Diagnóstico de enteropatógenos em leitões de até sete dias de idade, na região do Triângulo Mineiro/Alto Paranaíba

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-11T14:54:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 disserta__o_eduardo_coulaud.pdf: 1290175 bytes, checksum: 14fa4e08846e7b2f7881e762e83c2dc2 (MD5) Previous issue date: 12Sessenta leitões com até sete dias de idade, sendo 30 diarréicos e 30 não diarréicos, provenientes de 15 granjas da mesoregião do Triângulo Mineiro/Alto Paranaíba foram selecionados, eutanasiados e necropsiados. Foram coletados segmentos de jejuno, íleo, ceco e cólon para histopatologia e conteúdo intestinal e fezes para pesquisas diagnósticas. Os enteropatógenos pesquisados foram Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC), Clostridium perfringens tipo A e tipo C, Clostridium difficile, Rotavirus e Isospora suis. Para pesquisa de E. coli e C. perfringens foi feito isolamento e tipificação por meio da PCR multiplex. Para C. difficile utilizou-se Kit-ELISA comercial. Foi utilizado eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) para pesquisa de rotavirus e exame parasitológico de flutuação para I. suis. Foi encontrada uma frequência de 23,3% de C. difficile entre os leitões diarréicos e de 10% entre os não diarréicos; 33,3% de C. perfringens tipo A 2 entre os diarréicos e 53,3% entre os controle; 14,3% de Rotavirus entre os diarréicos e 0% para os controle; 10% de E. coli ETEC entre os diarréicos e 3,3% entre os não diarréicos; 3,8% de I. suis para o grupo controle e nenhuma detecção no grupo diarréico. Não houve nenhum diagnóstico de C. perfringens tipo C. Em relação à histopatologia, leitões diarréicos apresentaram frequência de 30% de enterites, variando de leve a acentuada, e 20% de tiflocolites. Leitões não diarréicos apresentaram 33,4% de enterite e 23,3% de tiflocolite, também em diferentes intensidades. Os agentes Clostridium perfringens tipo A 2 e C. difficile foram os enteropatógenos mais frequentemente diagnosticados.Sixty 1 to 7-day-old piglets, being 30 diarrheic and 30 non-diarrheic, from 15 different swine farms located at Triângulo Mineiro/Alto Paranaíba were selected, euthanized and necropsied. Segments of jejunum, ileum, colon, cecum, intestinal content and feces were collected from these piglets for further testing. The following were the studied enteropathogens: Escherichia coli enterotoxigenic (ETEC), Clostridium perfringens type A and type C, Clostridium difficile, Rotavirus and Isospora suis. Isolation and typing, using Multiplex PCR, were used for E. coli and C. perfringens detection. A commercial ELISA kit was used for detecting C. difficile. Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) was performed for Rotavirus detection. The parasitological flotation test was utilized for I. suis search. Among diarrheic piglets, 23.3% were positive for C. difficile, 33% positive for C. perfringens type A 2, 14.3% positive for Rotavirus and 10% for ETEC. Non-diarrheic piglets (controls) were 10% positive for C. difficile, 53.3% for C. perfringens type A 2, 0% for Rotavirus, 3.3% for ETEC and 3.8% for I. suis. No C. perfringens type C was detected in any animal. Upon histology, 30% of diarrheic piglets had different intensities of enteritis and 20% colitis. Non-diarrheic animals had 33.4% enteritis and 23.3% colitis, also varying in severity. The agents C. perfringens type A and C. difficile were the most frequent diagnosed enteropathogens

Detection of enterotoxin A and cytotoxin B, and isolation of Clostridium difficile in piglets in Minas Gerais, Brazil Detecção da enterotoxina A e citotoxina B e isolamento de Clostridium difficile em leitões em Minas Gerais, Brasil

Clostridium difficile has emerged as a major cause of neonatal colitis in piglets, displacing classic bacterial pathogens. However, there is no information regarding the distribution of this microorganism in pig farms in Brazil. In the present study, the presence of toxins A/B and of C. difficile strains in stool samples from 60 diarrheic or non-diarrheic newborn piglets (one to seven days old), from 15 different farms, was studied. The presence of toxins A/B was detected by ELISA and PCR was used to identify toxin A, toxin B and binary toxin gene in each isolated strain. C. difficile A/B toxins were detected in ten samples (16.7%). Of these, seven were from diarrheic and three were from non-diarrheic piglets. C. difficile was recovered from 12 out of 60 (20%) fecal samples. Of those, three strains were non-toxigenic (A-B-) and nine were toxigenic. Of the nine toxigenic strains, four were A+B+ strains and five were A-B+ strains. The presence of binary toxin observed in the present study was much higher (50%) than in previously reported studies. All three non-toxigenic strains were isolated from otherwise healthy piglets. The results suggest the occurrence of neonatal diarrhea by C. difficile in farms in Brazil.<br>Clostridium difficile tem sido relatado como o principal causador de colite neonatal em suínos. Apesar da crescente importância deste agente, não há dados sobre infecções causadas por C. difficile em suínos no Brasil. O objetivo do presente estudo foi detectar as toxinas A/B e isolar C. difficile a partir de 60 amostras de fezes de leitões diarreicos ou apararentemente saudáveis, com no máximo sete dias de vida, e oriundos de 15 granjas diferentes. As toxinas A/B foram detectadas por ELISA e uma PCR multiplex foi utilizada para detecção dos genes responsáveis pela codificação das toxinas A, B e toxina binária. As toxinas A/B de C. difficile foram detectadas em dez amostras de fezes (16.7%). Dessas, sete eram de animais diarreicos e três de leitões aparentemente saudáveis. Foi possível isolar C. difficile em 12 das 60 (20%) amostras trabalhadas. Dessas, três estirpes eram não-toxigênicas (A-B-) e nove eram toxigênicas, sendo quatro caracterizadas como A+B+ e cinco como A-B+. O gene responsável pela codificação da toxina binária foi encontrado em 50% das estirpes isoladas, proporção superior ao relatado em estudos anteriores. Todas as estirpes não toxigênicas foram isoladas de animais não diarreicos. Os resultados encontrados sugerem a ocorrência de diarreia por C. difficile em granjas no Brasil