Estudio retrospectivo de leptospirosis en fetos bovinos en la provincia de La Pampa

La Leptospirosis, es una enfermedad que afecta a los animales domésticos, fauna silvestre y al hombre, es de curso agudo y de distribución mundial. Es una bacteria helicoidal de la familia de las espiroquetaceas. Todas las leptospiras patógenas se encuentran clasificadas bajo una sola especie: Leptospira Interrogans, de la cual se distinguen 212 serovariedades que se encuentran en 23 serogrupos. Entre las serovariedades más comunes que afectan al ganado bovino se encuentra: pomona, hardjo, tarassovi, wolfi, icterohaemorrhagiae, hebdomadis pyrogenes. La causa más común documentada de leptospirosis entre el ganado en los EE.UU. y en gran parte del mundo es serovar hardjo, para los que el ganado es el anfitrión de mantenimiento. Serovar hardjo tiene la capacidad de colonizar y persistir en el tracto genital de las vacas y los toros infectados. Los animales silvestres y los roedores actúan como reservorios importantes en la infección. La trasmisión de la enfermedad puede ser de forma directa, a través de un contacto con orina infectada, descargas uterinas, restos de placenta (luego de aborto), en forma venérea o por vía transplacentaria (infecciones congénitas). La forma indirecta de contraer la enfermedad es por la contaminación de los pastos, agua de bebida y alimentos. Aunque la tasa de mortalidad es baja en bovinos (5%), la morbilidad suele ser elevada, pudiendo llegar al 100% de los animales expuestos. En los terneros la mortalidad es mayor que en los adultos. Las cifras de aborto, el descenso de producción de leche y la muerte de bovinos, elevan las pérdidas económicas. Es muy importante realizar su diagnostico por medio del laboratorio, para lo cual se han establecido varias técnicas y pruebas de diagnostico, entre las cuales se encuentra la serológica donde se utilizan de 1 a 20 serovares o mas, dependiendo del área y de las leptospiras que hayan sido aisladas, o detectados sus anticuerpos en los sueros sanguíneos de los animales, esta técnica es una aglutinación en microplaca (MAT). Otras técnicas para demostrar leptospiras en la placenta y el feto son: inmunofluorescencia, PCR e inmunohistoquímica. El diagnóstico de la infección serovar Hardjo es más difícil y requiere una combinación de enfoques. La serología solo a menudo no identifica animales infectados con serovar hardjo, porque excretores seronegativos son comunes en los rebaños de ganado infectadas. La técnica confirmatoria “gold standard” es el cultivo, aislamiento y tipificación de la cepa aislada. Los datos que se utilizarán para el presente estudio provendrán de los registros del Laboratorio Santa Rosa. Dicha documentación contiene la información de los fetos abortados y en algunos casos serología de la madre abortada y compañeras del lote. Este material fue enviado por médicos veterinarios de la zona de estudio para determinar la causa de aborto. Como parte de la rutina de todos los fetos, profesional veterinario del laboratorio, realizó la necropsia del mismo observando atentamente la macroscopía, se extrajeron las muestras necesarias para bacteriología (pulmón, liquido de cuajo), inmunofluorescencia (hígado, riñón, líquido de cuajo, tiroides, pulmón) e histopatología (hígado, riñón, pulmón, corazón, cerebro), y también suero para realizar pruebas serológicas.Facultad de Ciencias Veterinaria

Estudio retrospectivo de leptospirosis en fetos bovinos en la provincia de La Pampa

La Leptospirosis, es una enfermedad que afecta a los animales domésticos, fauna silvestre y al hombre, es de curso agudo y de distribución mundial. Es una bacteria helicoidal de la familia de las espiroquetaceas. Todas las leptospiras patógenas se encuentran clasificadas bajo una sola especie: Leptospira Interrogans, de la cual se distinguen 212 serovariedades que se encuentran en 23 serogrupos. Entre las serovariedades más comunes que afectan al ganado bovino se encuentra: pomona, hardjo, tarassovi, wolfi, icterohaemorrhagiae, hebdomadis pyrogenes. La causa más común documentada de leptospirosis entre el ganado en los EE.UU. y en gran parte del mundo es serovar hardjo, para los que el ganado es el anfitrión de mantenimiento. Serovar hardjo tiene la capacidad de colonizar y persistir en el tracto genital de las vacas y los toros infectados. Los animales silvestres y los roedores actúan como reservorios importantes en la infección. La trasmisión de la enfermedad puede ser de forma directa, a través de un contacto con orina infectada, descargas uterinas, restos de placenta (luego de aborto), en forma venérea o por vía transplacentaria (infecciones congénitas). La forma indirecta de contraer la enfermedad es por la contaminación de los pastos, agua de bebida y alimentos. Aunque la tasa de mortalidad es baja en bovinos (5%), la morbilidad suele ser elevada, pudiendo llegar al 100% de los animales expuestos. En los terneros la mortalidad es mayor que en los adultos. Las cifras de aborto, el descenso de producción de leche y la muerte de bovinos, elevan las pérdidas económicas. Es muy importante realizar su diagnostico por medio del laboratorio, para lo cual se han establecido varias técnicas y pruebas de diagnostico, entre las cuales se encuentra la serológica donde se utilizan de 1 a 20 serovares o mas, dependiendo del área y de las leptospiras que hayan sido aisladas, o detectados sus anticuerpos en los sueros sanguíneos de los animales, esta técnica es una aglutinación en microplaca (MAT). Otras técnicas para demostrar leptospiras en la placenta y el feto son: inmunofluorescencia, PCR e inmunohistoquímica. El diagnóstico de la infección serovar Hardjo es más difícil y requiere una combinación de enfoques. La serología solo a menudo no identifica animales infectados con serovar hardjo, porque excretores seronegativos son comunes en los rebaños de ganado infectadas. La técnica confirmatoria “gold standard” es el cultivo, aislamiento y tipificación de la cepa aislada. Los datos que se utilizarán para el presente estudio provendrán de los registros del Laboratorio Santa Rosa. Dicha documentación contiene la información de los fetos abortados y en algunos casos serología de la madre abortada y compañeras del lote. Este material fue enviado por médicos veterinarios de la zona de estudio para determinar la causa de aborto. Como parte de la rutina de todos los fetos, profesional veterinario del laboratorio, realizó la necropsia del mismo observando atentamente la macroscopía, se extrajeron las muestras necesarias para bacteriología (pulmón, liquido de cuajo), inmunofluorescencia (hígado, riñón, líquido de cuajo, tiroides, pulmón) e histopatología (hígado, riñón, pulmón, corazón, cerebro), y también suero para realizar pruebas serológicas.Facultad de Ciencias Veterinaria

Polymorphisms of BoLA-DRB3 gene and its association with resistance / susceptibility to Leucosis in Holstein cattle from La Pampa

La leucosis bovina enzoótica es una enfermedad del ganado bovino adulto causada por el retrovirus de la leucemia bovina. Se puede manifestar como: una forma asintomática aleucémica, con un número normal de linfocitos B en sangre; una forma de linfocitosis permanente, con aumento del número de linfocitos B y como una presentación linfoproliferativa tumoral en forma de linfosarcoma. Los alelos de los genes del Complejo Principal de Histocompatibilidad Bovino (BoLA) han sido asociados con resistencia y susceptibilidad a enfermedades infecciosas. El objetivo general del presente estudio consistió en asociar los polimorfismos del exón 2 del gen BoLA-DRB3.2, definidos mediante la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa y la técnica de Polimorfismos de la Longitud de los Fragmentos de Restricción (PCR-RFLP), con resistencia/susceptibilidad a leucosis en vacas Holstein de La Pampa. Se basó en un diseño caso/control, para lo cual se tomó muestra de sangre a 150 animales en 3 oportunidades con intervalos de tres meses cada una. Los animales fueron incluidos en el grupo caso cuando dieron positivos en la prueba de inmunodeficiencia en agar (DIDA) y cuyo recuento linfocitario en sangre fue ≥ 10.000 linfocitos/μl y el grupo control estuvo constituido con animales negativos en DIDA y que tenían < 10.000 linfocitos/μl de sangre. Los tests Exacto de Fisher y Odds Ratio (OR) de Woolf-Haldane se utilizaron para estudiar la asociación entre recuento de linfocitos y resultados del DIDA con las variantes alélicas. En 82 animales genotipados por PCRRFLP el alelo DRB3.2*22 evidenció un OR= 5,332 (p= 0,0138) y el alelo DRB3.2*11 mostró un OR= 0,11 (p=0,001) siendo más frecuentes en el grupo caso y en el grupo control, respectivamente. Estos resultados evidenciarían que vacas con el alelo DRB3.2*22 presentarían mayor riesgo a desarrollar leucosis y vacas con el alelo DRB3.2*11 un menor riesgo (resistencia). El análisis de la relación entre alelos del gen BoLA-DRB3.2 y resistencia/ susceptibilidad a leucosis podría mejorarse con investigaciones profundas en linajes familiares de vacas lecheras.EBL is a disease of adult cattle caused by the retrovirus, bovine leukemia. It can manifest: aleukemic an asymptomatic form, with a normal number of B lymphocytes in the blood; a form of permanent lymphocytosis, with an increase in the number of B lymphocytes and finally a lymphoproliferative tumor presentation in the form of lymphosarcoma. The alleles of the genes of the Bovine Major Histocompatibility Complex (BoLA) have been associated with resistance and susceptibility to infectious diseases. The overall objective of this study was to associate polymorphisms of the BoLA-DRB3.2 gene, defined by the technique of polymerase chain reaction technique and polymorphisms length of the restriction fragment (PCR-RFLP), with resistance / susceptibility to leucosis in Holstein cows of La Pampa. It relied on a case/control design, for which blood samples were taken to 150 animals in 3 opportunities with intervals of three months each. The case group comprised animals that were positive in the immunodiffusion agar animals test (DIDA) and whose blood lymphocyte count was ≥ 10.000 linf/μl and the control group included cows that ware negative for DIDA and present &lt; 10.000 linf/μl of blood. Fisher’s Exact test and Odds Ratio (OR) of Woolf-Haldane were used to study the association between lymphocyte count and DIDA results with allelic variants. In 82 animals genotyped by PCR-RFLP, the DRB3.2*22 allele showed an OR = 5.332 (p = 0.0138) and DRB3.2*11 allele had a OR value of 0.11 (p=0.001) and were the most frequent in the control group and in the case group, respectively. These results would showed DRB3.2*22 allele and DRB3.2*11 allele a high risk of having leucosis (susceptibility) and low risk to suffer (resistance) respectively. The analysis of the relationship between alleles of the BoLA and resistance/susceptibility to leucosis could be improved with deep research on family lineages of dairy cows.Instituto de Genética Veterinari

Polimorfismos del exón 2 del gen BoLA-DRB3 asociados con resistencia / susceptibilidad a leucosis en ganado Holstein de La Pampa /Polymorphisms of BoLA-DRB3 gene and its association with resistance / susceptibility to Leucosis in Holstein cattle from La

EBL is a disease of adult cattle caused by the retrovirus, bovine leukemia. It can manifest: aleukemic an asymptomatic form, with a normal number of B lymphocytes in the blood; a form of permanent lymphocytosis, with an increase in the number of B lymphocytes and finally a lymphoproliferative tumor presenta­tion in the form of lymphosarcoma. The alleles of the genes of the Bovine Major Histocompatibility Complex (BoLA) have been associated with resistance and susceptibility to infectious dis­eases. The overall objective of this study was to associate poly­morphisms of the BoLA-DRB3.2 gene, defined by the technique of polymerase chain reaction technique and polymorphisms length of the restriction fragment (PCR-RFLP), with resistance / susceptibility to leucosis in Holstein cows of La Pampa. It relied on a case/control design, for which blood samples were taken to 150 animals in 3 opportunities with intervals of three months each. The case group comprised animals that were positive in the immunodiffusion agar animals test (DIDA) and whose blood lymphocyte count was ≥ 10.000 linf/μl and the control group included cows that ware negative for DIDA and present &lt; 10.000 linf/μl of blood. Fisher’s Exact test and Odds Ratio (OR) of Woolf-Haldane were used to study the association between lym­phocyte count and DIDA results with allelic variants. In 82 ani­mals genotyped by PCR-RFLP, the DRB3.2*22 allele showed an OR = 5.332 (p = 0.0138) and DRB3.2*11 allele had a OR value of 0.11 (p=0.001) and were the most frequent in the control group and in the case group, respectively. These results would showed DRB3.2*22 allele and DRB3.2*11 allele a high risk of having leucosis (susceptibility) and low risk to suffer (resistance) re­spectively. The analysis of the relationship between alleles of the BoLA and resistance/susceptibility to leucosis could be im­proved with deep research on family lineages of dairy cows.  La leucosis bovina enzoótica es una enfermedad del ganado bo­vino adulto causada por el retrovirus de la leucemia bovina. Se puede manifestar como: una forma asintomática aleucémica, con un número normal de linfocitos B en sangre; una forma de linfocitosis permanente, con aumento del número de linfocitos B y como una presentación linfoproliferativa tumoral en forma de linfosarcoma. Los alelos de los genes del Complejo Principal de Histocompatibilidad Bovino (BoLA) han sido asociados con resistencia y susceptibilidad a enfermedades infecciosas. El ob­jetivo general del presente estudio consistió en asociar los poli­morfismos del exón 2 del gen BoLA-DRB3.2, definidos mediante la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa y la técnica de Polimorfismos de la Longitud de los Fragmentos de Restricción (PCR-RFLP), con resistencia/susceptibilidad a leucosis en vacas Holstein de La Pampa. Se basó en un diseño caso/control, para lo cual se tomó muestra de sangre a 150 animales en 3 opor­tunidades con intervalos de tres meses cada una. Los animales fueron incluidos en el grupo caso cuando dieron positivos en la prueba de inmunodeficiencia en agar (DIDA) y cuyo recuento linfocitario en sangre fue ≥ 10.000 linfocitos/μl y el grupo con­trol estuvo constituido con animales negativos en DIDA y que te­nían &lt; 10.000 linfocitos/μl de sangre. Los tests Exacto de Fisher y Odds Ratio (OR) de Woolf-Haldane se utilizaron para estudiar la asociación entre recuento de linfocitos y resultados del DIDA con las variantes alélicas. En 82 animales genotipados por PCR-RFLP el alelo DRB3.2*22 evidenció un OR= 5,332 (p= 0,0138) y el alelo DRB3.2*11 mostró un OR= 0,11 (p=0,001) siendo más frecuentes en el grupo caso y en el grupo control, respectiva­mente. Estos resultados evidenciarían que vacas con el alelo DRB3.2*22 presentarían mayor riesgo a desarrollar leucosis y vacas con el alelo DRB3.2*11 un menor riesgo (resistencia). El análisis de la relación entre alelos del gen BoLA-DRB3.2 y resis­tencia/susceptibilidad a leucosis podría mejorarse con investi­gaciones profundas en linajes familiares de vacas lecheras  

Polimorfismo de la región promotora proximal del gen BOLA-DRB3 y su asociación con la resistencia/ susceptibilidad a leucosis en ganado holstein de la provincia de La Pampa

La Región Regulatoria Proximal (URR) de los genes de Clase II del Complejo Principal de Histocompatibilidad (MHC) es altamente conservada en mamíferos. Ha sido estudiada en humanos, ratones, equinos y bovinos, donde se describieron polimorfismos de la URR en los genes DQB y DRB. Dichos polimorfismos están localizados principalmente en el segundo exón y en menor medida en la URR y pueden tener como consecuencia diferencias en la expresión alélica y especificidad en tejidos de moléculas de Clases II afectando el nivel transcripcional y por lo tanto la respuesta inmune. El objetivo del presente estudio consistió en asociar los polimorfismos de la región URR del gen DRB3 del MHC de bovinos, definidos mediante la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa-Polimorfismos de la Longitud de los Fragmentos de Restricción (PCR-RFLP) y Secuenciación Directa (PCR-SBT), con resistencia/susceptibilidad a leucosis en vacas Holstein de la Provincia de La Pampa. Se basó en un dise- ño caso/control, para lo cual se tomó muestra de sangre a 150 animales, los que fueron agrupados en dos categorías según el resultado de la prueba de inmunodeficiencia en agar (DIDA) (positivos-susceptibles o negativos-resistentes) y en dos grupos según el recuento linfocitario en sangre (&lt; 10.000 linfocitos/µl); ≥ 10.000 linfocitos/µl). En 33 animales genotipados por PCRSBT se detectaron 7 alelos en la URR y 23 del exón 2 del gen DRB3. Tres de los de la región URR fueron nuevos. Nuestros resultados pueden sugerir que no existe relación entre la URR y el exón 2 del gen BoLA-DRB3 (desequilibrio de ligamiento P &gt; 0,05), probablemente debido a la recombinación a lo largo del tiempo. En 80 animales genotipados por PCR-RFLP el alelo más frecuente en el grupo con resultados en DIDA positivo y con ≥ 10.000 linfocitos/ µl (susceptible) fue el DRB3.*22 con un 19%. En tanto en el grupo con resultados a DIDA, negativo y con &lt; 10.000 linfocitos/ µl (resistentes) el alelo DRB.3*23 apareció con una frecuencia del 25% y el DRB.3*11 con una frecuencia del 20%, coincidiendo con otros autores en cuanto a susceptibilidad y resistencia respectivamente. Nuestros resultados también sugieren que ambas regiones de genes de Clase II pueden ser incluidas en el desarrollo de nuevas técnicas de genotipificación, especialmente aquellas basadas en las tecnologías de Next Generation Sequencing (NGS)