Απομόνωση, ταυτοποίηση και in vivo αξιολόγηση της επουλωτικής δράσης βιοδραστικών συστατικών από το θαλάσσιο ισόποδο Ceratothoa oestroides

Ο οργανισμός Ceratothoa oestroides ανήκει στην τάξη των Ισοπόδων και πρόκειται για ένα πρωτανδρικό ερμαφρόδιτο παράσιτο σε πολλές οικογένειες ψαριών. Το ολικό οργανικό εκχύλισμα υποβλήθηκε σε υγρή-υγρή εκχύλιση και σειρά χρωματογραφικών διαχωρισμών οδηγώντας στην απομόνωση και στην ταυτοποίηση μέσω ανάλυσης των φασματοσκοπικών τους δεδομένων (NMR, MS) ενός αριθμού μεταβολιτών, κυρίως λιπαρών οξέων και υδατανθράκων. Τα κλάσματα μορφοποιήθηκαν ανάλογα με την πολικότητα τους, είτε σε αλοιφές είτε σε γέλες και η επουλωτική τους δράση αξιολογήθηκε σε φυσιολογικό δέρμα άτριχων μυών τύπου SKH-HR1, στο οποίο είχε προκληθεί έλλειμμα στο πίσω μέρος της ράχης. Την πιο σημαντική επουλωτική δράση εμφάνισε ένα κλάσμα του διχλωρομεθανιακού εκχυλίσματος εμπλουτισμένο σε πολυακόρεστα λιπαρά οξέα, το οποίο έδειξε απουσία φλεγμονής και επιτάχυνση της αναγέννησης των ιστών. Το υδατικό κλάσμα που προέκυψε από τον διαχωρισμό του ολικού εκχυλίσματος, σε συνδυασμό με την βάση της γέλης στην οποία ενσωματώθηκε, έδειξε επίσης σημαντική επουλωτική δράση.Ceratothoa oestroides belongs to the order of Isopoda and is a protandrous hermaphoditic parasite widespread in many fish families. Extraction of C. oestroides specimens with mixtures of CH2Cl2/MeOH, followed by partition and a series of chromatographic separations and spectroscopic analyses (NMR, MS) led to the isolation and structure elucidation of a number of metabolites, mainly fatty acids and carbohydrates. The fractions were formulated according to their polarity either to ointments or gels and their wound-healing potential was evaluated on the normal skin of hairless mice type SKH-hr1, after excision of an 1 cm2 upper back skin area. The most significant wound healing activity was observed for a fraction of the CH2Cl2 extract that was enriched in polyunsaturated fatty acids, showing absence of inflammation and accelerated tissue regeneration. The aqueous fraction resulting from partition of the initial crude extract in combination with the gel base in which it was incorporated also showed important efficacy

In Vivo Evaluation of the Wound Healing Activity of Extracts and Bioactive Constituents of the Marine Isopod Ceratothoa oestroides

Wound healing is a fundamental response to tissue injury and a number of natural products has been found to accelerate the healing process. Herein, we report the preparation of a series of different polarity (organic and aqueous) extracts of the marine isopod Ceratothoa oestroides and the in vivo evaluation of their wound healing activity after topical administration of ointments incorporating the various extracts on wounds inflicted on SKH-hr1 hairless mice. The most active extract was fractionated for enrichment in the bioactive constituents and the fractions were further evaluated for their wound healing activity, while their chemical profiles were analyzed. Wound healing was evaluated by clinical assessment, photo-documentation, histopathological analysis and measurement of biophysical skin parameters, such as transepidermal water loss (TEWL), hydration, elasticity, and skin thickness. The highest levels of activity were exerted by treatment of the wounds with a fraction rich in eicosapentaenoic acid (EPA), as well as myristic and palmitoleic acids. Topical application of the bioactive fraction on the wounds of mice resulted in complete wound closure with a skin of almost normal architecture without any inflammatory elements