34) or without haemophagocytosis (n = 31), and patients without thrombocytopenia (n = 25) who were used as a control group. The number of organ dysfunctions was matched between patients with haemophagocytosis and controls. Normal reference values were obtained in 59 randomly selected blood donors. Circulating levels of PAF acetylhydrolase were significantly (p = 0.0001) decreased in patients with SS (57+/-3 nmol/ml/min, n = 90) when compared with healthy subjects (69+/-3 nmol/ml/min, n = 59). PAF acetylhydrolase levels were greater in the presence of a haemophagocytosis but without statistical significance (64.2+/-6.5 vs. 50.1+/-2.8:p = 0.25). Despite the fact that macrophagic activation stimulates the in vitro release of PAF acetylhydrolase, no difference was found between patients with or without haemophagocytosis. The mechanism and the role of the PAF acetylhydrolase reduction in SS patients remain to be determined

Analysis of Several PLA2 mRNA in Human Meningiomas

In view of the important oncogenic action of phospholipase A2(PLA2) we investigated PLA2 transcripts in human meningiomas. Real-time PCR was used to investigate PLA2 transcripts in 26 human meningioma tumors. Results indicated that three Ca2+-dependent high molecular weight PLA2 (PLA2-IVA, PLA2-IVB, PLA2-IVC), one Ca2+-independent high molecular weight PLA2 (PLA2-VI) and five low molecular weight secreted forms of PLA2 (PLA2-IB, PLA2-IIA, PLA2-III, PLA2-V, and PLA2-XII) are expressed with PLA2-IVA, PLA2-IVB, PLA2-VI, and PLA2-XIIA as the major expressed forms. PLA2-IIE, PLA2-IIF, PLA2-IVD, and PLA2-XIIB are not detected. Plasma (PLA2-VIIA) and intracellular (PLA2-VIIB) platelet-activating factor acetylhydrolase transcripts are expressed in human meningiomas. However no difference was found for PLA2 transcript amounts in relation to the tumor grade, the subtype of meningiomas, the presence of inflammatory infiltrated cells, of an associated edema, mitosis, brain invasion, vascularisation or necrosis. In conclusion numerous genes encoding multiples forms of PLA2 are expressed in meningiomas where they might act on the phospholipid remodeling and on the local eicosanoid and/or cytokine networks

Interactions between Magnetic Nanowires and Living Cells : Uptake, Toxicity and Degradation

We report on the uptake, toxicity and degradation of magnetic nanowires by NIH/3T3 mouse fibroblasts. Magnetic nanowires of diameters 200 nm and lengths comprised between 1 {\mu}m and 40 {\mu}m are fabricated by controlled assembly of iron oxide ({\gamma}-Fe2O3) nanoparticles. Using optical and electron microscopy, we show that after 24 h incubation the wires are internalized by the cells and located either in membrane-bound compartments or dispersed in the cytosol. Using fluorescence microscopy, the membrane-bound compartments were identified as late endosomal/lysosomal endosomes labeled with lysosomal associated membrane protein (Lamp1). Toxicity assays evaluating the mitochondrial activity, cell proliferation and production of reactive oxygen species show that the wires do not display acute short-term (< 100 h) toxicity towards the cells. Interestingly, the cells are able to degrade the wires and to transform them into smaller aggregates, even in short time periods (days). This degradation is likely to occur as a consequence of the internal structure of the wires, which is that of a non-covalently bound aggregate. We anticipate that this degradation should prevent long-term asbestos-like toxicity effects related to high aspect ratio morphologies and that these wires represent a promising class of nanomaterials for cell manipulation and microrheology.Comment: 21 pages 12 figure

A New Highly Conserved Antibiotic Sensing/Resistance Pathway in Firmicutes Involves an ABC Transporter Interplaying with a Signal Transduction System

Signal transduction systems and ABC transporters often contribute jointly to adaptive bacterial responses to environmental changes. In Bacillus subtilis, three such pairs are involved in responses to antibiotics: BceRSAB, YvcPQRS and YxdJKLM. They are characterized by a histidine kinase belonging to the intramembrane sensing kinase family and by a translocator possessing an unusually large extracytoplasmic loop. It was established here using a phylogenomic approach that systems of this kind are specific but widespread in Firmicutes, where they originated. The present phylogenetic analyses brought to light a highly dynamic evolutionary history involving numerous horizontal gene transfers, duplications and lost events, leading to a great variety of Bce-like repertories in members of this bacterial phylum. Based on these phylogenetic analyses, it was proposed to subdivide the Bce-like modules into six well-defined subfamilies. Functional studies were performed on members of subfamily IV comprising BceRSAB from B. subtilis, the expression of which was found to require the signal transduction system as well as the ABC transporter itself. The present results suggest, for the members of this subfamily, the occurrence of interactions between one component of each partner, the kinase and the corresponding translocator. At functional and/or structural levels, bacitracin dependent expression of bceAB and bacitracin resistance processes require the presence of the BceB translocator loop. Some other members of subfamily IV were also found to participate in bacitracin resistance processes. Taken together our study suggests that this regulatory mechanism might constitute an important common antibiotic resistance mechanism in Firmicutes. [Supplemental material is available online at http://www.genome.org.

Relations entre systèmes de régulation à deux composants et transporteurs ABC chez Bacillus subtilis

AIX-MARSEILLE2-BU Sci.Luminy (130552106) / SudocSudocFranceF

Résistance à la Bacitracine chez Bacillus subtilis

L enveloppe bactérienne est une cible majeure d un grand nombre d antibiotiques naturels. Certains provoquent d importantes perturbations de la membrane cytoplasmique, d autres ciblent spécifiquement les différentes étapes enzymatiques de la voie de biosynthèse du peptidoglycane, constituant majeur de la paroi. Pour contrer l action de ces antibiotiques, les bactéries ont développé divers systèmes de résistance leur conférant un avantage sélectif dans leur niche écologique. Le rejet de l antibiotique est un des principaux mécanismes de résistance rencontré chez les bactéries. Il implique parfois des transporteurs membranaires de type ABC (pour ATP Binding Cassette) pouvant hydrolyser l ATP pour exporter ou importer un allocrite. Les bactéries possèdent également divers systèmes leur permettant, d une part, de détecter un signal environnemental (antibiotique ou stress de la paroi qu il engendre), et, d autre part, d assurer la transduction du signal qui aboutit à une réponse adaptée. Deux types de systèmes sont impliqués dans les réponses aux stress de la paroi : les phosphorelais et les facteurs sigma à fonction extracytoplasmique. Le groupe des Firmicutes, dont la bactérie modèle est Bacillus subtilis, est un groupe ubiquitaire producteur d antibiotiques et contenant de nombreux organismes pathogènes. Les analyses effectuées au laboratoire ont permis d identifier chez les Firmicutes des systèmes associant un phosphorelais et un transporteur ABC. Dans chacun des cas, les gènes codant les différents partenaires du système sont à proximité sur le chromosome et le phosphorelais régule l expression des gènes codant le transporteur ABC. On trouve trois de ces systèmes chez B. subtilis nommés BceRSAB (anciennement YtsABCD), YvcPQRS et YxdJKLM. L objectif de notre étude était de tester l hypothèse selon laquelle ces systèmes pouvaient être impliqués dans la résistance aux antibiotiques ciblant l enveloppe bactérienne. La bacitracine est un antibiotique qui se complexe à l undécaprényl pyrophosphate (UPP) et inhibe la dernière étape de la biosynthèse du peptidoglycane : la régénération de l undécaprényl phosphate (UP). Nos résultats indiquent que le système BceRSAB est le composant majeur de la résistance à la bacitracine chez B. subtilis. L expression de l opéron bceAB est activée, en présence de bacitracine, par le phosphorelais BceRS. Nous avons également identifié une protéine, nommée BcrC, qui participe à la résistance à la bacitracine chez B. subtilis. Nous avons démontré que cette dernière est une UPP phosphatase impliquée dans la régénération de l UP et s oppose ainsi à l action de la bacitracine. L expression du gène bcrC ne dépend pas du phosphorelais BceRS mais de trois facteurs sigma à fonction extracytoplasmique. En conclusion, B. subtilis possède deux types de systèmes de résistance à la bacitracine indépendants et complémentaires. Nous avons par la suite analysé le mécanisme de régulation de l induction du système BceRSAB par la bacitracine. Nos résultats sont surprenants et montrent clairement que le transporteur ABC BceAB participe à l activation de l expression de ses propres gènes de structure avec le phosphorelais BceRS. De plus, lorsque le pool cellulaire d UPP diminue (lorsque la phosphatase BcrC est surproduite), et en présence de bacitracine, l expression du gène bceA diminue également. Ceci montre que l UPP participe, avec la bacitracine, au stimulus du système BceRSAB. Notre hypothèse de travail est que le transporteur ABC, prédit comme étant un exporteur, prend en charge le complexe UPP/bacitracine et agit comme une flippase pour créer une dissymétrie membranaire ressentie par le senseur BceS. Il n est pas exclu, qu en présence de bacitracine, le transporteur BceAB puisse interagir avec le senseur BceS pour permettre l activation du système. La majeure partie des bactéries du groupe des Firmicutes possède, d une part, des protéines similaires à BcrC, et, d autre part, des systèmes similaires au système BceRSAB. Toutes les protéines BcrClike ont un motif caractéristique permettant de les classer dans la famille des phosphatases de type PAP2. Il est tentant de penser qu elles sont toutes des UPP phosphatases assurant une des étapes clés de la synthèse du peptidoglycane. Par ailleurs, les deux autres systèmes Bce-like de B. subtilis, YvcPQRS et YxdJKLM, sont également activés en présence d antibiotiques ciblant l enveloppe bactérienne et nous savons que le transporteur ABC YvcRS est aussi impliqué dans le mécanisme de régulation. Nous proposons donc que les systèmes Bce-like des Firmicutes sont tous des systèmes de détoxification dirigés contre des antibiotiques ciblant l enveloppe bactérienne.AIX-MARSEILLE2-BU Sci.Luminy (130552106) / SudocSudocFranceF

Transporteurs ABC de type MDR chez Bacillus subtilis, rôle et régulation de l'expression de leur gène de structure

AIX-MARSEILLE2-BU Sci.Luminy (130552106) / SudocSudocFranceF

Le problème de l'agrégation : un essai de synthèse

In this paper, we give a general formulation of the aggregation problem, which includes both the aggregation of weak orderings (Arrow aggregation), and that of functional relationships, whether probabilistic or not (econometric problem of aggregation). The general impossibility of perfect aggregation induces us to define approximate aggregation. Of course, the estimation problems must be taken into account in practical cases : the model (detailed or simplified) to be used depends on the relative independance of the behaviors one seeks to aggregate.In this paper, we give a general formulation of the aggregation problem, which includes both the aggregation of weak orderings (Arrow aggregation), and that of functional relationships, whether probabilistic or not (econometric problem of aggregation). The general impossibility of perfect aggregation induces us to define approximate aggregation. Of course, the estimation problems must be taken into account in practical cases : the model (detailed or simplified) to be used depends on the relative independance of the behaviors one seeks to aggregate.Levy-Garboua Vivien, Denizot François-Bernard. Le problème de l'agrégation : un essai de synthèse. In: Revue économique, volume 23, n°1, 1972. pp. 20-53

Peuplement et mise en valeur de la vallée de Golak (Afghanistan central)

Summary. — On the eastern borders of the Hazaradjat, the Golak valley, a mountainous agricultural district, still fairly backward and resistant to change, has nevertheless been struck by a definitive migration towards the cities, mainly to Kabul, and this has brought about a decrease in population and a lowering of the upper limit of rain farming. This case, as far as we know at this point in time, does not seem representative of the situation of the central Afghanistan mountains.Résumé. — La vallée de Golak, aux confins orientaux du Haza-radjat, domaine d'une vie agricole et montagnarde encore assez rudimentaire et peu ouverte aux innovations, a cependant été atteinte depuis plus d'une génération par un exode rural définitif, dirigé essentiellement vers Kabul, qui a entraîné dépeuplement et abaissement de la limite des cultures pluviales. Ce cas ne semble pas représentatif, au stade actuel de l'évolution et en l'état de nos connaissances, de la situation des montagnes centrales de l'Afghanistan.Denizot François, Haider Habib, De Planhol Xavier. Peuplement et mise en valeur de la vallée de Golak (Afghanistan central). In: Revue Géographique de l'Est, tome 17, n°1-2, Janvier-juin 1977. Monde turco-iranien. pp. 53-71