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    <strong>Uso da bioinformática na diferenciação molecular da <em>Entamoeba histolytica</em> e <em>Entamoeba díspar</em></strong> - DOI: 10.4025/actascihealthsci.v30i2.2375 <b>Molecular discrimination of <em>Entamoeba histolytica</em> and <em>Entamoeba dispar</em> by bioinformatics resources</b> - DOI: 10.4025/actascihealthsci.v30i2.2375

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    Amebíase invasiva, causada por <em>Entamoeba histolytica</em>, é microscopicamente indistinguível da espécie não-patogênica <em>Entamoeba dispar</em>. Com auxílio de ferramentas de bioinformática, objetivou-se diferenciar <em>Entamoeba histolytica</em> e <em>Entamoeba dispar</em> por técnicas moleculares. A análise foi realizada a partir do banco de dados da <em>National Center for Biotechnology Information</em>; pela pesquisa de similaridade de sequências, elegeu-se o gene da cisteína sintase. Um par de <em>primer</em> foi desenhado (programa <em>Web Primer</em>) e foi selecionada a enzima de restrição <em>TaqI</em> (programa <em>Web Cutter</em>). Após a atuação da enzima, o fragmento foi dividido em dois, um com 255 pb e outro com 554 pb, padrão característico da <em>E. histolytica</em>. Na ausência de corte, o fragmento apresentou o tamanho de 809 pb, referente à <em>E. dispar</em>.<br>Under microscopic conditions, the invasive <em>Entamoeba histolytica</em> is indistinguishable from the non-pathogenic species <em>Entamoeba dispar</em>. In this way, the present study was carried out to determine a molecular strategy for discriminating both species by the mechanisms of bioinformatics. The gene cysteine synthetase was considered for such a purpose by using the resources of the National Center for Biotechnology Information data bank in the search for similarities in the gene sequence. In this way, a primer pair was designed by the Web Primer program and the restriction enzyme TaqI was selected by the Web Cutter software program. The DNA fragment had a size of 809 bp before cutting, which is consistent with <em>E. dispar</em>. The gene fragment was partitioned in a first fragment with 255 bp and a second one with 554 bp, which is similar to the genetic characteristics of <em>E. histolytica</em>

    <b>Método não-invasivo na obtenção de DNA de búfalos</b> - DOI: 10.4025/actascianimsci.v30i4.4839 <b>Non-invasive method for buffalo DNA extraction</b> - DOI: 10.4025/actascianimsci.v30i4.4839

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    O objetivo do trabalho foi comparar dois diferentes protocolos de extração de DNA de pelos de búfalos (<em>Bubalus bubalis</em>) e comparar três regiões de coleta de material (nuca, paleta direita e testa). Foram utilizados quatro búfalos com três repetições por animal e por região. No protocolo 1, foi utilizada a técnica do fenol-clorofórmio e no protocolo 2, a técnica de extração com CTAB. O protocolo 2 apresentou maior média de concentração de DNA para as amostras de pelos. Em relação ao local de retirada dos pelos, não foram encontradas diferenças significativas, porém nota-se que a região da testa dos animais apresentou maior concentração de DNA quando extraído com CTAB. Com relação à praticidade de utilização dos dois métodos avaliados, o protocolo 2, além de ter apresentado maior concentração de DNA, apresentou menor tempo de execução, 3h 50 min., além de evitar a utilização de mais um reagente tóxico, como é o caso do fenol. Por esse motivo, sugere-se que a coleta seja efetuada na região da testa, levando-se em consideração a praticidade e a acessibilidade aos pelos e sugere-se também a aplicação do protocolo de extração de DNA com CTAB, pela praticidade e pelo menor tempo de execução.<br>The objective of this paper was to compare two different protocols for DNA extraction from buffalo (<em>Bubalus bubalis</em>) fur. Also, three sites for the fur source (back of the head, right shoulder and forehead) were compared. For the experiments, four animals were used and three replicates for each site on each animal were performed. For protocol 1, the phenol chloroform technique was used, and the CTAB extraction technique was used for protocol 2. Protocol 2 resulted in a higher average of DNA concentration for the fur samples. Considering the body region from where the fur was extracted, there were no significant differences in DNA concentration. However, the forehead showed a higher concentration when extracted with CTAB. Considering the ease of use for each protocol, protocol 2, in addition to presenting greater concentrations of DNA, took less time to be performed — three hours and fifty minutes, and did not require another toxic reagent, such as phenol. For this reason, it is recommended that the material be extracted from the forehead, asit is an easy site to access the fur. The recommended protocol for DNA extraction is with CTAB, because of its practicality and lower execution time

    Uso da bioinformática na diferenciação molecular da Entamoeba histolytica e Entamoeba díspar = Molecular discrimination of Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar by bioinformatics resources

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    Amebíase invasiva, causada por Entamoeba histolytica, é microscopicamente indistinguível da espécie não-patogênica Entamoeba dispar. Com auxílio de ferramentas de bioinformática, objetivou-se diferenciar Entamoeba histolytica e Entamoeba dispar por técnicasmoleculares. A análise foi realizada a partir do banco de dados da National Center for Biotechnology Information; pela pesquisa de similaridade de sequências, elegeu-se o gene da cisteína sintase. Um par de primer foi desenhado (programa Web Primer) e foi selecionada a enzima de restrição TaqI (programa Web Cutter). Após a atuação da enzima, o fragmento foi dividido em dois, um com 255 pb e outro com 554 pb, padrão característico da E. histolytica. Na ausência de corte, o fragmento apresentou o tamanho de 809 pb, referente à E. dispar.<br><br>Under microscopic conditions, the invasive Entamoeba histolytica is indistinguishable from the non-pathogenic species Entamoeba dispar. In this way, the present study was carried out to determine a molecular strategy for discriminating both species by the mechanisms of bioinformatics. The gene cysteine synthetase was consideredfor such a purpose by using the resources of the National Center for Biotechnology Information data bank in the search for similarities in the gene sequence. In this way, a primer pair was designed by the Web Primer program and the restriction enzyme TaqI was selected by the Web Cutter software program. The DNA fragment had a size of 809 bpbefore cutting, which is consistent with E. dispar. The gene fragment was partitioned in a first fragment with 255 bp and a second one with 554 bp, which is similar to the genetic characteristics of E. histolytica
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