Dopamine receptor type 1 of Caenorhabditis elegans expressing in mechanosensory neurons

Until now the results on profiling dopamine receptors in C. elegans have been incomplete and fragmentary. The aim of this study was to investigate the expression profile of dop-1 gene in C. elegans using 3 kb promoter with 3'-end locating before ATG of dop-1 gene. Methods. The strain of C. elegans with mutant unc-119 gene was used. To check a pattern of the dop-1 expression, the promoter of this gene was amplified using PCR. The animals were co-bombarded with plasmid pPD95.77 dop-1::GFP and reporter construct containing unc-119 gene. Results. Using GFP as a reporter protein, we built a whole picture of expression of dopamine receptor type 1 in C. elegans and found that this protein could be detected only in mechanosensory neurons such as PLM, PVQR, PVQL, ALNR, ALNL, DVAR, DVC. Keywords: dopamine receptors, mechanosensory neurons, Caenorhabditis elegans, expressionРезультати досліджень експресії дофамінових рецепторів в C. elegans наразі залишаються неповними і фрагментарними. Мета роботи полягала у вивченні профілю експресії дофамінового рецептора типу 1 (dop-1) в C. elegans з використанням промотору розміром 3 тис. п. н., 3'-кінцева послідовність якого розташована перед кодоном ATG гена dop-1. Методи. Культивування штаму C. elegans, мутантного за геном unc-119, з агаром NGM. Для перевірки паттерну експресії dop-1 ампліфіковано промотор гена методом ПЛР. Клітини тварин кобомбардували плазмідою pPD95.77dop-1::GFP та репортерною конструкцією з геном unc-119. Результати. Із застосуванням GFP як репортерного білка вдалося повністю охарактеризувати профіль експресії дофамінового рецептора першого типу в C. elegans. Висновки. Продемонстровано, що даний білок експресується в механосенсорних нейронах, таких як PLM, PVQR, PVQL, ALNR, ALNL, DVAR і DVC. Ключові слова: дофамінові рецептори, механосенсорні нейрони, Caenorhabditis elegans, експресіяДо настоящего времени результаты исследований экспрессии дофаминовых рецепторов в C. elegans остаются неполными и фрагментарными. Цель работы состояла в изучении профиля экспресии дофаминового рецептора первого типа (dop-1) в C. elegans с использованием промотора размером 3 тыс. п. н., 3'-концевая последовательность которого расположена перед кодоном ATG гена dop-1. Методи. Культивирование штамма C. elegans, мутантного по гену unc-119, с агаром NGM. Для проверки паттерна экспрессии dop-1 амплифицировали промотор гена методом ПЛР. Клетки животных кобомбардировали плазмидой pPD95.77dop-1::GFP и репортерной конструкцией с геном unc-119. Результаты. С использованием GFP в качесве репортерного белка удалось полностью охарактеризовать профиль экспрессии дофаминового рецептора первого типа в C. elegans. Выводы. Продемонстрировано, что данный белок детектируется в механосенсорных нейронах, таких как PLM, PVQR, PVQL, ALNR, ALNL, DVAR и DVC. Ключевые слова: дофаминовые рецепторы, механосенсорные нейроны, Caenorhabditis elegans, экспресси

Comparison of dual acting drugs and conventional NSAIDs towards parameters of NO-synthase system and oxidative stress in mucosal membrane of large intestine of rats with experimental ulcerative colitis

Aim was to compare the action of 2A5DHT compound (dual COX-2/5-LOX inhibitor) and conventional non-steroidal anti-inflammatory drugs towards parameters of nitric oxide (NO) system and intensity of oxidative stress in the mucous membrane of the large intestine (MMLI) in rats with experimental ulcerative colitis. Methods. Ulcerative colitis was induced by administration of acetic acid. The activity of NOsynthases, content of NO, and parameters of lipoperoxidation processes were measured in MMLI. Results. COX-2/5-LOX inhibition by 2A5DHT compound did not cause considerable destructive changes of the MMLI of rats. The activity of inducible nitric oxide synthase (iNOS) declined more than 2 fold as compared to their activity in colitis. The intensity of lipoperoxidation processes was found to be much lower than under the separate effect of celecoxib or indomethacine. Conclusions. Dual COX-2/5-LOX inhibition by 2A5DHT has a significant cytoprotective effect in MMLI that is accompanied by reduction of oxidative stress and activity of NO-synthases. The substance 2А5DHT significantly overexceeds the cytoprotective effects of both selective and non-selective COX/LOX inhibitors and can be used in the treatment of inflammatory bowel disease. Keywords: сyclooxygenase-2, 5-lipooxygenase, nitric oxide, lipoperoxidation, ulcerative colitis.Мета. Порівняти вплив сполуки 2A5DHT (інгібітора ЦОГ2/5-ЛОГ) та дію традиційних нестероїдних протизапальних засобів на показники NO-синтазної системи та оксидативного стресу у слизовій оболонці товстої кишки (СОТК) щурів за умов експериментального коліту. Методи. Розвиток коліту індуковано введенням оцтової кислоти per rectum. У СОТК визначено активність NO-синтаз, вміст NO та показники ліпопероксидації. Результати. Одночасне інгібування ЦОГ-2/5- ЛОГ сполукою 2A5DHT суттєвих деструктивних змін у СОТК не спричинило. Активність iNOS знижувалася більш ніж удвічі порівняно з їхньою активністю при коліті. Інтенсивність процесів ліпопероксидації виявилася на значно нижчому рівні, ніж при самостійній дії целекоксибу чи індометацину. Висновки. Одночасне інгібування ЦОГ-2/5-ЛОГ 2A5DHT справляє виражений цитопротективний ефект у СОТК, що проявляється у зниженні оксидативного стресу та активності NO-синтаз. Вплив сполуки 2A5DHT перевищує цитопротективні ефекти селективних і неселективних інгібіторів ЦОГ/ЛОГ, внаслідок чого її можна використовувати у лікуванні запальних захворювань кишки. Ключові слова: циклооксигеназа-2, 5-ліпоксигеназа, оксиди азоту, ліпопероксидація, виразковий коліт.Цель. Сравнить влияние соединения 2A5DHT (ингибитора ЦОГ-2/5-ЛОГ) и действие традиционных нестероидных противовоспалительных препаратов на показатели NO-синтазной системы и интенсивность оксидативного стресса слизистой оболочки толстой кишки (СОТК) крыс при экспериментальном колите. Методы. Розвитие колита моделировали введением уксусной кислоты per rectum. В СОТК определяли активность NO-синтаз, содержание NO и показатели липопероксидации. Результаты. Одновременное ингибирование ЦОГ2/5-ЛОГ соединением 2A5DHT выраженных деструктивних изменений в СОТК не вызвало. Активность iNOS снижалась болем чем вдвое по сравнению с их действием при колите. Интенсивность процессов липопероксидации была значительно ниже, чем при самостоятельном влиянии целекоксиба или индометацина. Выводы. Одновременное ингибирование ЦОГ-2/ 5-ЛОГ 2A5DHT имеет выраженный цитопротекторный эффект в СОТК, проявляющийся в снижении оксидативного стресса и активности NO-синтаз. Влияние 2A5DHT превышает цитопротекторное действие селективных и неселективных ингибиторов ЦОГ/ЛОГ, вследствие чего его можно использовать в лечении воспалительных заболеваний кишки. Ключевые слова: циклооксигеназа-2, 5-липоксигеназа, оксиды азота, липопероксидация, язвенный колит

Dopamine receptor type 1 of Caenorhabditis elegans expressing in mechanosensory neurons

Until now the results on profiling dopamine receptors in C. elegans have been incomplete and fragmentary. The aim of this study was to investigate the expression profile of dop-1 gene in C. elegans using 3 kb promoter with 3'-end locating before ATG of dop-1 gene. Methods. The strain of C. elegans with mutant unc-119 gene was used. To check a pattern of the dop-1 expression, the promoter of this gene was amplified using PCR. The animals were co-bombarded with plasmid pPD95.77 dop-1::GFP and reporter construct containing unc-119 gene. Results. Using GFP as a reporter protein, we built a whole picture of expression of dopamine receptor type 1 in C. elegans and found that this protein could be detected only in mechanosensory neurons such as PLM, PVQR, PVQL, ALNR, ALNL, DVAR, DVC. Keywords: dopamine receptors, mechanosensory neurons, Caenorhabditis elegans, expressionРезультати досліджень експресії дофамінових рецепторів в C. elegans наразі залишаються неповними і фрагментарними. Мета роботи полягала у вивченні профілю експресії дофамінового рецептора типу 1 (dop-1) в C. elegans з використанням промотору розміром 3 тис. п. н., 3'-кінцева послідовність якого розташована перед кодоном ATG гена dop-1. Методи. Культивування штаму C. elegans, мутантного за геном unc-119, з агаром NGM. Для перевірки паттерну експресії dop-1 ампліфіковано промотор гена методом ПЛР. Клітини тварин кобомбардували плазмідою pPD95.77dop-1::GFP та репортерною конструкцією з геном unc-119. Результати. Із застосуванням GFP як репортерного білка вдалося повністю охарактеризувати профіль експресії дофамінового рецептора першого типу в C. elegans. Висновки. Продемонстровано, що даний білок експресується в механосенсорних нейронах, таких як PLM, PVQR, PVQL, ALNR, ALNL, DVAR і DVC. Ключові слова: дофамінові рецептори, механосенсорні нейрони, Caenorhabditis elegans, експресіяДо настоящего времени результаты исследований экспрессии дофаминовых рецепторов в C. elegans остаются неполными и фрагментарными. Цель работы состояла в изучении профиля экспресии дофаминового рецептора первого типа (dop-1) в C. elegans с использованием промотора размером 3 тыс. п. н., 3'-концевая последовательность которого расположена перед кодоном ATG гена dop-1. Методи. Культивирование штамма C. elegans, мутантного по гену unc-119, с агаром NGM. Для проверки паттерна экспрессии dop-1 амплифицировали промотор гена методом ПЛР. Клетки животных кобомбардировали плазмидой pPD95.77dop-1::GFP и репортерной конструкцией с геном unc-119. Результаты. С использованием GFP в качесве репортерного белка удалось полностью охарактеризовать профиль экспрессии дофаминового рецептора первого типа в C. elegans. Выводы. Продемонстрировано, что данный белок детектируется в механосенсорных нейронах, таких как PLM, PVQR, PVQL, ALNR, ALNL, DVAR и DVC. Ключевые слова: дофаминовые рецепторы, механосенсорные нейроны, Caenorhabditis elegans, экспресси

New oxidovanadium(IV) complexes with 2,2′-bipyridine and 1,10-phenathroline ligands: Synthesis, structure and high catalytic activity in oxidations of alkanes and alcohols with peroxides

Reactions of [VCl 3 (thf) 3 ] or VBr 3 with 2,2′-bipyridine (bpy) or 1,10‐-phenanthroline (phen) in a 1:1 molar ratio in air under solventothermal conditions has afforded polymeric oxidovanadium(IV) four complexes 1‒4 of a general formula [VO(L)X 2 ] n (L = bpy, phen and X = Cl, Br). Monomeric complex [VO(DMF)(phen)Br 2 ] (4a) has been obtained by the treatment of compound 4 with DMF. The complexes were characterized by IR spectroscopy and elemental analysis. The crystal structures of 3 and 4a were determined by an X‐-ray diffraction (XRD) analysis. The {VOBr 2 (bpy)} fragments in 3 form infinite chains due to the V = O…V interactions. The vanadium atom has a distorted octahedral coordination environment. Complexes 1‒4 have been tested as catalysts in the homogeneous oxidation of alkanes (to produce corresponding alkyl hydroperoxides which can be easily reduced to alcohols by PPh 3 ) and alcohols (to corresponding ketones) with H 2 O 2 or tert‐-butyl hydroperoxide in MeCN. Compound 1 exhibited the highest activity. The mechanism of alkane oxidation was established using experimental selectivity and kinetic data and theoretical DFT calculations. The mechanism is of the Fenton type involving the generation of HO • radicals. © 2019 by the authors. Licensee MDPI, Basel, Switzerland

Antibacterial HA-coatings on bioresorbable Mg alloy

In this study, a calcium-phosphate coating was formed on a Mg–Mn–Ce alloy by the plasma electrolytic oxidation (PEO). The antibiotic vancomycin, widely used in the treatment of infections caused by Staphylococcus aureus (S. aureus), was impregnated into the coating. Samples with vancomycin showed high bactericidal activity against S. aureus. The mechanical and electrochemical properties of the formed coatings were studied, as well as in vitro cytotoxicity tests and in vivo tests on mature male rats were performed. According to SEM, EDS, XRD and XPS data, coatings had a developed morphology and contained hydroxyapatite, which indicates high biocompatibility. The analysis of roughness of coatings without and with vancomycin did not reveal any differences, confirming the high roughness of the samples. During electrochemical tests, an increase in corrosion resistance by more than two times after the application of PEO coatings was revealed. According to the results of an in vivo study, after 28 days of the implantation of samples with calcium phosphate PEO coating and vancomycin, no signs of inflammation were observed, while an inflammatory reaction developed in the area of implantation of bare alloy, followed by encapsulation. Antibiotic release tests from the coatings show a sharp decrease in the concentration of the released antibiotic on day 7 and then a gradual decrease until day 28. Throughout the experiment, no significant deviations in the condition and behavior of the animals were observed; clinical tests did not reveal a systemic toxic reaction