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DETECÇÃO DE FATORES DE VIRULÊNCIA DE ESCHERICHIA COLI ISOLADA DA PELE E DO FÍGADO DE FRANGOS COM LESÕES DE CELULITE AVIÁRIA
OBTENÇÃO DE EXTRATOS AQUOSOS E ALCOOLICOS DE BIDENS PILOSA PARA UTILIZAÇÃO EM CEPAS DE MALASSEZIA PACHYDERMATIS: RESULTADOS PRELIMINARES
Bidens pilosa, conhecida como “Picão” ou “Picão preto” é uma planta com propriedades antimicrobianas, usada para tratar icterícia e, como tem ação hepatoprotetora é potencialmente uma alternativa para terapias de longo prazo, como em doenças fúngicas, especialmente dermatites e otites. Neste sentido, esse trabalho objetivou investigar o potencial antifúngico da B. pilosa, por meio da produção de extratos alcoólico e aquoso da planta e sua ação frente à Malassezia pachydermatis. Para isso, os extratos de B. pilosa foram obtidos da seguinte maneira: as plantas foram identificadas pela morfologia das folhas e flores, colhidas e secas à sombra em posição vertical. Ao todo, obteve-se aproximadamente 80 g da planta. Após, as folhas e flores foram processadas obtendo-se granulometria inferior a 0,42 mm. Para obtenção do extrato alcoólico e aquoso foram adicionados 100 ml de álcool etílico absoluto ou 100 ml de água destilada com 10% de DMSO, respectivamente, para aproximadamente 20 g de planta. As soluções permaneceram sob agitação orbital a 180 rpm, a 30ºC por 24 h. Após, as soluções foram filtradas em filtro de papel. Em seguida o extrato alcoólico, foi concentrado em rota-evaporadora a 60ºC. Ambos extratos, foram secados completamente em estufa de circulação forçada, onde obteve-se um rendimento de 30,24% para o extrato aquoso e 3,14% para o extrato alcoólico. Os extratos secos foram ressuspendidos em água destilada com 10% de DMSO na proporção de 2:10 (p/v) e esterilizados através de membrana filtrante (0,45 micras) e armazenados a 4ºC. As amostras de M. pachydermatis, foram obtidas através do cultivo e isolamento de suabes colhidos de cães com diagnóstico de otite. Quatro cães, provenientes das aulas práticas realizadas no Centro de Práticas Clínicas e Cirúrgicas do Instituto Federal Catarinense campus Concórdia, foram amostrados. Foram colhidos duas amostras de cada animal (ouvido esquerdo e direito), exceto em um animal em que se realizou a colheita apenas do ouvido esquerdo, totalizando sete amostras. Para a colheita da secreção auricular foi introduzido um suabe estéril no canal auditivo externo, o material colhido foi armazenado em meio stuart, a temperatura ambiente para processamento no mesmo dia. As amostras foram cultivadas em ágar Sabouraud e identificadas de acordo com a morfologia das colônias e microscopia, onde obteve-se seis isolados de Malassezia. Até o momento o estudo encontra-se em fase de desenvolvimento, no qual as próximas etapas serão testar a concentração inibitória mínima e a concentração fúngica mínima dos extratos obtidos frente à M. pachydermatis. Pretende-se com a conclusão do estudo, elucidar se os extratos de B. pilosa possuem potencial aplicação em tratamentos de otites fúngicas. Suporte financeiro: Edital 08/2020 IFC campus Concórdia
Portfólio: uma proposta de avaliação prática interdisciplinar como reformulação do processo de aprendizagem virtual no curso de medicina veterinária em tempos de pandemia – Relato de experiência
Portfólios de ensino têm sido apontados como ferramentas formativas e reflexivas nos diversos graus de ensino. O objetivo deste ensaio é relatar uma experiência em desenvolver um portfólio interdisciplinar como dispositivo pedagógico para o exercício da narratividade de um plano de aula, para a disciplina de imunologia do curso superior de Medicina Veterinária (MV), do Instituto Federal Catarinense (IFC) Campus Concórdia. O portfólio foi desenvolvido para dois encontros virtuais como metodologia ativa para a disciplina de imunologia em tempos de pandemia. Essa experiência foi vivida por professores1,2 em dois ambientes distintos, Florianópolis e Concórdia, com as seguintes informações: a) descrição do curso superior, da disciplina, do conteúdo da aula, do perfil do discente, do perfil do docente convidado, do plano de aula (PA) e do planejamento do PA, da reflexão do aluno e professor. Durante o tempo em que foi aplicado o portfólio analisou-se a importância do uso dessa ferramenta como amostra de evidências das habilidades, atitudes e/ou conhecimentos obtidos pelos acadêmicos. A avaliação qualitativa dos alunos foi a etapa final do processo e compreendeu em atividades lúdicas por interfaces de softwares e questionários de respostas investigativas composta por questões objetivas e dissertativas com autoavaliações. O aprendizado colaborativo favoreceu o desenvolvimento de competências interpessoais como a comunicação, trabalho em equipe, persuasão, flexibilidade, empatia, espírito de colaboração e responsabilidade. O atual desafio educacional trouxe a oportunidade de pensar em soluções didáticas inovadoras usando apenas recursos de casa ou do meio digital. O trabalho demonstrou a existência de prática relevante em gestão de portfólio, suportado pela teoria da disciplina, embora limitado pela aplicação em somente duas aulas e não ao semestre completo
PREVALÊNCIA DE Escherichia coli SHIGA-TOXIGÊNICA EM CORTES DE CARNES E MIÚDOS DE SUÍNOS ABATIDOS NO OESTE DE SANTA CATARINA
Escherichia coli Shiga Toxigênica (STEC) é um patógeno emergente importante nasaúde pública e as cepas potencialmente zoonóticas apresentarem os genes stx eeae . O objetivo deste estudo foi verificar a presença destes genes em cortes emiúdos suínos. Para isto, 740 amostras foram submetidas à PCR em tempo real, asamostras positivas foram cultivadas e os isolados foram submetidas novamente àPCR em tempo real para detecção dos genes. Destas, 140 amostras forampositivas, as quais em 71 foi possível isolar cepas de E. coli , Das cepas isoladas,apenas sete apresentaram algum gene de virulência
DESENVOLVIMENTO DE UM MÉTODO RÁPIDO E PRECISO PARA DETERMINAÇÃO DE IMUNOGLOBULINAS EM COLOSTRO SUÍNO: DADOS PRELIMINARES
PESQUISA DE GENES DE RESISTÊNCIA AOS MACROLÍDEOS EM CEPAS PASTEURELLA MULTOCIDA ISOLADAS DE SUÍNOS: AVALIAÇÃO DO PROTOCOLO DE EXTRAÇÃO DE ÁCIDOS NUCLEICOS
Em estudo prévio realizados pelo nosso grupo, observou-se elevado índice de resistência à Eritromicina de cepas de Pasteurella multocida. A resistência a Eritromicina está associada aos genes erm(42), msr(E) e mph(E), os quais podem ser detectados através da PCR. Entretanto, uma etapa que determina o sucesso ou a falha na realização da PCR, é extração de ácidos nucleicos. Neste sentido, este trabalho avaliou um protocolo de extração de DNA para P. multocida. Para isso, o DNA de 90 cepas foi extraído pelo método clorofórmio/álcool-isoamílico. O produto resultante foi avaliado por métodos quantitativos e qualitativos e apresentou resultados satisfatórios
PERÍODO DE CARÊNCIA RESPEITADO É SINÔNIMO DE LEITE ISENTO DE RESÍDUOS DE ANTIMICROBIANOS?
O tratamento de vacas leiteiras com antimicrobianos implica no estabelecimento do período de carência,para que ocorra adequado descarte do leite. Devido à importância deste tema em saúde pública, bem comoo impacto econômico sobre o agronegócio, objetivou-se avaliar a presença de resíduos de antimicrobianosem amostras de leite obtidas de vacas tratadas, após respeitado o período de carência indicado na bula.Foram incluídas no estudo 31 vacas medicadas contra casos clínicos de mastite, e seis vacas recém-paridas,que receberam terapia antimicrobiana durante o período seco. Foram envolvidas sete propriedades leiteiraslocalizadas nos municípios de Concórdia-SC (3), Peritiba-SC (1), Treze Tílias-SC (1), Aratiba-RS (1) eCarambeí-PR (1). Os protocolos de tratamento utilizados em cada propriedade foram mantidos, tendo sidoutilizados antimicrobianos produzidos por dez diferentes fabricantes, contemplando as seguintes classes:Aminoglicosídeos, Beta-Lactâmicos, Macrolídeos e Tetraciclinas. Foram colhidas 37 amostras de leite daordenha completa de cada animal, a partir de copo coletor acoplado ao sistema de ordenha. No caso devacas tratadas contra mastite clínica, as amostras foram colhidas no primeiro dia após finalizado o períodode carência recomendado na bula do produto utilizado para tratamento. Já no caso das vacas recém-paridas,as amostras foram colhidas no quarto dia após o parto. Para detecção dos resíduos de antimicrobianos,utilizou-se o kit Charm Cow Side II® (Charm Sciences), que identifica Beta-lactâmicos, Sulfonamidas,Tetraciclinas, Macrolídeos e Aminoglicosídeos. As amostras foram asséptica e individualmente inoculadasem frascos fornecidos pelo kit, contendo esporos bacterianos em meio de cultura. Amostras de leitereconhecidamente sem resíduos de antimicrobianos foram utilizadas como controles. Em seguida, foramincubadas em banho-maria, a 64,5oC, durante três horas. A interpretação dos resultados foi realizadavisualmente, com auxílio de um cartão-guia de cores, disponibilizado pelo kit. Verificou-se que 16 (43,2%)das 37 amostras de leite avaliadas apresentaram resultados positivos para a presença de resíduos deantimicrobianos (sendo 15 amostras provenientes de vacas tratadas contra mastite clínica, e uma amostracolhida de vaca recém-parida). Em cinco amostras (13,5%), os resultados foram inconclusivos. Considerandoas classes de antimicrobianos detectadas nas amostras positivas, em 13 (81,25%) foram identificadosresíduos de Aminoglicosídeos; em 12 (75%) de Tetraciclinas, e em três (18,75%) de Beta-Lactâmicos(considerando que em alguns medicamentos há associação de duas ou mais classes de antimicrobianos). Oconsiderável índice de resultados positivos obtidos no presente estudo alerta para a possível necessidade derevisão do período de carência de alguns antimicrobianos disponíveis no mercado. No entanto, para umaconclusão mais aprofundada, será necessário realizar provas quantitativas para avaliar se o nível deresíduos nas amostras positivas encontra-se dentro do Limite Máximo de Resíduos (LMR) permitido pelasnormativas vigentes (o que se pretende realizar, em continuidade ao estudo)
PADRONIZAÇÃO DE PROTOCOLO DE MULTIPLEX PCR PARA IDENTIFICAÇÃO SIMULTÂNEA DE DIFERENTES GENES ASSOCIADOS À VIRULÊNCIA EM CEPAS DE ESTREPTOCOCOS AMBIENTAIS ISOLADAS DE CASOS CRÔNICOS DE MASTITE BOVINA
Pesquisaram-se genes de virulência em 100 cepas de Estreptococos Ambientais(EA) isolados de casos de mastite bovina, sendo 50 de Streptococcus uberis (SU) e50 de Streptococcus dysgalactiae (SD). Realizada PCR das amostras de SU,verificou-se que 21 (42%) e 9 (18%), apresentavam o gene pauA e skc ,respectivamente. Cinco (16%) foram positivas para ambos genes. Das amostras deSD, 13 (26%) foram positivas para o gene mig . Os resultados alertam para aelevada prevalência de EA altamente virulentos, reforçando a necessidade deintensificar o uso de medidas profiláticas, com vistas à proteção à saúde animal e àsaúde pública
DETECÇÃO MOLECULAR DE Leptospira interrogans EM BOVINOS ABATIDOS EM CONCÓRDIA, SANTA CATARINA
A leptospirose é uma doença infectocontagiosa de caráter zoonótico de relevância nos rebanhos bovinos, causada por bactérias do gênero Leptospira, está associada a grandes impactos econômicos. Caracteriza-se principalmente por ocasionar problemas reprodutivos, como abortos, infertilidade, repetição de cio, nascimento de bezerros fracos e distúrbios da glândula mamária. O diagnóstico da leptospirose é realizado através do teste sorológico de aglutinação microscópica (MAT), definido como teste padrão pela Organização Mundial de Saúde Animal (OIE), no entanto é dificultoso devido a algumas adversidades, tais como os sinais clínicos inespecíficos, a necessidade de um laboratório especializado, bem como pelo processo laborioso de isolar e classificar os sorovares. Em virtude disso, o presente estudoteve como propósito utilizar técnicas de biologia molecular para detecção de cepas de L. interrogans em bovinos abatidos em Concórdia SC, visando um diagnóstico mais rápido, preciso e acessível. Para isso, foram coletadas amostras de sangue, urina e tecido renal de 178 animais no momento do abate, que posteriormente foram submetidas a um processo de extração de DNA e à PCR. As amostras que resultaram em amplificação passaram pelas técnicas de MAT, coloração histológica a base de prata (Warthin-Starry) e histopatologia comparativa. Das amostras de urina, 3,9% (7/178) apresentaram positividade na PCR e destas 1,1% (2/178) apresentaram anticorpos anti-Leptospira mais especificamente para o sorovar Hardjo, todas apresentaram nefrite intersticial e em nenhuma foi possível detectar a espiroqueta através da coloração a base de prata. Das amostras de tecido renal, nenhuma apresentou amplificação na PCR. Os resultados obtidos apontam a presença desse patógeno em portadores crônicos na região do estudo, estes são os principais contribuintes para a circulação e disseminação da doença nos rebanhos, sendo assim necessários mais estudosacerca de testes diagnósticos mais efetivos e rápidos, como a PCR que demonstrou ter uma boa sensibilidade nesse caso, para auxiliar no controle e prevenção dessa importante enfermidade
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