Hepatic lipogenesis gene expression in two experimental egg-laying lines divergently selected on residual food consumption

Two Rhode Island Red egg-laying lines have been divergently selected on residual food intake (low intake R- line, high intake R+ line) for 19 generations. In addition to direct response, correlated responses have altered several other traits such as carcass adiposity and lipid contents of several tissues, the R+ animals being leaner than the R- ones. In a search for the biological origin of the differences observed in fat deposit, the hepatic mRNA amounts of genes involved in lipid metabolism were investigated. No difference was found between lines for mRNA levels of ATP citrate-lyase, acetyl-CoA carboxylase, fatty acid synthase, malic enzyme and CCAAT/enhancer binding protein α, a transcription factor acting on several lipogenesis genes. The genes coding for stearoyl-CoA desaturase and apolipoprotein A1 displayed significantly lower mRNA levels in the R+ cockerels compared to the R-. All together these mRNA levels explained 40% of the overall variability of abdominal adipose tissue weight, suggesting an important role of both genes in the fatness variability

Several dystrophin-glycoprotein complex members are present in crude surface membranes but they are sodium dodecyl sulphate invisible in KCl-washed microsomes from mdx mouse muscle.

International audienceThe dystrophin-glycoprotein complex (DGC) is a large trans-sarcolemmal complex that provides a linkage between the subsarcolemmal cytoskeleton and the extracellular matrix. In skeletal muscle, it consists of the dystroglycan, sarcoglycan and cytoplasmic complexes, with dystrophin forming the core protein. The DGC has been described as being absent or greatly reduced in dystrophin-deficient muscles, and this lack is considered to be involved in the dystrophic phenotype. Such a decrease in the DGC content was observed in dystrophin-deficient muscle from humans with muscular dystrophy and in mice with X-linked muscular dystrophy (mdx mice). These deficits were observed in total muscle homogenates and in partially membrane-purified muscle fractions, the so-called KCl-washed microsomes. Here, we report that most of the proteins of the DGC are actually present at normal levels in the mdx mouse muscle plasma membrane. The proteins are detected in dystrophic animal muscles when the immunoblot assay is performed with crude surface membrane fractions instead of the usually employed KCl-washed microsomes. We propose that these proteins form SDS-insoluble membrane complexes when dystrophin is absent

Messenger RNA levels and transcription rates of hepatic lipogenesis genes in genetically lean and fat chickens

Levels of body fat content in commercial meat chickens have prompted research in order to control the development of this trait. Based on experimentally selected divergent lean and fat lines, many studies have shown that liver metabolism has a major role in the fatness variability. In order to identify which genes are involved in this variability, we investigated the expression of several genes implicated in the hepatic lipid metabolism. The studied genes code for enzymes of fatty acid synthesis [ATP citrate-lyase (ACL), acetyl-CoA carboxylase (ACC), fatty acid synthase (FAS), malic enzyme (ME), stearoyl-CoA desaturase (SCD1)], for an apolipoprotein [apolipoprotein A1 (APOA1)], and for the CCAAT/enhancer binding protein α (C/EBPα), which is a transcription factor implied in the regulation of several genes of lipid metabolism. The results show that the fat-line chickens display significantly higher hepatic transcription rates and mRNA levels than the lean-line chickens for the ACL, ME and APOA1 genes. This suggests that these genes could be responsible for the phenotypic fatness variability

The biocontrol bacterium Pseudomonas fluorescens Pf29Arp strain affects the pathogenesis-related gene expression of the take-all fungus Gaeumannomyces graminis var. tritici on wheat roots

The main effects of antagonistic rhizobacteria on plant pathogenic fungi are antibiosis, fungistasis or an indirect constraint through the induction of a plant defence response. To explore different biocontrol mechanisms, an in vitro confrontation assay was conducted with the rhizobacterium Pseudomonas fluorescens Pf29Arp as a biocontrol agent of the fungus Gaeumannomyces graminis var. tritici (Ggt) on wheat roots. In parallel with the assessment of disease extension, together with the bacterial and fungal root colonization rates, the transcript levels of candidate fungal pathogenicity and plant-induced genes were monitored during the 10-day infection process. The bacterial inoculation of wheat roots with the Pf29Arp strain reduced the development of Ggt-induced disease expressed as attack frequency and necrosis length. The growth rates of Ggt and Pf29Arp, monitored through quantitative polymerase chain reaction of DNA amounts with a part of the Ggt 18S rDNA gene and a specific Pf29Arp strain detection probe, respectively, increased throughout the interactions. Bacterial antagonism and colonization had no significant effect on root colonization by Ggt. The expression of fungal and plant genes was quantified in planta by quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction during the interactions thanks to the design of specific primers and an innovative universal reference system. During the early stages of the tripartite interaction, several of the fungal genes assayed were down-regulated by Pf29Arp, including two laccases, a β-1,3-exoglucanase and a mitogen-activated protein kinase. The plant host glutathione-S-transferase gene was induced by Ggt alone and up-regulated by Pf29Arp bacteria in interaction with the pathogen. We conclude that Pf29Arp antagonism acts through the alteration of fungal pathogenesis and probably through the activation of host defences

Etude de la réponse neuronale dans un modèle d'asphyxie cérébrale chez le rat nouveau-né (influence d'une hyperbilirubinémie associée)

L'hypoxie cérébrale, par sa fréquence et ses effets délétères, demeure un important facteur de risque en période périnatale. Les effets d'une hypoxie transitoire ont été évalués à un stade où le cerveau est très immature lorsque sa plasticité est optimale. Des rats de 1 jour ont été exposés pendant 20 mn, à 100% d'azote. Les lésions cérébrales ont été recherchées dans différentes structures par morphométrie et comptage cellulaire. Les caractéristiques de la mort cellulaire ont été évaluées par analyse de la morphologie nucléaire, la fragmentation d'ADN et par l'expression immunohistochimique de protéines spécifiques. Une exploration en IRM de diffusion et la mesure régionale de l'activité de la cytochrome oxydase ont été utilisées en vue d'une approche plus fonctionnelle. Les lésions cérébrales sont apparues au 4ème jour après réoxygénation et étaient d'abord associées aux manifestations d'une nécrose. Le maximum des dommages est atteint vers 6- 7ème jours, avec un pic d' apoptose reflété par la condensation et la fragmentation de l' ADN ainsi que la surexpression de protéines pro-apoptotiques telles que p53, Dax et la caspase 3. Ces caractéristiques sont très proches de l'apoptose physiologique observée dans le cerveau de rat nouveau-né. Par la suite, une apparente récupération morphologique a été mise en évidence, tandis que des déficits fonctionnels persistaient à long-terme. Le but ultime de ces études étant de contribuer au développement de nouvelles stratégies de neuroprotection, l'influence d'un conditionnement par 10 mn d'hypoxie réalisée 6 heures avant l'exposition habituelle ainsi que l'effet d'une hypothermie à 26ʿC ont été testés. Les résultats ont montré une protection totale des neurones, le conditionnement étant spécifiquement associé à une surexpression de protéines de survie telles que Dcl-2. Par ailleurs, un prétraitement par un antagoniste des récepteurs NMDA, le MK801, a seulement permis de retarder l'apparition des lésions. La sensibilité à l'hypoxie étant dépendante de l'état maturationnel du cerveau, une étude a été entreprise sur des animaux âgés de 7 jours, Les résultats ont montré que les dommages cérébraux étaient plus importants et plus précoces que dans le modèle précédent, et qu'ils étaient la conséquence d'un processus nécrotique. Dans ces conditions, le MK801 était capable de protéger les neurones. Un accident hypoxique cérébral peut être associé à une hyperbilirubinémie, une situation fréquemment rencontrée en néonatologie. Une injection intrapéritonéale de bilirubine chez le rat de 1 jour, associée ou non à une agression hypoxique, a seulement provoqué un ictère physiologique sans répercussions cérébrales. Ce modèle in vivo n'ayant pas permis l'induction d'un ictère nucléaire, une statégie in vitro a été développée. Sur un modèle de culture de neurones issus d'embryons de rats de 14 jours, les effets de la bilirubine non conjuguée ont été évalués sur la viabilité cellulaire, le métabolisme énergétique et la synthèse protéique. La bilirubine a induit une mort neuronale retardée qui peut être évitée en présence d'un inhibiteur de la synthèse protéique, la cycloheximide, et présente les caractéristiques de l'apoptose. Enfin, l'association de l'hypoxie à la bilirubine a cumulé les effets délétères sur les neurones in vitro, et l'utilisation d'inhibiteurs sélectifs des récepteurs du glutamate suggère que la neurotoxicité de la bilirubine est médiée par les récepteurs NMDA.NANCY1-SCD Pharmacie-Odontologie (543952101) / SudocSudocFranceF

Gaeumannomyces graminis var. tritici polymorphism and dynamics

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Genetic evidence for differentiation of Ggt populations into two major clades

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Ggt genetic diversity and development of detection method to test the competition between strains on wheat roots

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The biocontrol bacterium Pseudomonas fluoresens Pf29Arp strain affects the pathogenesis-related gene expression of the take-all fungus Gaeumannomyces graminis var. tritici on wheat roots

International audienceAntagonistic rhizobacteria can act on plant pathogenic fungi through antibiosis, fungistasis, or induction of a plant defense response. To explore different biocontrol mechanisms, an in vitro confrontation assay was conducted with the rhizobacterium Pseudomonas fluorescens Pf29Arp as a biocontrol agent of the fungus Gaeumannomyces graminis var. tritici (Ggt) on wheat roots. During the 10-day infection process, the disease extension, the bacterial and fungal root colonization rates, and the transcript levels of candidate fungal pathogenicity genes were monitored. The development of the Ggt-induced disease (attack frequency and necrosis length) was reduced in Pf29Arp-inoculated wheat roots. Throughout the interactions, the growth rates of Pf29Arp increased and the bacterial antagonism and colonization had no significant effect on root colonization by Ggt. The expression of fungal genes was quantified in planta by quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction and an innovative universal reference system. During the early stages of the tripartite interaction, several of the fungal genes assayed were down-regulated by Pf29Arp, including two laccases, a β-1, 3-exoglucanase, and a mitogen-activated protein kinase. We conclude that Pf29Arp antagonism acts through the alteration of fungal pathogenesis

Messenger RNA levels and transcription rates of hepatic lipogenesis genes in genetically lean and fat chickens

Levels of body fat content in commercial meat chickens have prompted research in order to control the development of this trait. Based on experimentally selected divergent lean and fat lines, many studies have shown that liver metabolism has a major role in the fatness variability. In order to identify which genes are involved in this variability, we investigated the expression of several genes implicated in the hepatic lipid metabolism. The studied genes code for enzymes of fatty acid synthesis [ATP citrate-lyase (ACL), acetyl-CoA carboxylase (ACC), fatty acid synthase (FAS), malic enzyme (ME), stearoyl-CoA desaturase (SCD1)], for an apolipoprotein [apolipoprotein A1 (APOA1)], and for the CCAAT/enhancer binding protein $\alpha$ (C/EBP$\alpha$), which is a transcription factor implied in the regulation of several genes of lipid metabolism. The results show that the fat-line chickens display significantly higher hepatic transcription rates and mRNA levels than the lean-line chickens for the ACL, ME and APOA1 genes. This suggests that these genes could be responsible for the phenotypic fatness variability.Niveaux d'ARNm et taux de transcription hépatiques de gènes de la lipogénèse chez des poulets génétiquement gras et maigres. L'engraissement excessif du poulet de chair a conduit à développer des recherches afin de maîtriser ce caractère défavorable. De nombreuses études, effectuées sur des lignées expérimentales de poulets gras et maigres obtenues par sélection divergente, ont montré que le métabolisme hépatique joue un rôle majeur dans la variabilité de l'état d'engraissement. Dans le but d'identifier les gènes impliqués dans cette variabilité, le niveau d'expression hépatique de différents gènes impliqués dans le métabolisme des lipides a été analysé. Les gènes étudiés codent pour des enzymes de la synthèse des acides gras [ATP citrate-lyase (ACL), acétyl-CoA carboxylase (ACC), synthase des acides gras (FAS), enzyme malique (ME), stéaroyl-CoA désaturase (SCD1)], pour une apolipoprotéine [apolipoprotéine A1 (APOA1)], et pour C/EBP$\alpha$ (CCAAT/enhancer binding protein $\alpha$), un facteur de transcription régulant plusieurs gènes du métabolisme des lipides. Les résultats montrent que les poulets de la lignée grasse présentent des taux de transcription et des niveaux de messagers hépatiques des gènes ACL, EM et APOA1 significativement plus élevés que ceux de la lignée maigre. Ce résultat suggère que ces gènes pourraient être responsables de la variabilité d'engraissement observée