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Contribución al conocimiento de la patogenia e inmunología de la enfermedad de Chagas aspectos inmunológicos del mono cebus con infección experimental crónica por tripanosoma cruzi
Estudio de p53 en cáncer de cuello uterino y estatus inmunológico
Las mutaciones en el gen p53 son halladas en diferentes tipos de cáncer. P53 es una proteína supresorade tumores que actúa como factor de transcripción al unirse inespecíficamente al ADN. Dentro de la región rica en prolina emerge un polimorfismo común en el codón 72 generando alelos prolina (P72) o Arginina (A72). Las mujeres homocigotas AA72 poseerían mayor riesgo a desarrollar cáncer cervical por HPV en comparación con las PP72/AP72.El objetivo del proyecto es estudiar la relación entre el polimorfismo p53 y la susceptibilidad a desarrollar cáncer cervical en mujeres con lesiones de bajo y alto grado y cáncer cervical.Se estudiaron 17 muestras (m) CIN I (G2), 17 CIN II/III (G3), 36 carcinomas de cérvix (G4) y 20 controles (G1) de pacientes del Hospital Durand. Se determinó presencia de genoma viral por PCR (MY09/MY11) y del polimorfismo del codón 72 del gen p53 mediante PCR.1 m del grupo control (5%), 12 m CIN I (70,6%), 15 m CIN II/III (88,2%) y 34 m CCI (94,4%) fueron HPV+. Al analizar las muestras sin discriminar por tipo de lesión, se observó una mayor frecuencia del alelo A/A en relación con el alelo A/P y P/P (A/A 51; A/P 21; P/P 9). En el análisis por tipo de lesión, observamos, en general, que ésta tendencia se mantiene (CIN I A/A 7 A/P 2, P/P 0; CIN II/III A/A 10, A/P 1, P/P 4; CCI: A/A 17, A/P 10, P/P 1); grupo control: A/A 11, A/P 6, P/P 3. Al analizar el grado de asociación entre cada grupo y el grupo control los resultados fueron estadísticamente no significativosLas pacientes analizadas mostraron una mayor frecuencia de la variante p53A/A, independiente del tipo de lesión. Esta tendencia se mantuvo al analizar grupos individuales, incluyendo el grupo control.Con los resultados obtenidos se concluye que el polimorfismo en el codón 72 del gen p53 no sería un factor de riesgo en la población analizada
Evaluación de la infección por el Papilomavirus Humano (HPV) en mujeres grávidas: Riesgos de transmisión materno-fetal
Muchos niños desarrollan patologías asociadas al Papilomavirus; aún se desconoce si existe trasmisiónvertical.Se estudiaron 31 pacientes grávidas (4 controles, 27 casos con algún tipo de lesión) y sus neonatos. Se extrajeron biopsia de cérvix, sangre periférica materna, secreciones nasales y bucales neonatales, sangre de cordón umbilical y muestras de placenta lado materno y fetal. Los ácidos nucleicos fueron extraídos por métodos estándar y la disponibilidad de ADN estudiada por amplificacióndel gen GAPDH. La presencia y tipificación de HPV fue realizada mediante PCR con cebadores específicos.De 31 pacientes con lesiones cervicales: 21 presentaron genoma HPV en la biopsia de cuello uterino pre-parto. Los tipos virales resultaron: 6 (3/21), 16 (8/21), 11(2/21) y 18 (2/21). En 6 muestras no observamos amplificación de los tipos estudiados, pudiendo estar infectados con otros subtipos diferentes. Solo pudo detectarse ADN viral en sangre periférica de 5 pacientes. En las muestras postparto observamos amplificación viral en: sangre de cordón 3/8, Hisopo bucal y nasal 2/11, placenta lado materno 0/10 y placenta lado fetal 1/10.A pesar de que la cantidad de muestras resulta escasa para poder expresar resultados estadísticamentesignificativos, es reveladora la presencia de genoma viral en una muestra de placenta del lado fetal, en una paciente con una lesión de alto grado CINII/III que había dado a luz por cesárea, ambos tipos virales coincidieron (materno-fetal)
Detection of human papillomavirus DNA and p53 codon 72 polymorphism in prostate carcinomas of patients from Argentina
BACKGROUND: Infections with high-risk human papillomaviruses (HPVs), causatively linked to cervical cancer, might also play a role in the development of prostate cancer. Furthermore, the polymorphism at codon 72 (encoding either arginine or proline) of the p53 tumor-suppressor gene is discussed as a possible determinant for cancer risk. The HPV E6 oncoprotein induces degradation of the p53 protein. The aim of this study was to analyse prostate carcinomas and hyperplasias of patients from Argentina for the presence of HPV DNA and the p53 codon 72 polymorphism genotype. METHODS: HPV DNA detection and typing were done by consensus L1 and type-specific PCR assays, respectively, and Southern blot hybridizations. Genotyping of p53 codon 72 polymorphism was performed both by allele specific primer PCRs and PCR-RFLP (Bsh1236I). Fischer's test with Woolf's approximation was used for statistical analysis. RESULTS: HPV DNA was detected in 17 out of 41 (41.5 %) carcinoma samples, whereas all 30 hyperplasia samples were HPV-negative. Differences in p53 codon 72 allelic frequencies were not observed, neither between carcinomas and hyperplasias nor between HPV-positive and HPV-negative carcinomas. CONCLUSION: These results indicate that the p53 genotype is probably not a risk factor for prostate cancer, and that HPV infections could be associated with at least a subset of prostate carcinomas
A Novel RNA-Recognition-Motif Protein Is Required for Premeiotic G1/S-Phase Transition in Rice (Oryza sativa L.)
The molecular mechanism for meiotic entry remains largely elusive in flowering plants. Only Arabidopsis SWI1/DYAD and maize AM1, both of which are the coiled-coil protein, are known to be required for the initiation of plant meiosis. The mechanism underlying the synchrony of male meiosis, characteristic to flowering plants, has also been unclear in the plant kingdom. In other eukaryotes, RNA-recognition-motif (RRM) proteins are known to play essential roles in germ-cell development and meiosis progression. Rice MEL2 protein discovered in this study shows partial similarity with human proline-rich RRM protein, deleted in Azoospermia-Associated Protein1 (DAZAP1), though MEL2 also possesses ankyrin repeats and a RING finger motif. Expression analyses of several cell-cycle markers revealed that, in mel2 mutant anthers, most germ cells failed to enter premeiotic S-phase and meiosis, and a part escaped from the defect and underwent meiosis with a significant delay or continued mitotic cycles. Immunofluorescent detection revealed that T7 peptide-tagged MEL2 localized at cytoplasmic perinuclear region of germ cells during premeiotic interphase in transgenic rice plants. This study is the first report of the plant RRM protein, which is required for regulating the premeiotic G1/S-phase transition of male and female germ cells and also establishing synchrony of male meiosis. This study will contribute to elucidation of similarities and diversities in reproduction system between plants and other species