The role of dendritic cells in the regulation of tissue proliferative potential in hyperplastic endometrium

Целью исследования было определение особенностей иммунологического профиля женщин, больных доброкачественными гиперпластическими процессами эндометрия (ГПЭ). Показано, что иммунологический статус пациенток с ГПЭ характеризуется повышением содержания естественных киллеров (CD16+/CD56+) до (13,2±0,6) % у пациенток II группы, до (11,9±0,6) % в III группе и до (11,3±0,8) % в контроле. Определена корреляция степени выраженности морфологических изменений и уровней CD16+/CD56+ (r=0,71; p<0,01). Доказано, что дендритные клетки в эндометрии больных атипичной гиперплазией женщин демонстрируют достоверно высокий уровень экспрессии — до 2–3 баллов. Обсуждаются перспективы дальнейших исследований функционального состояния дендритных клеток в качестве критерия дифференциального диагноза и прогнозирования течения ГПЭ.Atypical EH cytological atypia was characterised by the lack of polarity, increasing the nuclei and change their shape, increasing glandular-stromal ratio to (0.92±0.09). In 38 (76.0 %) patients from III group there was diagnosed atypical hyperplasia (adenomatosis with atypia), in which the number of irregularly shaped glands enlarged, they are tight, epithelial lining glands little rough inner contour. Dendritic cells (DCs) are specialized antigen presenting cells that are highly involved in the stimulation and modulation of the immune response within mucosal surfaces, including the female reproductive tract. It is shown that the immunological status of patients suffering from endometrial hyperplasia with a higher content of natural killer cells (CD16+/CD56+) to (13.2±0.6) % in the patients of group II, to (11.9±0.6)% in group III and to (11.3±0.8)% in control. There was determined the correlation degree of morphological changes and levels of CD16+/CD56+ (r=+0.71; p<0,01). It is proved that the dendritic cells in the endometrium of patients with atypical hyperplasia women show significantly higher level of expression — 2–3 scores. There are studied the prospects for further research study of the functional state of dendritic cells as a criterion for differential diagnosis and prognosis of the proliferative potential in hyperplastic endometrium

Анализ функционального состояния дендритных клеток CD56+, CD83+, CD1A + и маркеров аппотоза BCL2, ВАХ при гиперпластических процессах эндометрия

The treatment group consisted of 50 women, 25 - with simple hyperplasia (group I) and 25 - with atypical glandular-cystic hyperplasia (group II) of endometrium. Control set included 20 healthy women of the same age. The expression of activation markers CD16 +, CD56 +, CD1a, CD85k and CD123 on the surface of lymphocytes was studied by flow cytometry. Determination of CD receptors in endometrial biopsies performed by immunohistochemical method with the use of monoclonal antibodies LIR, Dardilly (France) to CD56 +, CD83 +, CD1a+. Identification of tissue antigens was performed by avidin-biotin method. Expression of the antiapoptosis protein BCL-2 protein and proapoptosis protein CVC was observed in the cytoplasm of cells, it differed in intensity of staining. Statistical analysis of the results is made by methods of variance and correlation analysis using software Statistica 10.0. Results. In immunohistochemical study of endometrial biopsies of the women with atypical and simple hyperplasia it was established that dendritic cells CD56 + and CD83 + showed a high level of expression. Differences with control are reliable in group II (p <0.05). At the same time it was found that the degree of expression of factors Bcl-2 and BAX was either weak or moderate (1-2 +; less frequently 3 +) in the women with atypical endometrial hyperplasia and negative - in healthy women and women with simple endometrial hyperplasia. The level of expression of markers of apoptosis in the second group correlated (r = 0.54) with the severity of the expression of dendritic cells. This demonstrates the important role of the functional state of dendritic cells 132 in the regulation of cell proliferation and apoptosis activity in the women with endometrial hyperplasia. The results obtained demonstrate the feasibility of the use in the diagnostic algorithm in patients with endometrial hyperplasia estimation of the functional state of dendritic cells.При иммуногистохимическом исследовании биоптатов эндометрия женщин с простой и атипической гиперплазией, установлено, что дендритные клетки CD56+ и CD83+ демонстрировали высокий уровень экспрессии. Различия с контролем были достоверными во II группе (р <0,05). Вместе с тем установлено, что степень экспрессии факторов Bcl-2 и ВАХ была слабой или умеренной (1-2 +, реже 3 +) у женщин с атипическойой гиперплазией эндометрия и отрицательной - у здоровых женщин и женщин с простой гиперплазией эндометрия. При этом уровень экспрессии маркеров апоптоза во II группе коррелировал (r = 0,54) с выраженностью экспрессии дендритных клеток. Это свидетельствует о существенной роли функционального состояния дендритных клеток в регуляции клеточной пролиферации и активности апоптоза у женщин с гиперпластическими процессами эндометрия. Приведенное свидетельствует о целесообразности применения в диагностическом алгоритме у пациенток с гиперпластическими процессами эндометрия оценки функционального состояния антиген дендритных клеток

Иммуно-морфологические особенности развития гиперпластических процессов эндометрия

Метою дослідження була оцінка імуно-морфологічних особливостей розвитку гіперпластичних процесів ендометрія шляхом визначення експресії дендритних клітин (CD56+, CD83+, CD1a+) та факторів апоптозу (Bcl-2 та Вах) в тканинах простої та атипової залозисто-кістозної гіперплазії ендометрія. Матеріали та методи. Обстежено 25 жінок із простою гіперплазією (І група), 25 – з атиповою залозисто-кістозною гіперплазією ендометрія (ІІ група), контрольну групу склали 20 практично здорових жінок. Визначення вмісту дендритних клітин в біоптатах ендометрія проведено імуногістохімічним методом із використанням моноклональних антитіл LIR, Dardilly (Франція) до CD56+, CD83+, CD1a+. Експресія антиапоптозного білка Bcl-2 і проапоптозного білка Вах спостерігалася в цитоплазмі клітин, відрізнялася за інтенсивністю фарбування. Результати. При імуногістохімічному дослідженні біоптатів ендометрія встановлено, що дендритні клітини, які експресували антигени CD56+, CD83+, CD1a+, демонстрували високий рівень експресії. При цьому глибина і характер імунологічних порушень, що супроводжують патологічну трансформацію ендометрія, залежать не тільки від тяжкості його морфологічних змін, але й від тривалості перебігу процесу (r = 0,61) та наявності супутньої патології (rA = 0,66). Водночас встановлено, що ступінь експресії факторів Bcl-2 та Вах була слабкою або помірною у жінок із простою та атиповою гіперплазією ендометрія та негативною – у здорових жінок. Рівень експресії маркерів апоптозу у пацієнток ІІ групи корелював (r = 0,54) із вираженістю експресії незрілих дендритних клітин СD1a+. Це свідчить про суттєву роль функціонального стану дендритних клітин в регуляції клітинної проліферації та активності апоптозу у жінок із гіперпластичними процесами ендометрія.The aim of the study was to evaluate the immuno-morphological features of endometrial hyperplastic processes by determining the expression of dendritic cells (CD56+, CD83+, CD1a+) and apoptotic factors (Bcl-2 and Вах) in simple and atypical endometrial hyperplasia. Materials and methods. The study involved 25 women with simple hyperplasia (group I), 25 – atypical hyperplasia (group II), control group consisted of 20 healthy women. Determination of dendritic cells in the endometrial biopsies performed by immunohistochemical method using monoclonal antibodies LIR, Dardilly (France) to CD56+, CD83+, CD1a+. Expression of the antiapoptosis protein Bcl-2 and proapoptosis protein Вах was observed in the cytoplasm of cells and differed in intensity staining. Results. Immunohistochemical study of endometrial biopsies found that dendritic cells that expressed antigens CD56+, CD83+, CD1a+, showed a high level of expression. In this case, the severity and nature of immune disorders that accompany pathological endometrial transformation depends not only on the severity of its morphological changes, but also on the duration of the procedure (r = 0,61) and the presence of comorbidity (rA = 0,66). At the same time we found that the degree of expression of factors Bcl-2 and Вах was weak to moderate in women with simple and atypical hyperplasia of the endometrium and negative – in healthy women. The level of expression of markers of apoptosis in group II patients correlated (r = 0,54) with the severity of expression of immature dendritic cells CD1a+. This demonstrates the important role of the functional state of dendritic cells in the regulation of cell proliferation and apoptosis activity in women with endometrial hyperplasia. Keywords: endometrial hyperplasia, dendritic cells, apoptosis.Целью исследования была оценка иммуно-морфологических особенностей развития гиперпластических процессов эндометрия путем определения экспрессии дендритных клеток (CD56+, CD83+, CD1a+) и факторов апоптоза (Bcl-2 и Вах) в ткани простой и атипической железисто-кистозной гиперплазии эндометрия. Материалы и методы. Обследовано 25 женщин с простой гиперплазией (I группа), 25 – с атипичной железисто-кистозной гиперплазией эндометрия (II группа), контрольную группу составили 20 практически здоровых женщин. Определение содержания дендритных клеток в биоптатах эндометрия проведено иммуногистохимическим методом с использованием моноклональных антител LIR, Dardilly (Франция) к CD56+, CD83+, CD1a+. Экспрессия антиапоптозного белка Bcl-2 и проапоптозного белка Вах исследовалась в цитоплазме клеток, различалась по интенсивности окрашивания. Результаты. При иммуногистохимическом исследовании биоптатов эндометрия установлено, что дендритные клетки, которые экспрессировали антигены CD56+, CD83+, CD1a+, демонстрировали высокий уровень экспрессии. При этом установлено, что глубина и характер иммунологических нарушений, сопровождающих патологическую трансформацию эндометрия, зависят не только от тяжести его морфологических изменений, но и от длительности течения процесса (r = 0,61) и наличия сопутствующей патологии (rA = 0,66). Вместе с тем установлено, что степень экспрессии факторов Bcl-2 и Вах была слабой или умеренной у женщин с простой и атипической гиперплазией эндометрия и отрицательной – у здоровых женщин. Уровень экспрессии маркеров апоптоза у пациенток II группы коррелировал (r = 0,54) с выраженностью экспрессии незрелых дендритных клеток СD1a+. Это свидетельствует о существенной роли функционального состояния дендритных клеток в регуляции клеточной пролиферации и активности апоптоза у женщин с гиперпластическими процессами эндометрия