In vitro assay of alternative phytosanitary products and plant extracts on Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok (Clavicipitaceae).

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito in vitro dos produtos comerciais Dalneem®, Ecolife® e Stubble Aid® na concentração rotulada (CR), na metade (½CR) e no dobro dessa concentração (2CR) e dos extratos aquosos de raiz de Curcuma longa (Zingiberaceae) e de folhas de Cymbopogon citratus (Poaceae), Corymbia citriodora (Myrtaceae) e Rosmarinus officinalis (Lamiaceae), na concentração de 10% (p/v) sobre Metarhizium anisopliae. Os tratamentos foram pulverizados sobre o fungo previamente inoculado no meio de cultura BDA (batata, dextrose e ágar), em placas de Petri. Foram avaliadas as unidades formadoras de colônias (UFC), crescimento vegetativo, produção de conídios, germinação de conídios e atividade inseticida sobre lagartas de Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae). Apesar dos produtos comerciais terem afetado significativamente alguns parâmetros biológicos do fungo, somente Dalneem® 2CR foi classificado como incompatível com o fungo. Os extratos vegetais ocasionaram efeito significativo somente sobre o crescimento vegetativo do fungo (variando de 4 a 7%), sendo todos classificados como compatíveis com o isolado de M. anisopliae

Patogenicidade de isolados de fungos entomopatogênicos à Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera: Noctuidae)

Este trabalho teve como objetivo avaliar a patogenicidade, em condições de laboratório, de 49 isolados dos fungos entomopatogênicos das espécies Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae, contra lagartas de Spodoptera frugiperda. Lagartas de 3oínstar foram imersas em suspensões de 1 × 109conídios/mL de cada um dos isolados por 10 segundos. Posteriormente, foram individualizadas em placas de Petri com dieta artificial, sendo incubadas a 26 ± 1°C e 12 horas de fotofase, e avaliadas, diariamente, durante dez dias. Os isolados de B. bassianamostraram-se mais eficientes, com destaque para o Unioeste 26, que provocou 44,5% de mortalidade e gerou a maior quantidade de conídios nos testes de produção do fungo. Apesar da porcentagem de mortalidade baixa, tais estudos evidenciam potencial dos fungos entomopatogênicos como promissores agentes de controle de S. frugiperda

Ocorrência natural de Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Moniliales: Moniliaceae) e patogenicidade sobre Protortonia navesi Fonseca (Hemiptera: Monophlebiidae) na cultura da mandioca, em Marechal Cândido Rondon, Paraná

RESUMO:O objetivo deste estudo foi registrar a primeira ocorrência natural e patogenicidade da associação entre Beauveria bassiana e Protortonia navesi na cultura da mandioca. Para isso, ninfas e adultos de P. navesi infectados foram coletados em amostragens realizadas quinzenalmente, na área do Instituto Agronômico do Paraná, em Marechal Cândido Rondon, de janeiro a dezembro de 2012. Amostras foram analisadas e, utilizando-se meio de cultura seletivo de aveia, foi isolado o fungo a partir dos cadáveres, sendo identificado como Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., armazenado na Coleção de Fungos Entomopatogênicos do Laboratório de Biotecnologia Agrícola, sob o código Unioeste 78. Para comprovar sua patogenicidade, foi adotado o postulado de Koch, aplicando-se o fungo (109conídios/mL) sobre ninfas e adultos de P. navesi obtidos da criação de laboratório. Após 10 dias de incubação, verificou-se 18% de mortalidade confirmada, sendo considerada baixa a atividade sobre a cochonilha P navesi

Susceptibility of Gyropsylla spegazziniana (Lizer & Trelles) (Hemiptera: Psyllidae) to Beauveria bassiana (Bals.) Vuill.

Gyropsylla spegazziniana is one of the most prominent pest insects of yerba mate culture in all production regions in Brazil, Argentina and Paraguay. Natural enemies have been recorded on G. spegazziniana nymphs and adults, including the Zoophthora radicans entomopathogenic fungus. Since there are no reports of Beauveria bassiana, the aim of this study was to register its pathogenicity with respect to this insect in a laboratory setting. Yerba mate branches were kept in glass flasks with water and we infested each leaf with 20 newly-emerged nymphs. We prepared three replicates per treatment. We sprayed conidia suspensions (1 × 109 conidia/mL) onto the branches, which we transferred to cages and kept in an acclimatized room (26 ± 1°C, 70 ± 10% of relative humidity (R.H.) with a photophase of 14 hours). We evaluated insect mortality daily, and after five days we observed a high level of pathogenicity due to the presence of the fungus, that could be visually observed on the cadaver. The total mortality varied from 25 to 70% (respectively for Unioeste 4 and CG 716) and the confirmed mortality was 30% for Unioeste 52, revealing the fungus' potential. However, more studies are necessary in order to evaluate the strains of this fungus, as well as other species

Efecto de productos fitosanitarios sobre parámetros biológicos de Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Hypocreales: Cordycipitaceae)

El objetivo de este trabajo fue determinar la interacción y los efectos de los productos fitosanitarios comerciales en la concentración recomendada (CR), a la mitad (0,5CR) y el doble de la misma (2CR), y extractos acuosos y alcohólicos vegetales (Rosmarinus officinalis L. - romero, Cymbopogon citratus Stapf - zacate de limón, caña santa, C. winterianus Jowitt - citronella, Laurus nobilis L. - laurel, Azadirachta indica A. Juss - nim, Ricinus communis L. - ricino, higuereta, Melia azedarach L. - melia, paraiso, Corymbia citriodora Hook. - eucaliptus, Ruta graveolens L. - ruda, Curcuma longa L. - cúrcuma, Cinnamomum zeylanicum Blume - canela) y basiodiocarpos del hongo Pycnoporus sanguineus (oreja de palo) (L.) Murrill, todos en la concentración 10%, sobre el hongo entomopatógeno Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. En todos los tratamientos se realizaron pulverizaciones sobre el hongo inoculado previamente en medio de cultivo (BDA).Se evaluaron los parámetros germinación, UFC, crecimiento vegetativo y producción de los conidios. Los productos fitosanitarios comerciales, a pesar de que algunos parámetros fueron afectados se mostraron compatibles con el hongo, así como los extractos acuosos y alcohólicos. Sin embargo, se debe evitar el uso conjunto o aplicaciones subsecuentes de los productos aquí evaluados en menos de 48 horas después de la aplicación del hongo.Palabras clave: hongos entomopatógenos, compatibilidad, extractos vegetales, productos fitosanitarios.EFFECT OF PHYTOSANITARY PRODUCTS ON BIOLOGICAL PARAMETERS OF BEAUVERIA BASSIANA (BALS.) VUILL. (HYPOCREALES: CORDYCIPITACEAE)ABSTRACT: This study was aimed at evaluating the effect of different commercial pesticides, the aqueous and alcoholic extracts of several plants, and basidiocarps of Pycnoporus sanguineus L. on Beauveria bassiana Bals. Vuill. The commercial pesticides studied were Agro-mós, Agro-fos, Bion, Biogermex, Citronella oíl, Forth, Pironim, Bordeaux mixture, Planta Clean, and Sulphur-lime mixture, at the concentration recommended in the product labels (RC), the half of this concentration (1/2 CR), and the two-fold concentration (2 CR). The plant extracts were from Rosmarinus officinalis L., Cymbopogon citratus Stapf, C. winterianus Jowitt, Laurus nobilis L., Azadirachta indica A. Juss, Ricinus communis L., Melia azedarach L., Corymbia citriodora Hook, Ruta graveolens L., Curcuma longa L., Cinnamomum zeylanicum Blume) All the extracts and the basidiocarps of P. sanguineus were used at a 10% concentration. All the products were sprayed over B. bassiana previously inoculated to the culture medium (BDA). The parameters evaluated were germination, CFU, vegetative growth, and conidia production. Despite the deleterious effect of the commercial phytosanitary products on some of the parameters, they were compatible with B. bassiana, the same as the plant extracts were. However, the combined use or subsequent applications of the products here tested must be avoided before the 48 hours of B. bassiana application.Key words: entomopathogenic fungi, compatibility, plant extracts, phytosanitary products

Caracterização e atividade de isolados de fungos entomopatogênicos sobre a “ampola da erva-mate” Gyropsylla spegazziniana (Lizer & Trelles) (Hemiptera: Psyllidae)

Paraguay tea is a native crop of southern Brazil and is also socioeconomically important in Paraguay and Argentina. One of the main pests of this crop is Gyropsylla spegazziniana (Hemiptera: Psyllidae). As there are no registered insecticides for this pest in Brazil, the use of entomopathogenic fungi is an alternative method for its control. This study aimed to evaluate and characterize isolates of the entomopathogenic fungi Beauveria spp., Metarhizium anisopliae, Isaria spp. and Lecanicillium spp. on G. spegazziniana. For this purpose, 5th instar nymphs were transferred to Paraguay tea seedlings, followed by spraying of conidial suspensions (1 × 109 conidia mL-1) and then placing the seedlings in polyvinyl chloride (PVC) cages and maintaining them in a temperature-controlled room (26 ± 1°C, 12h00 photophase, 60 ± 10% R.H.). Insect mortality was evaluated daily for 10 days, and the selected isolates were characterized according to their vegetative growth, conidial production in synthetic culture medium and rice and insecticidal activity as well as through molecular analyses, including sequencing the rDNA-ITS region and RAPD analysis. The genus Beauveria spp. was the most efficient, particularly the Unioeste 44 isolate, which caused the greatest total mortality of G. spegazziniana (81.7%) and showed among the highest conidial production levels on rice, indicating a significant potential to be used in an integrated management program for this pest. Molecular analysis of the rDNA-ITS region allowed the isolates to be identified as B. bassiana and B. brongniartii, and RAPD markers were found to be associated with virulence.A erva-mate (Ilex paraguariensis St. Hil.) é uma cultura nativa do Sul do Brasil, tendo grande importância socioeconômica também para o Paraguai e Argentina. Uma das principais pragas da cultura é a Gyropsylla spegazziniana (Hemiptera: Psyllidae), e pelo fato de não existirem inseticidas registrados para essa praga no Brasil, o uso de fungos entomopatogênicos pode ser uma alternativa para o seu controle. O objetivo desse trabalho foi caracterizar isolados dos fungos entomopatogênicos Beauveria spp., Metarhizium anisopliae, Isaria spp. e Lecanicillium spp. sobre G. spegazziniana. Para tal, ninfas de 5o ínstar foram transferidas para mudas de erva-mate, seguido da pulverização das suspensões de conídios (1 × 109 conídios mL-1), e então as mudas foram acondicionadas em gaiolas de PVC (cloreto de polivinila), e mantidas em sala climatizada (26 ± 1°C; 12h00 de fotofase e U.R. 60 ± 10%). A mortalidade dos insetos foi avaliada diariamente, por 10 dias, e os isolados selecionados foram comparados entre si por meio do crescimento vegetativo, produção de conídios em meio sintético e em arroz, atividade inseticida e análises moleculares, utilizando-se o sequenciamento da região rDNA-ITS e marcadores RAPD. O gênero Beauveria spp. foi o mais eficiente, em especial o isolado Unioeste 44 que apresentou a maior mortalidade total sobre G. spegazziniana (81.7%) e uma das maiores produções de conídios em arroz, mostrando potencial significativo para ser usado em programas de manejo integrado da praga. As análises moleculares da região rDNA-ITS possibilitaram a identificação dos isolados como B. bassiana e B. brongniartii e os marcadores RAPD foram associados à virulência