ОСТРАЯ ТОКСИЧНОСТЬ СУПРАМОЛЕКУЛЯРНЫХ КОМПЛЕКСОВ ФЕНБЕНДАЗОЛА, ПОЛУЧЕННЫХ ПО МЕХАНОХИМИЧЕСКОЙ ТЕХНОЛОГИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АДРЕСНОЙ ДОСТАВКИ DRUG DELIVERY SYSTEM

Objective of research: studying of acute toxicity of supramolecular complexes of Fenbendazole developed using chemical mechanical technology in comparison with the substance of preparation injected to the stomach of white mice and rats. Materials and methods: The research of parameters of acute toxicity of the supramolecular complexes of Fenbendazole was conducted according to «Guidelines for experimental (pre-clinical) studies of new pharmaceutical compounds», and other rules. Preparations were injected to the stomach of white rats and mice of both gender with the body mass 160–180 and 18–20 g. at a single dose 7 000, 10 000, 15 000 and 20 000 mg/ kg, respectively. Each dose was investigated on 6 white rats and 10 white mice. Within 14 days we observed the general health status and behavior of animals, symptoms of intoxication and eventual death. We also conducted postmortem examinations of the fallen animals. The parameters of acute toxicity were determined by the method of Litchfield J. and Wilcoxon F. (M.D. Belen’ky, 1963). Results and discussion: It was not possible to detect LD50 in supramolecular complex of Fenbendazole and the base  drug Fenbendazole due to the low toxicity. The maximum endurable dose of supramolecular complex no. 2 was 10 000 mg/kg, LD50 -value in supramolecular complex of Fenbendazole no. 2 at injection to the stomach of white mice and rats was 20 000 mg/kg.Цель исследования – изучение острой токсичности супрамолекулярных комплексов фенбендазола, полученных по механохимической технологии в сравнении с субстанцией препарата при введении в желудок белым мышам и крысам. Материалы и методы. Изучение параметров острой токсичности супрамолекулярных комплексов с фенбендазолом проводили согласно «Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» и других правил. Препараты вводили подопытным белым крысам и мышам обоего пола массой тела 160–180 и 18–20 г соответственно однократно в желудок в дозах 7 000, 10 000, 15 000 и 20 000 мг/кг по препарату. Исследование каждой дозы проводили на 6 белых крысах и 10 белых мышах. В течение 14 сут наблюдали за общим состоянием и поведением животных, проявлением симптомов интоксикации и возможной гибелью. Проводили патологоанатомическое вскрытие павших животных. Показатели острой токсичности определяли по Литчфилду и Уилкоксону (М. Д. Беленький, 1963). Результаты и обсуждение. ЛД50 супрамолекулярного комплекса фенбендазола и базового препарата – фенбендазола установить не удалось из-за низкой токсичности. Максимально переносимая доза супрамолекулярного комплекса № 2 составила 10 000 мг/ кг, ЛД50 супрамолекулярного комплекса с фенбендазолом № 2 при введении в желудок белым мышам и крысам – 20 000 мг/кг

ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОТРОПНОЙ АКТИВНОСТИ СУПРАМОЛЕКУЛЯРНОГО КОМПЛЕКСА ФЕНБЕНДАЗОЛА

The purpose of the research is to study the immunotoxic properties of the supramolecular complex of fenbendazole (CMF).Materials and methods. The study of the immunotoxic properties of SMF was performed using the agglutination reaction and delayed-type hypersensitivity. In each experimental group, there were 7–8 CBA × C57BL / 6 mice weighing 16–18 g. The CMF was administered once intragastrically at a therapeutic dose of 20 mg/kg for the active substance, in a tenfold dose – 200 mg/kg, the basic drug – fenbendazol asked in a tenfold dose of 20 mg/kg. Control groups of animals received starch paste. Then the mice were immunized intraperitoneally with a 3 % suspension of sheep erythrocytes (test antigen) and distributed into 8 groups. The effect of drugs on antibody production was determined in the hemagglutination reaction, the antibody titer in the serum in the microvariant of the direct hemagglutination reaction with the calculation of the reaction index. The effect of the drug on cellular immunity was established in a delayed-type hypersensitivity reaction (DTH) to sheep erythrocytes.Results and discussion. The introduction of the tested drugs had no inhibitory effect on antibody production in mice of the experimental groups: 6.5±0.22; 6.17±0.47 and 7.75±0.25 (log2) compared with the control – 7.67±0.21 (log2). Reaction indices were respectively 0.85; 0,80 and 1,01. Oral administration of a single CMF in therapeutic (20 mg/kg) and in a tenfold therapeutic dose (200 mg/kg) did not affect the cellular level of immunity. The shifts in the inflammatory response index in animals were 9.05±3.47 and 10.05±2.25% respectively. The introduction of the basic drug stimulated the reaction of HRT, which was manifested by an increase in the inflammation index (21.06±3.32%) compared with the control group (9.27±3.91%).Цель исследований: изучение иммунотоксических свойств супрамолекулярного комплекса фенбендазола (СМФ).Материалы и методы. Изучение иммунотоксических свойств СМФ проводили с применением реакции агглютинации и гиперчувствительности замедленного типа. В каждой опытной группе было по 7–8 мышей линии СВА×С57BL/6 массой 16–18 г. СМФ вводили однократно внутрижелудочно в терапевтической дозе 20 мг/кг по действующему веществу, в десятикратной дозе – 200 мг/кг, базовый препарат – фенбендазол задавали в десятикратно увеличенной дозе – 20 мг/кг. Контрольные группы животных получали крахмальный клейстер. Затем мышей иммунизировали интраперитонеально 3%-ной взвесью эритроцитов барана (тест-антиген) и распределили на 8 групп. Влияние препаратов на антителообразование определяли в реакции гемагглютинации, титр антител в сыворотке крови – в микроварианте прямой реакции гемагглютинации с вычислением индекса реакции. Влияние препарата на клеточный иммунитет устанавливали в реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) к ЭБ.Результаты и обсуждение. Введение испытуемых препаратов не оказало угнетающего влияния на антителогенез у мышей опытных групп: 6,5±0,22; 6,17±0,47 и 7,75±0,25 (log2) по сравнению с контролем – 7,67±0,21 (log2). Индексы реакции составили соответственно 0,85; 0,80 и 1,01. Пероральное однократное введение СМФ в терапевтической (20 мг/кг) и в десятикратной терапевтической дозе (200 мг/кг) не оказывало влияния на клеточное звено иммунитета. Сдвиги индекса реакции воспаления у животных составили соответственно 9,05±3,47 и 10,05±2,25%. Введение базового препарата стимулировало реакцию ГЗТ, что проявилось увеличением индекса воспаления (21,06±3,32%) по сравнению с контрольной группой (9,27±3,91%)

Оценка метода конфокальной лазерной эндомикроскопии для диагностики альвеолярного протеиноза

Introduction. Probe-based confocal laser endomicroscopy (pCLE) of distal airways is a new technology allowing visualization of cells and structures that have autofluorescence. Endomicroscopic features of a number of rare lung diseases including pulmonary alveolar proteinosis (PAP) has not been yet investigated. The purpose of the study was to describe endomicroscopic features of PAP before and after the whole lung lavage (WLL). Methods. pCLE was performed during bronchoscopy in 6 PAP patients before and after the WLL. In certain lung segments, pCLE was done under the HRCT control. More than 1300 endomicroscopic images have been evaluated using a semiquantitative method. Results. We found floating fluorescent amorphous aggregates sticking with alveolar macrophages in all the patients. These changes reduced after the WLL. pCLE allowed to reveal PAP characteristic features not only in lung segments with «crazy paving» HRCT sign but also in lung zones without any HRCT changes. Conclusions. pCLE can detect specific PAP features both at presence and absence of HRCT signs that confirms diffuse injury of the lung parenchyma. pCLE could be a helpful tool for diagnosis and assessment of treatment efficacy in patients with PAP.Актуальность. Конфокальная лазерная эндомикроскопия нижних дыхательных путей (КЛЭМ) – новая технология, позволяющая визуализировать клетки и структуры, обладающие свойством аутофлюоресценции. Эндомикроскопическая картина ряда редких заболеваний легких, включая альвеолярный протеиноз (АП), до настоящего времени остается неизученной.Цель. Определение эндомикроскопических особенностей АП до и после тотального бронхоальвеолярного лаважа (тБАЛ).Материалы и методы. КЛЭМ выполнялась во время бронхоскопии пациентам (n = 6), страдающим АП, до и после тБАЛ. В определенных легочных сегментах КЛЭМ производилась под контролем компьютерной томографии высокого разрешения (КТВР). Проводилась полуколичественная оценка внутриальвеолярных включений на #≥ 1 300 качественных эндомикроскопических изображениях.Результаты. У всех пациентов обнаружены следующие изменения: флотирующие флюоресцентные аморфные массы, слипающиеся в просвете альвеол в конгломераты с альвеолярными макрофагами. Эти признаки становились менее выраженными после тБАЛ. При КЛЭМ выявлены характерные для АП альвеолярные включения не только в сегментах в виде «булыжной мостовой», но также и в участках без каких-либо изменений на КТВР.Выводы. При помощи КЛЭМ у больных АП выявляются характерные признаки заболевания как при наличии, так и в отсутствие изменений на КТВР, что свидетельствует о диффузном поражении паренхимы легких. КЛЭМ – полезный инструмент для диагностики и оценки эффективности лечения пациентов с АП

ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОМБИНИРОВАННОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ НИКЛОЗАМИДА ПРОТИВ АНОПЛОЦЕФАЛЯТ РАЗНЫХ ВИДОВ И РАЗНОГО ВОЗРАСТА

Effect of Vigisox, Praziquantel, Fenbendazole, Albendazole and Niclozamide at the doses of 60, 3, 10, 10 and 100 mg/kg respectively applied against Moniezia spp. of different ages in sheep spontaneously infected with Moniezia expansa and M. benedeni is studied. Efficacy of drugs applied against mature Moniezia spp., was the following: Vigisox, Niclozamide and Praziquantel – 100 %, Albendazole – 88, Fenbendazole – 84 %, and against immature Moniezia spp.: Vigisox, Niclozamide – 89,3 %, Praziquantel – 100, Albendazole – 75 and Fenbendazole – 64,3 % respectively. The results shown a non significant difference in efficacy of Vigisox applied against various types of Anoplocephala spp. The drug at a dose of 60 mg/kg has shown a 97,9 % efficacy against M. expansa, 97,5 % – M. benedeni, 98,9 % – Thysaniezia giardi. While conducting preimaginal dehelminthizations of animals it is necessary to apply anthelmintics taking into account their effect on immature Moniezia spp. Изучено действие вигисокса, празиквантела, фенбендазола, альбендазола и никлозамида в дозах соответственно 60, 3, 10, 10 и 100 мг/кг против мониезий разного возраста на овцах, спонтанно инвазированных Moniezia expansa и M. benedeni. Эффективность против половозрелых Moniezia spp. составила вигисокса, никлозамида и празиквантела 100 %, альбендазола 88,0 и фенбендазола 84,0 %, а против неполовозрелых соответственно 89,3 %, 89,3, 100, 75 и 64,3 %. Получена незначительная разница в эффективности вигисокса против аноплоцефалят разных видов. Препарат в дозе 60 мг/кг проявил эффективность, равную против M. expansa 97,9 %, M. benedeni 97,5 и Thysaniezia giardi 98,9 %. Для проведения преимагинальных дегельминтизаций животных целесообразно применять антигельминтики с учетом их действия против неполовозрелых мониезий.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ВИГИСОКСА ПРОТИВ ОСНОВНЫХ НЕМАТОДОЗОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ПРОВЕДЕНИИ КОМИССИОННЫХ И ПРОИЗВОДСТВЕННЫХ ИСПЫТАНИЙ

In commission testing vigisox showed 100 % efficacy against gastrointestinal strongylatosis at the dose of 60 mg/kg bw in cattle. Efficacy of vigisox against tri- chocephalosis of cattle was 98,32 %. In field experiments vigisox showed 100 % efficacy against Nematodirus spp., 99,2 % against gastrointestinal strongylatosis of cattle.При комиссионном испытании установлена 100%- ная эффективность вигисокса в дозе 60 мг/кг при стронгилятозах пищеварительного тракта крупного рогатого скота. Эффективность вигисокса при трихоцефалезе молодняка крупного рогатого скота состави- ла 98,32 %. При производственных испытаниях вигисокса при нематодозах молодняка крупного рогатого скота была установлена высокая эффективность ви- гисокса и хорошая переносимость животными. Получена 100%-ная эффективность вигисокса в дозе 60 мг/кг при нематодирозе и 99,2%-ная - при других желудочно-кишечных стронгилятозах телок

Эффекты ингаляционного и внутривенного введения аллогенных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга в блеомицин-индуцированной модели легочного фиброза у кроликов

Aim: to perform a comparative analysis of the effi cacy of the inhaled and intravenous delivery of equivalent doses of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSCs) in rabbits according to the standard model of bleomycin pulmonary fi brosis.Materials and methods. After bronchoscopic instillation of bleomycin, 5 rabbits received intravenous transplantation of 2 × 106 allogeneic BMMSCs, other 5 rabbits – 2 × 107 MSCs inhaled via compressor nebulizer; control healthy and bleomycin group included 5 animals each.Results. Both groups treated with BMMSCs had a signifi cantly lower Ashcroft fi brosis index than the bleomycin control group. Expression of collagen in lung tissue in all groups with bleomycin injury was superior to healthy controls, but in animals underwent intravenous BMMSC transplantation collagen score was 0.74 points, and in inhaled treated group – 0.51 points, while in bleomycin controls – 2.1 point. Levels of TNF-α and TGF-β1 in BAL fl uids tended to decrease in treatment groups, but did not differ signifi cantly from control. A similar picture was observed in the cytological analysis of BAL.Conclusion. In general, both methods of delivering of BMMSCs to the lungs demonstrated similar therapeutic effects in inhibiting the development of experimental fi brosis, indicating that both intravenous and inhalational way of introduction can be used for subsequent clinical studies. Проведен сравнительный анализ эффективности ингаляционного и внутривенного пути доставки эквивалентных доз мезенхимальных стромальных клеток костного мозга у кроликов на стандартной модели блеомицинового легочного фиброза. После бронхоскопической инсталляции блеомицина в заднюю правую долю 5 кроликов получили внутривенную трансплантацию 2 × 106 аллогенных МСК, 5 – 2 × 107 МСК ингаляционно через компрессорный небулайзер; по 5 животных использовались в качестве здорового и блеомицинового контроля без лечения.Результаты. Обе группы, получавшие лечение МСК, имели достоверно более низкий индекс фиброза по морфометрической шкале Эшкрофта, чем контрольная группа блеомицинового фиброза. Экспрессия коллагена в ткани легких была существенно выше во всех группах с блеомициновой травмой, но у животных, подвергшихся внутривенной трансплантации МСК, она составила 0,79 балла, а при ингаляционном введении – 0,51 балла, тогда как группа блеомицина без лечения – 2,1 балла. Уровни TNF-α и TGF-β1в жидкости БАЛ имели тенденцию к уменьшению в группах лечения, но достоверно не различались от контроля. Похожая картина имела место при цитологическом анализе БАЛ.Выводы. В целом оба метода доставки клеточного материала в легкие продемонстрировали сходные терапевтические эффекты в отношении сдерживания развития экспериментального фиброза, существенно не отличаясь между собой, что свидетельствует о возможности использования как внутривенного, так и ингаляционного пути введения для последующих клинических исследований.

ACUTE TOXICITY OF SUPRAMOLECULAR ANTHELMINTIC COMPLEXES OF FENBENDAZOLE DEVELOPED BY CHEMICAL MECHANICAL TECHNOLOGY USING THE DRUG DELIVERY SYSTEM

Objective of research: studying of acute toxicity of supramolecular complexes of Fenbendazole developed using chemical mechanical technology in comparison with the substance of preparation injected to the stomach of white mice and rats. Materials and methods: The research of parameters of acute toxicity of the supramolecular complexes of Fenbendazole was conducted according to «Guidelines for experimental (pre-clinical) studies of new pharmaceutical compounds», and other rules. Preparations were injected to the stomach of white rats and mice of both gender with the body mass 160–180 and 18–20 g. at a single dose 7 000, 10 000, 15 000 and 20 000 mg/ kg, respectively. Each dose was investigated on 6 white rats and 10 white mice. Within 14 days we observed the general health status and behavior of animals, symptoms of intoxication and eventual death. We also conducted postmortem examinations of the fallen animals. The parameters of acute toxicity were determined by the method of Litchfield J. and Wilcoxon F. (M.D. Belen’ky, 1963). Results and discussion: It was not possible to detect LD50 in supramolecular complex of Fenbendazole and the base  drug Fenbendazole due to the low toxicity. The maximum endurable dose of supramolecular complex no. 2 was 10 000 mg/kg, LD50 -value in supramolecular complex of Fenbendazole no. 2 at injection to the stomach of white mice and rats was 20 000 mg/kg

STUDY OF THE IMMUNOTROPIC ACTIVITY OF THE SUPRAMOLECULAR COMPLEX OF FENBENDAZOLE

The purpose of the research is to study the immunotoxic properties of the supramolecular complex of fenbendazole (CMF).Materials and methods. The study of the immunotoxic properties of SMF was performed using the agglutination reaction and delayed-type hypersensitivity. In each experimental group, there were 7–8 CBA × C57BL / 6 mice weighing 16–18 g. The CMF was administered once intragastrically at a therapeutic dose of 20 mg/kg for the active substance, in a tenfold dose – 200 mg/kg, the basic drug – fenbendazol asked in a tenfold dose of 20 mg/kg. Control groups of animals received starch paste. Then the mice were immunized intraperitoneally with a 3 % suspension of sheep erythrocytes (test antigen) and distributed into 8 groups. The effect of drugs on antibody production was determined in the hemagglutination reaction, the antibody titer in the serum in the microvariant of the direct hemagglutination reaction with the calculation of the reaction index. The effect of the drug on cellular immunity was established in a delayed-type hypersensitivity reaction (DTH) to sheep erythrocytes.Results and discussion. The introduction of the tested drugs had no inhibitory effect on antibody production in mice of the experimental groups: 6.5±0.22; 6.17±0.47 and 7.75±0.25 (log2) compared with the control – 7.67±0.21 (log2). Reaction indices were respectively 0.85; 0,80 and 1,01. Oral administration of a single CMF in therapeutic (20 mg/kg) and in a tenfold therapeutic dose (200 mg/kg) did not affect the cellular level of immunity. The shifts in the inflammatory response index in animals were 9.05±3.47 and 10.05±2.25% respectively. The introduction of the basic drug stimulated the reaction of HRT, which was manifested by an increase in the inflammation index (21.06±3.32%) compared with the control group (9.27±3.91%)

Concerted Modification of Flowering Time and Inflorescence Architecture by Ectopic Expression of TFL1-Like Genes in Maize1[W][OA]

TERMINAL FLOWER1 (TFL1)-like genes are highly conserved in plants and are thought to function in the maintenance of meristem indeterminacy. Recently, we described six maize (Zea mays) TFL1-related genes, named ZEA CENTRORADIALIS1 (ZCN1) to ZCN6. To gain insight into their functions, we generated transgenic maize plants overexpressing their respective cDNAs driven by a constitutive promoter. Overall, ectopic expression of the maize TFL1-like genes produced similar phenotypes, including delayed flowering and altered inflorescence architecture. We observed an apparent relationship between the magnitude of the transgenic phenotypes and the degree of homology between the ZCN proteins. ZCN2, -4, and -5 form a monophylogenetic clade, and their overexpression produced the strongest phenotypes. Along with very late flowering, these transgenic plants produced a “bushy” tassel with increased lateral branching and spikelet density compared with nontransgenic siblings. On the other hand, ZCN1, -3, and -6 produced milder effects. Among them, ZCN1 showed moderate effects on flowering time and tassel morphology, whereas ZCN3 and ZCN6 did not change flowering time but still showed effects on tassel morphology. In situ hybridizations of tissue from nontransgenic plants revealed that the expression of all ZCN genes was associated with vascular bundles, but each gene had a specific spatial and temporal pattern. Expression of four ZCN genes localized to the protoxylem, whereas ZCN5 was expressed in the protophloem. Collectively, our findings suggest that ectopic expression of the TFL1-like genes in maize modifies flowering time and inflorescence architecture through maintenance of the indeterminacy of the vegetative and inflorescence meristems