Выявление микобактерий туберкулеза в мокроте у больных ВИЧ-инфекцией при использовании современного алгоритма этиологической диагностики заболевания

The objective. To establish the informativity of using phenotypic and molecular genetic methods of detection of mycobacterium tuberculosis (МВТ) from sputum to diagnose tuberculosis in patients with HIV infection. Patients and methods. 360 HIV-infected individuals with suspected tuberculosis were examined. A diagnostic algorithm included two tests of sputum for AFB/ МВТ by fluorescence microscopy, detection of МВТ DNA in real-time PCR and inoculation of liquid and solid media. Results. Tuberculosis was diagnosed in 49.4% of the examined patients. The greatest sensitivity and accuracy of МВТ detection was demonstrated by molecular genetic methods (71.3% and 0.85, respectively), which even exceeded tire results of culture diagnosis (sensitivity - 58.4 and 60.7%, accuracy - 0.79 and 0.81 for inoculation of liquid and dense media, respectively). An extremely low sensitivity was demonstrated by fluorescence microscopy (24.2%). No relation between the frequency of МВТ detection and the number of CD4+-lymphocytes was found in any method but for fluorescence microscopy showed a tendency of a better effectiveness in patients with profound immunodeficiency (in CD4 less than 100 cell/pl). Repeat analysis of inoculation of liquid media and detection of МВТ DNA (MGM) enhanced the diagnostic value of each method by 8.6 and 7.1%, respectively. In 73.5% of patients, tuberculosis was diagnosed within 2-3 days from the moment of turning for medical help. Conclusion. In general, an examination algorithm for detection of МВТ demonstrated its sensitivity in patients with co-infection (HIV/ТВ) in 87.1%. If molecular genetic methods can be used for rapid detection of a causative agent fluorescence microscopy looses its relevance for diagnosing tuberculosis.Цель. Установить информативность использования фенотипических и молекулярно-генетических методов детекции микобактерии туберкулезис (МВТ) из мокроты для диагностики туберкулеза у больных ВИЧ-инфекцией. Пациенты и методы. Обследование выполнено 360 ВИЧ-инфицированным с подозрением на туберкулез. Диагностический алгоритм включал двукратное исследование мокроты на КУМ/МБТ люминесцентной микроскопией, выявлением ДНК МВТ с помощью полимеразной цепной реакции реального времени и посевом на жидкие и плотные питательные среды. Результаты. Туберкулез установлен 49,4% пациентам от числа обследованных. Наибольшую чувствительность и точность в выявлении МБТ показали молекулярно-генетические методы (71,3% и 0,85 соответственно), которые даже превысили результаты культуральной диагностики (чувствительность - 58,4 и 60,7%, точность - 0,79 и 0,81 для посева на жидкие и плотные среды соответственно). Крайне низкую чувствительность показала люминесцентная микроскопия (24,2%). Не отмечено связи между частотой выявления МБТ и количеством СД4+-лимфоцитов ни по одному из методов, однако для люминесцентной микроскопии отмечена тенденция лучшей результативности у больных с глубоким иммунодефицитом (при CD4 менее 100 клеток/мкл). Повторный анализ посева на жидкие среды и выявления ДНК МБТ (МГМ) усилили диагностическую ценность каждого из методов на 8,6 и 7,1% соответственно. У 73,5% больных диагноз туберкулеза был установлен в течение 2-3 дней от момента обращения за помощью. Заключение. В целом алгоритм обследования для выявления МБТ продемонстрировал чувствительность у больных ко-инфекцией (ВИЧ/ТБ) 87,1%. При возможности использовать быстрые молекулярно-генетические методы детекции возбудителя люминесцентная микроскопия теряет свою значимость в диагностике туберкулеза

A clinical-epidemiological characteristic of mycobacteriosis in two subjects of the russian federation

Objective. To study the clinical and epidemiological situation of mycobacteriosis on the territory of two regions of the Russian Federation – the Republic of Mari El (RME) and the Vladimir region (VR). Materials and methods. We analysed the results of identification of 226 NTM cultures and medical records of 105 patients, who provided material, from which nontuberculosis mycobacteria (NTM) were isolated. Results. Mycobacteriosis was diagnosed in 51 patients (48.6%). The incidence rate of mycobactriosis by the end of 2016 was 1.75/100 000 population in RME, 0.28/100 000 in VR, the prevalence was 4.3 and 1.5/100 000 respectively. 76% of cases were associated with Mycobacterium avium-complex. The average age of patients was 56.1 ± 16.6 years. In the clinical structure of disease, lung disease prevailed – 88.2% (n = 42); whereas generalised mycobacteriosis (9.8%; n = 5) occurred exclusively among HIV-infected patients. The most common symptoms were cough (64.3%), dyspnoea (40.5%), signs of intoxication (fever – 23.8%, sweating – 14.3%), weight loss (23.8%). In the structure of lung diseases, fibrocavitary forms were noted in 52.4% of patients, nodular bronchiectatic forms in 47.6%. Conclusion. The prevalence of mycobacteriosis across the studied territories is low (1.75-4.3/100 000). The frequency of development of pulmonary forms is the highest in the age group of 55-65-year-olds, practically with an equal proportion occurring among men and women. The difficulty of an early diagnosis of mycobacteriosis is conditioned by the absence of specific symptoms of disease, similarity of its clinical and x-ray signs with tuberculosis. Immunological diagnosis (Mantoux test with 2ТЕ, recombinant tuberculosis allergen test) does not allow a reliable differentiation between mycobacterial infections due to the likeness of the antigen structure of MBT and certain NTM species. Considering the predicted increase of life expectancy in RF, population ageing, increase of the proportion of immunocompromised individuals along with the increasing incidence of COPD, we should expect the growth of mycobacterial infection diseases. Therefore, the character of disease, its prevalence need further study. Thus the increasing burden of mycobacteriosis creates new tasks for the public healthcare system, requiring solution of organisational and financial issues. © 2020, Dynasty Publishing House. All rights reserved

Detection of Mycobacterium tuberculosis in blood for diagnosis of generalised tuberculosis in HIV-positive patients

Objective: To study the informative value of the detection of mycobacteria in blood with the cultural method in patients with suspected tuberculous sepsis and to determine the most significant clinical and laboratory criteria for testing. Materials and methods: The investigation to detect M.tuberculosis was fulfilled in 159 HIV-positive patients with suspected tuberculosis sepsis. Blood culture was completed with culture medium Myco/F Lytic Culture Vials and analyzer BACTEC 9050. Results: Mycobacteria were detected in blood of 19 patients (11,9% of all patients): in 18 patients the growth of M. tuberculosis complex was detected (25,3% of all patients with diagnosed tuberculosis) and in 1 patient it was Mycobacterium avium complex (0,6% of all patients). It was shown, that the probability of M.tuberculosis detection was especially associated with the severity of the disease, immunosupression (less than 100 cells/mkl), hemoglobin quantity less than 90 g/l (levels were determined through the seeking for the most significant cutoffs). It was not proofed, that meningoencephalitis develops more often in patients with proven bacteremia. There were no evident differences in detection frequency of mycobacteria in sputum between patients with tuberculous sepsis and without it

Выявление микобактерий туберкулеза в мокроте у больных ВИЧ-инфекцией при использовании современного алгоритма этиологической диагностики заболевания

The objective. To establish the informativity of using phenotypic and molecular genetic methods of detection of mycobacterium tuberculosis (МВТ) from sputum to diagnose tuberculosis in patients with HIV infection. Patients and methods. 360 HIV-infected individuals with suspected tuberculosis were examined. A diagnostic algorithm included two tests of sputum for AFB/ МВТ by fluorescence microscopy, detection of МВТ DNA in real-time PCR and inoculation of liquid and solid media. Results. Tuberculosis was diagnosed in 49.4% of the examined patients. The greatest sensitivity and accuracy of МВТ detection was demonstrated by molecular genetic methods (71.3% and 0.85, respectively), which even exceeded tire results of culture diagnosis (sensitivity - 58.4 and 60.7%, accuracy - 0.79 and 0.81 for inoculation of liquid and dense media, respectively). An extremely low sensitivity was demonstrated by fluorescence microscopy (24.2%). No relation between the frequency of МВТ detection and the number of CD4+-lymphocytes was found in any method but for fluorescence microscopy showed a tendency of a better effectiveness in patients with profound immunodeficiency (in CD4 less than 100 cell/pl). Repeat analysis of inoculation of liquid media and detection of МВТ DNA (MGM) enhanced the diagnostic value of each method by 8.6 and 7.1%, respectively. In 73.5% of patients, tuberculosis was diagnosed within 2-3 days from the moment of turning for medical help. Conclusion. In general, an examination algorithm for detection of МВТ demonstrated its sensitivity in patients with co-infection (HIV/ТВ) in 87.1%. If molecular genetic methods can be used for rapid detection of a causative agent fluorescence microscopy looses its relevance for diagnosing tuberculosis.Цель. Установить информативность использования фенотипических и молекулярно-генетических методов детекции микобактерии туберкулезис (МВТ) из мокроты для диагностики туберкулеза у больных ВИЧ-инфекцией. Пациенты и методы. Обследование выполнено 360 ВИЧ-инфицированным с подозрением на туберкулез. Диагностический алгоритм включал двукратное исследование мокроты на КУМ/МБТ люминесцентной микроскопией, выявлением ДНК МВТ с помощью полимеразной цепной реакции реального времени и посевом на жидкие и плотные питательные среды. Результаты. Туберкулез установлен 49,4% пациентам от числа обследованных. Наибольшую чувствительность и точность в выявлении МБТ показали молекулярно-генетические методы (71,3% и 0,85 соответственно), которые даже превысили результаты культуральной диагностики (чувствительность - 58,4 и 60,7%, точность - 0,79 и 0,81 для посева на жидкие и плотные среды соответственно). Крайне низкую чувствительность показала люминесцентная микроскопия (24,2%). Не отмечено связи между частотой выявления МБТ и количеством СД4+-лимфоцитов ни по одному из методов, однако для люминесцентной микроскопии отмечена тенденция лучшей результативности у больных с глубоким иммунодефицитом (при CD4 менее 100 клеток/мкл). Повторный анализ посева на жидкие среды и выявления ДНК МБТ (МГМ) усилили диагностическую ценность каждого из методов на 8,6 и 7,1% соответственно. У 73,5% больных диагноз туберкулеза был установлен в течение 2-3 дней от момента обращения за помощью. Заключение. В целом алгоритм обследования для выявления МБТ продемонстрировал чувствительность у больных ко-инфекцией (ВИЧ/ТБ) 87,1%. При возможности использовать быстрые молекулярно-генетические методы детекции возбудителя люминесцентная микроскопия теряет свою значимость в диагностике туберкулеза

БЕЗОПАСНОСТЬ ТЕРАПИИ ТУБЕРКУЛЕЗА С МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ ВОЗБУДИТЕЛЯ У БОЛЬНЫХ ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ, ПОЛУЧАЮЩИХ АНТИРЕТРОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ

The review analyzed the studies and meta-analyses devoted the treatment of multiple drug resistant tuberculosis in combination with antiretroviral therapy as a possible risk factor of adverse events and the worst outcomes of therapy. In total, the analysis included 18 sources from the Russian and English databases. Most of the studies did not reveal a confident relation between the simultaneous use of antiretroviral and anti-tuberculosis therapy with second line drugs and increased frequency of adverse events. At the same time, in the largest studies, as well as studies devoted to certain adverse events, the authors managed to prove the existence of such a connection. Data on the structure of adverse events also significantly differed in the results obtained by various authors. Most trials were conducted in African countries with a high prevalence of HIV infection.В обзоре проанализированы исследования и метаанализы, посвященные терапии туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью возбудителя в сочетании с антиретровирусной терапией как возможного фактора риска нежелательных явлений и худших исходов терапии. Всего в анализ включено 18 источников из русско- и англоязычных информационных баз данных. Большинство исследований не выявили достоверной связи между одновременным приемом антиретровирусной и противотуберкулезной терапии препаратами резервного ряда и увеличением частоты нежелательных явлений. В то же время в наиболее крупных исследованиях, а также исследованиях, посвященных отдельным группам нежелательных явлений, удалось доказать наличие подобной связи. Данные о структуре нежелательных явлений также существенно отличаются по результатам, полученным различными авторами. Большинство исследований проведены в странах Африки с высокой распространенностью ВИЧ-инфекции

Роль компьютерной томографии в раннем выявлении туберкулеза органов дыхания, в том числе у лиц, живущих с ВИЧ-инфекцией

Currently, in the world and in the Russian Federation there has been a decrease in the growth rate of cases of HIV infection and tuberculosis, however, an annual increase in the proportion of cases of a combination of these infections is noted. The method of radiation screening in the Russian Federation recognized fluorography, which reveals no more than half of HIV/TB patients, and the use of such a sensitive method as CT is only advisory in nature. WHO recommends the use of radiation diagnostics as a screening tool only if the prevalence of this combination of infections is more than 20%. Currently, it has been proven that HIV infected patients suffer from tuberculosis at least 20 more often, and with an increase in immunodeficiency, they form pathomor-phological characteristics of primary respiratory tuberculosis, while there is a rapid progression of both HIV infection and tuberculosis, often leading to death of patients. The pathomorphological characteristics recorded during computed tomography also change. A review of studies on the possibilities of detecting respiratory tuberculosis in computed tomography, including in people living with HIV infection (n=24), is presented. To compare the effectiveness of CT, a separation was used according to the psychological syndromes and the degree of suppression of immunity. The frequency of occurrence of computed tomographic patterns in this group was examined and it was found that CT is also the most sensitive method for diagnosing tuberculosis in HIV-positive individuals. And increasing the effectiveness of detection is possible when analyzing patient complaints and the severity of immunosuppression. Thus, computed tomography of the organs of the chest cavity can be used at the stage of screening for respiratory tuberculosis in HIV infected patients, taking into account the level of CD4+ lymphocytes.В настоящее время в мире и в РФ отмечается снижение темпов роста случаев ВИЧ-инфицирования и туберкулеза, однако отмечается ежегодное возрастание доли случаев сочетания данных инфекций. Методом лучевого скрининга в РФ признана флюорография, которая выявляет не более половины пациентов ВИЧ/ТБ, а применение такого чувствительного метода, как компьютерная томография (КТ), носит только рекомендательный характер. ВОЗ рекомендует использования лучевой диагностики в качестве инструмента скрининга только при распространенности данного сочетания инфекций более 20%.В настоящее время доказано, что ВИЧ-инфицированные пациенты не менее чем в 20 чаще болеют туберкулезом, причем при нарастании иммунодефицита у них формируются патоморфологические характеристики первичного туберкулеза органов дыхания, при этом наблюдается быстрое прогрессирование как ВИЧ-инфекции, так и туберкулеза, часто приводящее к гибели пациентов. Также изменяются патоморфологические характеристики, регистрируемые при компьютерной томографии. Представлен обзор исследований, посвященных возможностям выявления туберкулеза органов дыхания при компьютерной томографии в том числе у лиц, живущих с ВИЧ-инфекцией (n=24). Для сравнения эффективности КТ использовано разделение по скиалогическим синдромам и степени угнетения иммунитета. Рассмотрена частота встречаемости компьютернотомографических паттернов у данной группы и выяснено, что КТ является также наиболее чувствительным методом диагностики туберкулеза у ВИЧ-позитивных лиц. Повышение эффективности выявления возможно при анализе жалоб пациентов и степени выраженности иммуносупрессии. Таким образом, КТ органов грудной полости может быть использована на этапе скрининга туберкулеза органов дыхания у ВИЧ-инфицированных пациентов с учетом уровня CD4+-лимфоцитов