Estudo do efeito antiproliferativo e pró-apoptótico do látex de Croton celtidifolius Baill

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2011Apesar de todos os recursos existentes na atualidade para o tratamento do câncer uma diversidade de problemas é observada tanto em relação à eficácia dos medicamentos e/ou sua resistência quanto à gama de efeitos colaterais que podem ser induzidos pelos mesmos. Na tentativa de aprimorar a terapia antitumoral novos agentes antineoplásicos de origem natural têm sido buscados visto que a maior parte dos medicamentos existentes é proveniente de plantas medicinais. Croton celtidifolius pertencente à família Euphorbiaceae, composta por diversas plantas que possuem atividade antitumoral, é uma planta promissora uma vez que é utilizada popularmente com esta finalidade. O presente estudo propôs avaliar a atividade citotóxica, nucleásica e pró-apoptótica, in vitro, e a atividade antitumoral e antiangiogênica, in vivo, do látex de C. celtidifolius. As análises espectrofotométricas do látex bruto permitiram a identificação de um alto conteúdo de fenóis totais (18,54 g/L), enquanto que as análises cromatográficas (CLAE) permitiram a detecção de compostos fenólicos como flavonóis (miricetina, quercetina e campferol) e flavan-3-óis (catequina, epicatequina, galocatequina e epigalocatequina). No ensaio do MTT, para a avaliação da citotoxicidade, a CI50 encontrada para as células de Ehrlich e MCF-7 foram 169 ± 1,8 e 187 ± 2,2 µg/mL, respectivamente. Além disso, foi possível observar uma redução dose-dependente significativa na viabilidade celular. A coloração diferencial com brometo de etídio (BE) / laranja de acridina (LA) demonstrou o predomínio da indução de morte celular por apoptose que pode possivelmente ser explicada através dos resultados obtidos no ensaio de atividade nucleásica onde o látex foi capaz de causar quebras simples e dupla no DNA plasmidial submetido ao tratamento. Adicionalmente os experimentos realizados com os animais portadores do tumor ascítico de Ehrlich (TAE) demonstraram que o látex de C. celtidifolius foi capaz de inibir o crescimento tumoral ao reduzir o peso dos animais, o volume de tumor, a quantidade de células compactadas e a proporção de células/volume de tumor. A inibição tumoral observada para o látex (La1: 0,78; La2: 1,56 e La3: 3,25 mg/kg) foi 26; 32 e 54%. O dado mais relevante neste ensaio foi o aumento dose-dependente no tempo médio de sobrevida (TMS) (CN: 13; La1: 15,5; La2: 16 e La3: 17,5 dias) e no percentual de aumento de longevidade (PAL) (CN: 0,00; La1: 19,23; La2: 23,08 e La3: 34,61%). Além disso, também foi relatado o efeito antiangiogênico do látex (0,5; 1,0; 1,5 e 2,0 mg/disco) uma vez que este foi capaz de provocar redução na porcentagem de vasos sanguíneos (41; 56; 66 e 75%) observados no ensaio da membrana corioalantóica (CAM). O látex não provocou toxicidade ao embrião uma vez que não foi capaz de alterar a sua morfogênese. Assim, conclui-se que C. celtidifolius apresenta efeitos citotóxico, nucleásico e pró-apoptótico inter-relacionados; e ainda, potencial efeito antitumoral e antiangiogênico.Despite all the resources at this time for cancer treatment is a diversity of problems observed regarding the efficacy of drugs and/or its resistance as well as the side effects that can be induced by them. In an attempt to improve antitumor therapy new antineoplastic agents from natural sources has been sought since the majority of existing drugs is derived from medicinal plants. Croton celtidifolius belonging to the family Euphorbiaceae, comprising several plants that have antitumor activity, is a primising plant since it is popularly use for this pourpose. The present study was to evaluate the citotoxic, nucleasic and pro-apoptotic activities in vitro, and antitumor and antiangiogenic activities in vivo from the latex of C. celtidifolius. The spectrofotometric analysis of crude latex allowed the identification of a hight content of total phenols (18.54 g/L), while chromatography (HPLC) allowed the detection of phenolic compounds such as flavonols (myricitin, quercetin and kaempferol) and flavan-3-ols (catechin, epicatechin, gallocatechin and epigallocatechin). In the MTT assay, for the evaluation of citotoxicity, the IC50 observed for the Ehrlich and MCF-7 cells were 169 ± 1.8 e 187 ± 2.2 µg/mL, respectively. Furthermore we observed a significant dose-dependent reduction in cell viability. The differential staining with ethidium bromide (BE) / acridin orange (LA) showed the predominance of the induction of apoptotic cell death that can possibly be explained from the tests results of nucleasic activity where latex was able to induced simple and double breaks on treated plasmidal DNA. In addition the experiments with animals carrying the Ehrlich ascitic tumor (TAE) showed that the latex of C. celtidifolius was able to inhibit tumor growth by reducing the weigth of the animals, tumor volum, the amount of packed cells and the proportion of cells / tumor volum. The tumor inhibition observed for the latex (La1: 0.78; La2: 1.56 and La3: 3.25 mg/kg) was 26; 32 and 54%. The most relevant data from this trial was a dose-dependent increase in mean survival time (TMS) (CN: 13; La1: 15.5; La2: 16 e La3: 17.5 dias) and the increase in the percentage of longevity (PAL) (CN: 0.00; La1: 19.23; La2: 23.08 and La3: 34.61%). Furthermore, was showed the antiangiogenic effect of the latex (0.5; 1.0; 1.5 e 2.0 mg/disc) since it was capable of causing reduction in the percentage of blood vessels (41; 56; 66 and 75%) observed in the chorioallantoic membrane assay (CAM). The latex caused no toxicity to the embryo as it was unable to alter its morphogenesis. Thus, it appears that C. celtidifolius latex presents citotoxic, nucleasic and pro-apoptotic effects interrelated and also potential antiangiogenic and antitumor effects

Asma brônquica: uma revisão de literatura

Como a asma é epidemiologicamente uma das doenças crônicas mais prevalentes no mundo, majoritariamente em crianças e adultos, e causa 250.000 mortes anualmente, é válido dar enfoque a seus subtópicos relativos. A asma brônquica é uma moléstia inflamatória crônica não transmissível,  cuja etiologia é multifatorial e predominantemente relativa à genética e ao ambiente. É causadora de diversas manifestações clínicas de múltiplas intensidades, e apresenta múltiplos fatores de risco que abrangem aspectos dietéticos, genéticos e ambientais. Seu tratamento envolve métodos farmacológicos e não farmacológicos, e seu diagnóstico é majoritariamente clínico, além de envolver testes de função pulmonar

Câncer de colo de útero / Cervical Cancer

O câncer de colo de útero é um problema de saúde pública que acomete inúmeras mulheres em todo o mundo e sua etiologia e patogenia estão intrinsecamente ligadas ao HPV, uma IST viral que, dependendo de seus subtipos, lesiona as células do cérvix uterino e a longo prazo induz a formação de neoplasias. O êxito quanto ao tratamento e a procura por um bom prognóstico da doença está relacionado ao tempo de instalação do câncer até a sua descoberta, pois quanto mais precoce for a identificação do problema, melhores, mais efetivas e eficazes são as alternativas de tratamento. Contudo, o acesso à saúde é uma questão difícil para muitos grupos femininos,fator que interfere negativamente no número de diagnósticos precoces e na cura que se torna cada vez mais remota à medida que o câncer evolui

Câncer gástrico: Revisão de literatura / Gastric Cancer: A Literature Review

A maioria dos tumores gástricos são adenocarcinomas, uma das neoplasias mais fatais do mundo. Comumente, os pacientes postergam a procura por ajuda para quando os sintomas estão mais evidentes. Sendo esse um dos principais motivos da alta taxa de mortalidade, a busca de assistência médica durante os estágios mais avançados da doença. Não há sintomas específicos do câncer de estômago. Porém, alguns sinais, como perda de peso e de apetite, fadiga, sensação de estômago cheio, vômitos, náuseas e desconforto abdominal persistente podem indicar tanto uma doença benigna (úlcera, gastrite, etc.) como um tumor de estômago. É fundamental uma dieta balanceada composta de vegetais crus, frutas cítricas e alimentos ricos em fibras. Além disso, é importante o combate ao tabagismo e a diminuição da ingestão de bebidas alcoólicas.Tais medidas são de caráter profilático para tal carcinoma supracitado

Tuberculose: Uma revisão de literatura / Tuberculosis: A Literature Review

A tuberculose é uma das maiores causas de morte em todo mundo. Todos os anos cerca de seis milhões de novos casos de tuberculose são notificados no mundo, e 69.000 novos casos e 4.500 óbitos são notificados no Brasil. A tuberculose é uma doença infecciosa transmissível, cujo agente etiológico é o Mycobacterium tuberculosis. Quando inalado, este bacilo é fagocitado por macrófagos alveolares, desencadeando uma resposta inflamatória. A característica histopatológica da tuberculose é o granuloma. Clinicamente, a infecção manifesta-se principalmente por tosse, quando pulmonar, e outros sintomas sistêmicos, em sua forma extrapulmonar. A associação do quadro clínico com exames bacteriológicos de secreções e exames complementares, como a radiografia de tórax, além do uso de testes específicos como o Xpert MTB/RIF, que possibilita a identificação direta do bacilo M. tuberculosis resistente a rifampicina, corroboram em um diagnóstico mais preciso da tuberculose. A tuberculose é uma doença infectocontagiosa tratável, com alto percentual de cura quando realizado tratamento adequado e ininterrupto. No Brasil ocorre por meio da estratégia do Tratamento Diretamente Observado (TDO), disponibilizado pelo SUS, que consiste no monitoramento da ingestão dos fármacos que integram o esquema terapêutico. Os desafios acerca do tratamento permeiam o abandono deste, por motivo que perpassam o contexto de saúde do indivíduo e da saúde coletiva

Sarampo - Uma revisão de literatura / Measles - A review of the literature

O sarampo é uma doença infecto-contagiosa de alta transmissibilidade. É uma doença de notificação compulsória que já foi erradicada do Brasil anteriormente, porém, retornou para o país nos últimos anos. O agente etiológico é o vírus de RNA Measles morbillivirus, e sua transmissão acontece pela via respiratória. Nesse artigo são apresentados a epidemiologia da doença, sua fisiopatologia e manifestações clínicas, diagnóstico, tratamento e profilaxia. O Sarampo é uma doença que está correlacionada a muitas e variáveis complicações, que podem agravar o quadro do paciente. Através de uma revisão de literatura científica, foram utilizados 11 artigos para a produção deste artigo, com buscas nas bases de dados Lilacs e Scielo

Robust estimation of bacterial cell count from optical density

Optical density (OD) is widely used to estimate the density of cells in liquid culture, but cannot be compared between instruments without a standardized calibration protocol and is challenging to relate to actual cell count. We address this with an interlaboratory study comparing three simple, low-cost, and highly accessible OD calibration protocols across 244 laboratories, applied to eight strains of constitutive GFP-expressing E. coli. Based on our results, we recommend calibrating OD to estimated cell count using serial dilution of silica microspheres, which produces highly precise calibration (95.5% of residuals <1.2-fold), is easily assessed for quality control, also assesses instrument effective linear range, and can be combined with fluorescence calibration to obtain units of Molecules of Equivalent Fluorescein (MEFL) per cell, allowing direct comparison and data fusion with flow cytometry measurements: in our study, fluorescence per cell measurements showed only a 1.07-fold mean difference between plate reader and flow cytometry data

Uso racional de medicamentos: relato de experiência no ensino médico da Unesc, Criciúma/SC

O presente estudo objetivou disseminar entre os alunos do curso de Medicina da Unesc a lógica do Uso Racional de Medicamentos e suas aplicações na prática médica. Utilizou-se como modelo o curso de formação sobre Uso Racional de Medicamentos promovido pela OMS, por meio do método didático-pedagógico da aprendizagem baseada em problemas, a mesma concepção utilizada pelo curso de Medicina da Unesc. Com apoio e financiamento da Diretoria de Pesquisa e da Diretoria de Extensão e Ação Comunitária (Unesc), o trabalho foi desenvolvido a partir de duas vertentes: a primeira visou capacitar acadêmicos do curso de Medicina na lógica do Uso Racional de Medicamentos; a segunda vertente objetivou desenvolver ações educativas na comunidade dos bairros adjacentes à universidade, envolvendo temas como Uso Racional de Medicamentos. Foram capacitados 35 alunos e realizadas intervenções na comunidade que abrangeram 689 pessoas. Os acadêmicos envolvidos neste trabalho passaram a visualizar a prescrição de medicamentos de forma mais racional e ainda adquiriram a noção da importância de priorizar uma lista de medicamentos essenciais, tendo como base condutas pautadas nas melhores evidências disponíveis