Evaluation of the relative expression of genes associated with adherence after different hours of co-culture between Streptococcus uberis and MAC-T cells

Streptococcus uberis is an environmental pathogen associated with subclinical and clinical IMI in both lactating and non-lactating cows. RC19 strain was isolated from a cow with subclinical mastitis, qualitatively classified as moderate biofilm producer in Todd Hewitt medium (THB), and it showed a high value of the adhered bacteria (CFU/ml). Hence, the aims of this study were (a) to determine ability to adhere to and internalize into epithelial cells MAC-T for 1, 2 and 3 h, (b) to evaluate the relative expression of adherence-associated genes from co-cultures of S. uberis with MAC-T cells at 1, 2 and 3 h. We hypothesized that upon contact with bovine mammary epithelial cells, S. uberis upregulates adherence-associated genes encoding adhesins, which enable it a higher adherence to and/or internalization into host cells. Four to six genes increased their R with regard to the control after initial contact with MAC-T cells (group 1) at 1, 2 and 3 h. The highest value of R was observed at 2 h after co-culture between RC19 and MAC-T cells.Fil: Fessia, Alumine Soledad. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Odierno, Liliana Mónica. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

In vitro studies of biofilm-forming Bacillus strains, biocontrol agents isolated from the maize phyllosphere

We aimed to assess how biofilm formation by three Bacillus isolates was affected by changes in temperature, water potential, growth media, time, and the combinations between these factors. The strains had been selected as potential biological control agents (BCAs) in earlier studies, and they were identified as B. subtilis and B. velezensis spp. through 16 rRNA sequencing and MALDI-TOF MS. Maize leaves (ML) were used as one of the growth media, since they made it possible to simulate the nutrient content in the maize phyllosphere, from which the bacteria were originally isolated. The strains were able to form biofilm both in ML and biofilm-inducing MSgg after 24, 48, and 72 h. Biofilm development in the form of pellicles and architecturally complex colonies varied morphologically from one strain to another and depended on the conditions mentioned above. In all cases, colonies and pellicles were less complex when both temperature and water potential were lower. Scanning electron microscopy (SEM) revealed that changing levels of complexity in pellicles were correlated with those in colonies. Statistical analyses found that the quantification of biofilm produced by the isolates was influenced by all the conditions tested. In terms of motility (which may contribute to biofilm formation), swimming and swarming were possible for all strains in 0.3 and 0.7% agar, respectively. A more in-depth understanding of how abiotic factors influence biofilm formation can contribute to a more effective use of these biocontrol strains against pathogens in the maize phyllosphere.Fil: Fessia, Alumine Soledad. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Sartori, Melina Victoria. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: García, Daiana. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Física; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Fernandez, Luciana Andrea. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones en Tecnologías Energéticas y Materiales Avanzados. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Tecnologías Energéticas y Materiales Avanzados; ArgentinaFil: Ponzio, Rodrigo Andrés. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones en Tecnologías Energéticas y Materiales Avanzados. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Tecnologías Energéticas y Materiales Avanzados; Argentina. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Física; ArgentinaFil: Barros, Germán Gustavo. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Nesci, Andrea Verónica. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentin

Studies on possible modes of action and tolerance to environmental stress conditions of different biocontrol agents of foliar diseases in maize

The present study evaluates the possible modes of action of antagonistic bacteria and their tolerance to UV radiation, temperature and osmotic stress. The partial 16S-23S rRNA gene sequencing of eight antagonistic bacteria had a high match with three bacterial genera: Curtobacterium, Pantoea and Bacillus. In this study, the three Bacillus isolates showed the most relevant production of enzymes, volatile organic compounds and antibiosis against Exserohilum turcicum. Respect to UV radiation and temperature Pantoea and Bacillus isolates were more tolerant; whereas the eight isolates were tolerant to osmotic stress in varying degree. The three Bacillus isolates have the greatest potential as biocontrol agents for foliar diseases in maize. The antagonistic action could be explained through different modes of action such as enzymes, volatile organic compounds and/or direct antibiosis by other secondary metabolites. Bacillus isolates tolerance to environmental stresses including UV radiation, temperature and osmotic stress is relevant for survival and persistence on the leaf surface. This work provides new information about the mode of action of antagonistic bacteria with proven efficacy against maize leaf pathogens. In addition, it provides information about the tolerance of antagonistic bacteria against different stress conditions. The data of the present study could contribute to the development of a successful foliar biofungicide.Fil: Sartori, Melina Victoria. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Bonacci, Martin Miguel. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Barra, Paula Sabina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Fessia, Alumine Soledad. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Etcheverry, Miriam Graciela. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Nesci, Andrea Verónica. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Barros, Germán Gustavo. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentin

Streptococcus uberis: Identicación y producción de biofilm

Streptococcus uberis es el principal patógeno estreptocóccico ambiental responsable deuna elevada proporción de mastitis clínicas (MC) y subclínicas (MSC). Los biofilms sonresponsables de infecciones persistentes dado que las bacterias en el interior del biofilm(BF) están protegidas de la respuesta inmune del hospedador y de los antibióticos.Debido a que existe limitada información sobre la producción de BF en S. uberis, elobjetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la adición de diferentes suplementos almedio de cultivo sobre la producción in vitro de biofilm en 32 aislamientos de S. uberisobtenidos 17 tambos de la cuenca central de Argentina. Primeramente se realizó, laidentificación a nivel de especie de cada aislado según la metodología recomendadapara patógenos asociados a mastitis. Inicialmente, cada aislamiento fue examinado porsu respuesta a la tinción de Gram y prueba de catalasa. Las colonias de cocos Grampositivos en cadenas, y que resultaron catalasa negativos fueron identificadas a nivel deespecie en base a las pruebas bioquímicas de hidrólisis de hipurato, hidrólisis deesculina, crecimiento en cloruro de sodio 6.5% y crecimiento en bilis. La identificaciónmorfológica y bioquímica fue confirmada molecularmente por la amplificación del genpauA. Se observó una banda de aproximadamente 723 pb, correspondiente al amplicónpauA en 32 de los 34 aislamientos de S. uberis. Para investigar la producción de biofilmy cómo la misma es influenciada por el agregado de diferentes suplementos, losaislamientos fueron cultivados en caldo con glucosa 0.5%, sacarosa 1%, lactosa 1% oleche 0.5%, en placas de microtitulación. Los aislamientos fueron clasificados comofuerte, moderados, o débilmente productores de BF. Los resultados mostraron que lamayoría de S. uberis exhibe una moderada o débil producción de biofilm en cadacondición ensayada. Se observó además que la capacidad de producción de BF esmayor cuando el medio de cultivo TSB* es suplementado con glucosa 0.5 % o sacarosa1%; conjuntamente se observó que la producción de biofilm es dependiente de cadaaislamiento. La adherencia directa de la bacteria al tejido epitelial de la glándulamamaria es el paso más importante en la patogénesis de S. uberis y es el primer pasoen la formación de BF. Recientemente, se ha informado la capacidad de colonizar elepitelio de la glándula y establecer infecciones persistentes por S. uberis productoresde biofilm. Un conocimiento más profundo del posible rol del BF en la patogénesis de lamastitis bovina podría contribuir al diseño de nuevos inmunógenos tendientes a mejorarla condición sanitaria de los rodeos lecheros en los cuales predomine S. uberis.Fil: Fessia, Alumine Soledad. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dieser, Silvana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

Potential factors involved in the early pathogenesis of Streptococcus uberis mastitis: a review

Bovine mastitis is an inflammation of the mammary gland, which could be the result of allergy, physical trauma, or invasion by pathogens as Streptococcus uberis. This pathogen is an environmental pathogen associated with subclinical and clinical intramammary infection (IMI) in both lactating and non-lactating cows, which can persist in the udder and cause a chronic infection in the mammary gland. In spite of the important economic losses and increased prevalence caused by S. uberis mastitis, virulence factors involved in bacterial colonization of mammary glands and the pathogenic mechanisms are not yet clear. In the last 30 years, several studies have defined adherence and internalization of S. uberis as the early stages in IMI. S. uberis adheres to and invades into mammary gland cells, and this ability has been observed in in vitro assays. Until now, these abilities have not been determined in vivo challenges since they have been difficult to study. Bacterial surface proteins are able to bind to extracellular matrix protein components such as fibronectin, collagen and laminin, as well as proteins in milk. These proteins play a role in adhesion to host cells and have been denominated microbial surface components recognizing adhesive matrix molecules (MSCRAMMs). This article aims to summarize our current knowledge on the most relevant properties of the potential factors involved in the early pathogenesis of S. uberis mastitis.Fil: Fessia, Alumine Soledad. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Odierno, Liliana Mónica. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

Identificación de Streptococcus uberis aislados de muestras de leche bovina

La mastitis es una enfermedad multifactorial originada por interacción entre el agente etiológico, el hospedador y el medio ambiente, ocasionando grandes pérdidas económicas. Streptococcus uberis es el principal patógeno estreptocóccico ambiental responsable de mastitis clínicas y subclínicas. Los métodos precisos y rentables para identificar los patógenos de la mastitis son importantes para el diagnóstico, la vigilancia y el control de esta enfermedad. El objetivo de este trabajo fue realizar una identificación preliminar de aislamientos de Strep. uberis basada en 4 pruebas bioquímicas y su posterior confirmación mediante la detección del gen pauA, utilizando la técnica de espectrometría de masas (MALDI-TOF) como prueba de oro. Las colonias de cocos Gram positivos en cadenas, catalasa negativos fueron identificadas Strep. uberis mediante MALDI-TOF. Todos los aislamientos fueron identificados presuntivamente como Strep. uberis en base a las pruebas bioquímicas de hidrólisis de hipurato, hidrólisis de esculina, crecimiento en cloruro de sodio 6,5% y en bilis. Posteriormente, se amplificó el gen pauA en los aislamientos para confirmar la pertenencia a la especie, detectando en 32 de los 34 (94,11%) aislamientos la presencia del amplicón del gen pauA. Los resultados del presente estudio demuestran que la combinación de cuatro pruebas convencionales para realizar una identificación preliminar y su confirmación mediante la amplificación del gen pauA mediante PCR permiten la identificación de Streptococcus uberis aislados de leche de casos de mastitis bovina.Fil: Fessia, Alumine Soledad. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dieser, Silvana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Odierno, Liliana Mónica. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

Genotyping and study of adherence-related genes of Streptococcus uberis isolates from bovine mastitis

The aim of this study was to determine the presence, conservation, and distribution of 6 potential adherence genes and their relationship with diverse molecular types in 34 S. uberis isolated from bovine mastitis in Argentina. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) typing with SmaI was performed. The PCR for the detection of each gene, scpA, acdA, fbp, lbp, lmb, and sua was standardized. Samples of the amplification products were purified and sequenced. The PFGE patterns revealed the high level of heterogeneity of S. uberis, with 26 types of PFGE patterns. A high prevalence of scpA, fbp, lbp, lmb and acdA genes (100%?97%) was detected, whereas 79.41% of S. uberis harbored the sua gene. A high degree of similarity in the nucleotide and amino acid sequences of the 6 genes was observed. Our results showed that all genes are conserved and are present in most S. uberis isolates despite the wide clonal heterogeneity detected. This is the first study reporting an analysis of prevalence, and nucleotides and amino acids sequences of the potential adherence genes scpA, acdA, fbp, lbp, and lmb from S. uberis strains versus reported GenBank sequences, S. uberis 0140J and S. uberis NZ01.Fil: Fessia, Alumine Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Dieser, Silvana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Raspanti, Claudia Gabriela. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Odierno, Liliana Mónica. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

Relative expression of genes associated with adhesion to bovine mammary epithelial cells by Streptococcus uberis

Streptococcus uberis is one of the most prevalent environmental pathogens of bovine mastitis. Biofilm growth ability by S. uberis looks to depend first upon the adherence of cells to a surface. The S. uberis ability to adhere to mammary gland epithelia might provide an advantage to colonize the lactating mammary gland. The objectives of this study were (a) to select S.uberis strains according to their ability to form biofilm, (b) to determine adherence to and internalization into MAC-T cells and (c) to investigate the expression profile adherence genes in these S. uberis strains. For the assays, the MAC-T bovine mammary epithelial cell line was used. Relative expression of genes acdA, lmb, scpA, sua, fbp and lbp was quantified by RT-qPCR. We observed that the RC38 strain from clinical bovine mastitis showed in the six genes higher values than control in both conditions. While the strain with greater ability to adhere, from clinical mastitis and biofilm producer (RC29) evidenced higher values in group 1 (G1) (bacteria after the initial contact with MAC-T cells) and decrease in group 2 (G2) (both adhered and internalized bacteria) than control. Strains with a moderate or strong capacity for biofilm production showed significantly lower relative expression values in the G2. In all adherence associated genes, strain RC19 showed relative expression values incremented in G1, while in G2 decreased expression. In conclusion, we did not find a single profile of relative expression because the relative expression levels of each gene differed depending on the strain and the co-culture stage of S. uberis cells from which RNA was obtained.Fil: Fessia, Alumine Soledad. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dieser, Silvana Andrea. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Renna, Maria Sol. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Raspanti, Claudia Gabriela. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Odierno, Liliana Mónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Streptococcus uberis: producción in vitro de biofilm en respuesta a carbohidratos y leche descremada

Streptococcus uberis es uno de los más importantes patógenos medioambientales asociados a la mastitis bovina clínica y subclínica. El biofilm confiere a las bacterias resistencia a agentes físicos y químicos, como así también a diferentes mecanismos del sistema inmune innato. El objetivo del presente estudio fue evaluar la habilidad de producción de biofilm in vitro de 32 aislamientos de S. uberis recuperados de mastitis bovina, previamente identificados por pruebas bioquímicas y confirmados por la amplificación del gen pauA. Los aislamientos fueron cultivados en caldo TMP sin carbohidratos, y además en caldo TMP con la adición de 0,5% de glucosa, 1% de sacarosa, 1% de lactosa o 0,5% de leche descremada, en placas de microtitulación teñidas con cristal violeta. Se demostró que dichos aislamientos son capaces de producir biofilm en caldo TMP, y además se observó un incremento significativo en la producción de biofilm en caldo TMP suplementado con 0,5% de glucosa o con 1% de sacarosa. Así, los carbohidratos de la leche o los presentes dentro del intestino de los rumiantes podrían afectar el modo de crecimiento de S. uberis. Además, nuestros hallazgos mostraron que la producción de biofilm in vitro en diferentes condiciones de suplementación presenta variabilidad entre los aislamientos de S. uberis y que cada aislamiento muestra un perfil particular de producción de biofilm. Esta heterogeneidad fenotípica en la producción de biofilm de S. uberis podría explicar, al menos en parte, por qué esta bacteria tiene la habilidad de adaptarse a diferentes nichos, lo que le facilita la supervivencia frente a condiciones diversas y estresantes.Streptococcus uberis has become one of the most important environmental pathogens associated with clinical and subclinical bovine mastitis. Biofilm confers to bacteria more resistance to physical and chemical agents as well as to different mechanisms of the innate immune system. The aim of this work was to evaluate the ability of in vitro biofilm production in 32 S. uberis isolates from bovine mastitis and identified by biochemical tests and subsequently confirmed by the amplification of the pauA gene. The isolates were cultivated in TMP broth and TMP broth with the addition of 0.5% glucose, 1% sucrose, 1% lactose or 0.5% skim milk in microtiter plates stained with crystal violet. We demonstrated that S. uberis isolated from bovine mastitis are able to produce biofilms in TMP broth and, also that biofilm formation by S. uberis can be significantly enhanced by the addition of 0.5% glucose or 1% sucrose to TMP broth. This may suggest that the carbohydrates in milk or within the ruminant gut might affect the growth mode of S. uberis. In addition, our results showed that in vitro biofilm production under different conditions of supplementation displays variation among the isolates and that each isolate shows a particular profile of biofilm production. This phenotypic heterogeneity in biofilm production exhibited by S. uberis could at least partly explain why this bacterium has the ability to adapt to different niches facilitating survival to diverse and stressful conditions.Fil: Dieser, Silvana Andrea. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fessia, Alumine Soledad. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ferrari, Miriam P.. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ingeniería; ArgentinaFil: Raspanti, Claudia Gabriela. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Odierno, Liliana Mónica. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

Fibronectin and laminin induce biofilm formation by Streptococcus uberis and decrease its penicillin susceptibility

The aim of this study was to determine the effect of fibronectin and laminin on the in vitro biofilm formation byStreptococcus uberis and the susceptibility to penicillin under planktonic and biofilm growth conditions. Weobserved that a high percentage (76.5%) of the S. uberis isolates was weak biofilm producers in Todd HewittBroth (THB). A high percentage of moderate (38.2%) or strong (53%) biofilm producers was observed in THBsupplemented with laminin or fibronectin, respectively. All S. uberis isolates growing as planktonic cells weresensitive to penicillin. Minimum biofilm inhibitory concentrations (MBICs) were ranging between 0.25 and 2 μg/ml, whereas minimum biofilm eradication concentrations (MBECs) ranging from 8 to 256 μg/ml. These resultsshow that biofilm-growing S. uberis cells required higher concentrations of the antibiotic than those needed toinhibit planktonic cells. Similar MBICs of penicillin were obtained when S. uberis cells growing in THB supplementedor not with laminin or fibronectin, whereas the MBECs markedly increased when one of two proteinswere added to culture medium compared with the medium without proteins. To the best of our knowledge, thisis the first report of decreased susceptibility to penicillin likely related to a higher production of biofilms stimulatedby laminin or fibronectin. Therapeutic failures of penicillin to treat S. uberis infections may be due tobiofilm formation.Fil: Dieser, Silvana Andrea. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fessia, Alumine Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Zanotti, Anabella del Rosario. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Raspanti, Claudia Gabriela. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Odierno, Liliana Mónica. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin