In vitro differentiation of mesenchimal stem cells of dogs into osteogenic precursors

O objetivo principal da nossa pesquisa foi avaliar o potencial de diferenciação osteogênica de células-tronco mesenquimais (MSC) obtidas da medula óssea do cão. As MSC foram separadas pelo método Ficoll e cultivadas sob duas condições distintas: DMEM baixa glicose ou DMEM/F12, ambos contendo L-glutamina, 20% de SFB e antibióticos. Marcadores de MSC foram testados, confirmando células CD44+ e CD34- através da citometria de fluxo. Para a diferenciação osteogênica, as células foram submetidas a quatro diferentes condições: Grupo 1, as mesmas condições utilizadas para a cultura de células primárias com os meios DMEM baixa glicose suplementado; Grupo 2, as mesmas condições do Grupo 1, mais os indutores de diferenciação dexametasona, ácido ascórbico e b-glicerolfosfato; Grupo 3, células cultivadas com meios DMEM/F12 suplementado; e Grupo 4, nas mesmas condições que no Grupo 3, mais indutores de diferenciação de dexametasona, ácido ascórbico e b-glicerolfosfato. A diferenciação celular foi confirmada através da coloração com alizarin red e da imunomarcação com o anticorpo SP7/Osterix. Nós observamos através da coloração com alizarin red que o depósito de cálcio foi mais evidente nas células cultivadas em DMEM/F12. Além disso, usando a imunomarcação com o anticorpo SP/7Osterix obtivemos positividade em 1:6 células para o Meio DMEM/F12 comparada com 1:12 para o meio DMEM-baixa glicose. Com base nos nossos resultados concluímos que o meio DMEM/F12 é mais eficiente para a indução da diferenciação de células-tronco mesenquimais caninas em promotores osteogênicos. Este efeito provavelmente ocorre em decorrência da maior quantidade de glicose neste meio, bem como da presença de diversos aminoácidos.The aim of our research was to evaluate the potential for osteogenic differentiation of mesenchimal stem cells (MSC) obtained from dog bone marrow. The MSC were separated using the Ficoll method and cultured under two different conditions: DMEM low glucose or DMEM/F12, both containing L-glutamine, 20% of FBS and antibiotics. MSC markers were tested, confirming CD44+ and CD34- cells with flow cytometry. For osteogenic differentiation, cells were submitted to four different conditions: Group 1, same conditions used for primary cell culture with DMEM supplemented media; Group 2, same conditions of Group 1 plus differentiation inductors Dexametazone, ascorbic acid and β-glicerolphosphate. Group 3, Cells cultured with supplemented DMEM/F12 media, and Group 4, same conditions as in Group 3 plus differentiation inductors Dexametazone, ascorbic acid and β-glicerolphosphate. The cellular differentiation was confirmed using alizarin red and imunostaining with SP7/Osterix antibody. We observed by alizarin staining that calcium deposit was more evident in cells cultivated in DMEM/F12.Furthermore, by SP/7Osterix antibody immunostaining we obtained 1:6 positive cells when using DMEM/F12 compared with 1:12 for low-glucose DMEM. Based on our results, we conclude that the medium DMEM/F12 is more efficient for induction of differentiation of mesenchymal stem cells in canine osteogenic progenitors. This effect is probably due to the greater amount of glucose in the medium and the presence of various amino acids

Os benefícios do ensino de bateria a alunos de percussão do curso básico: perspetiva dos professores e alunos dos conservatórios do Algarve

Relatório Final do Estágio do Ensino Especializado, apresentado à Escola Superior de Música de Lisboa, do Instituto Politécnico de Lisboa, para cumprimento dos requisitos à obtenção do grau de Mestre em Ensino de Música, conforme Decreto-Lei n.º 79/2014, de 14 de maio.Resumo I - A primeira parte do trabalho é dedicada à realização do relatório, referente à unidade curricular Estágio do Ensino Especializado realizado no âmbito do Mestrado em Ensino de Música da Escola Superior de Música de Lisboa. O estágio foi realizado na Academia de Música de Portimão, no ano letivo de 2019/2020, em regime de exercício, sob a orientação de um professor orientador institucional e de um professor orientador cooperante. Para a realização do estágio foram escolhidos três alunos de diferentes níveis de ensino: um aluno de iniciação, um aluno de 3º grau e um aluno de 5º grau. O presente relatório começa por fazer uma caracterização da escola cooperante onde foi realizado o estágio, referindo aspetos relevantes como o seu funcionamento e organização, princípios orientadores, oferta educativa e descrição da comunidade. De seguida são apresentadas as práticas educativas desenvolvidas ao longo do estágio, desde a caracterização da classe de percussão, caracterização dos alunos selecionados para a concretização do estágio e uma breve descrição das aulas lecionadas e atividades extracurriculares desenvolvidas durante o ano letivo. Por fim, é feita uma reflexão final sobre a prática docente e a experiência na escola cooperante, os objetivos do estágio, eventuais dificuldades sentidas durante a sua realização ao longo do ano letivo e filosofia de ensino.Resumo II - A segunda parte do relatório é destinada ao Projeto de Investigação com a temática “Os Benefícios do Ensino de Bateria a Alunos de Percussão do Curso Básico – Perspetiva dos Alunos e Professores dos Conservatórios do Algarve”. Este estudo teve como objetivo analisar se o ensino da bateria poderá trazer vários benefícios no desenvolvimento da coordenação motora, da consciência corporal e da motivação dos alunos do curso básico de percussão. Na revisão da literatura é apresentada uma breve descrição e contextualização da bateria e são abordados conceitos relevantes, tais como: coordenação motora, consciência corporal, psicomotricidade e motivação. A investigação começou pela realização de entrevistas semiestruturadas, com uma amostra composta por 4 professores de percussão com experiência de ensino nos conservatórios do Algarve, onde foi discutido até que ponto e de que forma o ensino da bateria deve ser abordado nas aulas de percussão. Posteriormente, foram realizados questionários a alunos do curso básico de percussão dos conservatórios do Algarve, com uma amostra de 41 alunos, com o objetivo de apurar o impacto do ensino da bateria como estratégia de motivação. Os resultados revelaram que a maioria dos professores entrevistados considera importante incluir o ensino da bateria nas aulas de percussão, por entenderem que a aprendizagem deste instrumento promove o desenvolvimento da coordenação motora, da consciência corporal, do sentido de pulsação e da motivação. Porém, verificou-se nos questionários realizados aos alunos, que o ensino da bateria ainda é incluído nas suas aulas de uma forma irregular e também carece de uma melhor estruturação. Palavras-N/