Restriction of Th2 responses by interleukin-6 and identification of a new transcription factor expressed in follicular helper T cells

L’objectif de notre travail a été de caractériser le rôle de l’IL-6 dans la différenciation des lymphocytes Tfh et des lymphocytes Th2. Les lymphocytes Tfh ont pour fonction d’aider les lymphocytes B à produire des anticorps indispensables pour nous protéger contre divers pathogènes. Les lymphocytes Th2, quant à eux, sont spécialisés dans l’élimination de parasites extracellulaires tels que les helminthes.Dans un premier temps, nous avons voulu identifier les gènes dont l’expression est induite par l’IL-6, avec comme objectif une meilleure compréhension des mécanismes permettant aux lymphocytes T de se différencier en cellules Tfh.Au cours de notre travail, nous avons identifié le facteur de transcription, MyoR (Myogenic Repressor) comme étant exprimé au sein des lymphocytes T helper et dont l’expression est induite par l’IL-6. Nos observations expérimentales ont démontré que le facteur MyoR n’est pas indispensable pour la différenciation des lymphocytes Tfh, ni pour leur fonction. Cependant, l’expression de l’ARNm codant pour MyoR pourrait être utilisée comme un biomarqueur des cellules Tfh in vitro ou in vivo.Nous avons ensuite caractérisé la réponse immune induite in vivo par des cellules présentatrices d’antigènes issues de souris déficientes pour l’IL-6. Cette approche nous a permis de mettre en évidence le rôle immunosuppresseur de l’IL-6 sur le développement des réponses de type Th2. En effet, nous avons montré que l’injection de BMDCs (Bone Marrow derived dendritic cells) IL-6-/- dans des souris receveuses de type sauvage induisent une réponse Th2 augmentée in vivo.Nos résultats suggèrent que l’inhibition de la réponse Th2 par l’IL-6 in vivo et in vitro pourrait impliquer la présence d’un ou de plusieurs miRNAs.Cette inhibition pourrait être un mécanisme de rétrocontrôle afin d’éviter une exacerbation de la réponse immune Th2.Doctorat en Sciencesinfo:eu-repo/semantics/nonPublishe

Restriction of Th2 responses by interleukin-6 and identification of a new transcription factor expressed in follicular helper T cells

L’objectif de notre travail a été de caractériser le rôle de l’IL-6 dans la différenciation des lymphocytes Tfh et des lymphocytes Th2. Les lymphocytes Tfh ont pour fonction d’aider les lymphocytes B à produire des anticorps indispensables pour nous protéger contre divers pathogènes. Les lymphocytes Th2, quant à eux, sont spécialisés dans l’élimination de parasites extracellulaires tels que les helminthes.Dans un premier temps, nous avons voulu identifier les gènes dont l’expression est induite par l’IL-6, avec comme objectif une meilleure compréhension des mécanismes permettant aux lymphocytes T de se différencier en cellules Tfh.Au cours de notre travail, nous avons identifié le facteur de transcription, MyoR (Myogenic Repressor) comme étant exprimé au sein des lymphocytes T helper et dont l’expression est induite par l’IL-6. Nos observations expérimentales ont démontré que le facteur MyoR n’est pas indispensable pour la différenciation des lymphocytes Tfh, ni pour leur fonction. Cependant, l’expression de l’ARNm codant pour MyoR pourrait être utilisée comme un biomarqueur des cellules Tfh in vitro ou in vivo.Nous avons ensuite caractérisé la réponse immune induite in vivo par des cellules présentatrices d’antigènes issues de souris déficientes pour l’IL-6. Cette approche nous a permis de mettre en évidence le rôle immunosuppresseur de l’IL-6 sur le développement des réponses de type Th2. En effet, nous avons montré que l’injection de BMDCs (Bone Marrow derived dendritic cells) IL-6-/- dans des souris receveuses de type sauvage induisent une réponse Th2 augmentée in vivo.Nos résultats suggèrent que l’inhibition de la réponse Th2 par l’IL-6 in vivo et in vitro pourrait impliquer la présence d’un ou de plusieurs miRNAs.Cette inhibition pourrait être un mécanisme de rétrocontrôle afin d’éviter une exacerbation de la réponse immune Th2.Doctorat en Sciencesinfo:eu-repo/semantics/nonPublishe

Antigen-presenting cell-derived IL-6 restricts the expression of GATA3 and IL-4 by follicular helper T cells.

Follicular helper T cells (Tfh) support high-affinity Ab production by germinal center B cells through both membrane interactions and secretion of IL-4 and -21, two major cytokines implicated in B-cell survival and Ab class switch. Tfh-2 cells recently emerged in humans as a strong IL-4 producer Tfh cell subset implicated in both autoimmune and allergic diseases. Although the molecular mechanisms governing Tfh cell differentiation from naive T cells have been widely described, much less is known about the regulation of cytokine secretion by mouse Tfh-2 cells. The purpose of our study was to evaluate the role of dendritic cell-derived IL-6 in fine-tuning cytokine secretion by Tfh cells. Our results demonstrate that priming of Th cells by IL-6-deficient antigen-presenting dendritic cells preferentially leads to accumulation of a subset of Tfh cells characterized by high expression of GATA3 and IL-4, associated with reduced production of IL-21. STAT3-deficient Tfh cells also overexpress GATA3, suggesting that early IL-6/STAT3 signaling during Tfh cell development inhibits the expression of a set of genes associated with the Th2 differentiation program. Overall, our data indicate that IL-6/STAT3 signaling restrains the expression of Th2-like genes in Tfh cells, thus contributing to the control of IgE secretion in vivo.SCOPUS: ar.jinfo:eu-repo/semantics/publishe

Dielectric spectroscopy of biological cells in microfluidic devices

International audienceThis work is focused in the area of ligandreceptor interaction analysis, working with a wellcharacterized biological model (ligand: lactoferrin, receptors: nucleolin and sulfated proteoglycans). The purpose is to be able to assign, in real time, a specific crossing pathway to a ligand/receptor pair, without the use of molecular labels. The classification is based on changes in the electrical properties of the cells. We propose to follow the various phases of assembly between the ligand and receptors present or not on a set of mutant CHO cell lines, and internalization of the ligands/receptors complexes into the cells. Various BioMEMS have been designed and fabricated in order to characterize the variation of the electrical properties of the biological cells. We are interested in both dielectric (i.e. polarization) and vibrationnal (i.e. absorption) spectroscopy. Several devices are currently tested for low (40GHz) frequency range (LFR & HFR) measurements. In the LFR, we have fabricated coplanar and 3D electrodes sensors for impedance measurements. In the HFR, we have designed and processed coplanar waveguides

Myor/ABF-1 Mrna Expression Marks Follicular Helper T Cells but Is Dispensable for Tfh Cell Differentiation and Function <i>In Vivo</i>

<div><p>Follicular T helper cells (Tfh) are crucial for effective antibody responses and long term T cell-dependent humoral immunity. Although many studies are devoted to this novel T helper cell population, the molecular mechanisms governing Tfh cell differentiation have yet to be characterized. MyoR/ABF-1 is a basic helix-loop-helix transcription factor that plays a role in the differentiation of the skeletal muscle and Hodgkin lymphoma. Here we show that MyoR mRNA is progressively induced during the course of Tfh-like cell differentiation <i>in vitro</i> and is expressed in Tfh responding to Alum-precipitated antigens <i>in vivo</i>. This expression pattern suggests that MyoR could play a role in the differentiation and/or function of Tfh cells. We tested this hypothesis using MyoR-deficient mice and found this deficiency had no impact on Tfh differentiation. Hence, MyoR-deficient mice developed optimal T-dependent humoral responses to Alum-precipitated antigens. In conclusion, MyoR is a transcription factor selectively up-regulated in CD4 T cells during Tfh cell differentiation <i>in vitro</i> and upon response to alum-protein vaccines <i>in vivo</i>, but the functional significance of this up-regulation remains uncertain.</p></div

MyoR is dispensable for T-dependent humoral responses.

<p>(A–F) WT and MyoR^−/− mice were immunized against NP-KLH/Alum (A–D) or KLH/Alum (E, F) and tested for Tfh cell marker expression in the draining lymph nodes. Representative contour plots showed the expression of CXCR5⁺PD-1⁺ (A), CXCR5⁺ICOS⁺ (C) or CXCR5⁺ BCL-6 ⁺ (E) among CD4⁺ T cells. Histograms in (B, D, F) represent the mean ± SD of marker-positive cells from 4 individual mice and are representative of 3 independent experiments. (G) Aliquots of cells were stimulated for 4 h with PMA and ionomycin and tested for IL-21 production by intracellular staining. Histograms represent the mean ± SD of IL-21⁺ cells in the Tfh (CXCR5⁺PD-1⁺) and non-Tfh (CXCR5⁻PD-1⁻) subsets of WT and MyoR^−/− mice (4 mice/group). (H) NP-specific serum IgG1 titers of WT (open symbols) and MyoR^−/− (closed symbols) mice were determined at different timings after i.p. immunization with NP-KLH/Alum. (I) sera from panel H were tested for NP-affinity. Relative affinities are expressed as ratio of 50% binding on NP₂-BSA and NP₃₀-BSA- coated plates. Each dot represents a mouse. Data are representative of two independent experiments. *: p<0.05; **: p<0.01; ns, not significant; n.i., non immune mouse.</p