Sistemas de expressão de proteínas recombinantes para o analise funcional de antígenos de Plasmodium falciparum e Plasmodium vivax: uma revisão

Introduction: Understanding the function of Plasmodium spp. Antigens involved in invasion of host cells is necessary to design vaccines. Different studies have generated recombinant proteins using heterologous expression systems, obtaining molecules similar to native ones. These advances are essential to develop strategies that block the infection of these pathogens. Objective: Describe the most important characteristics and methodological aspects of recombinant protein expression systems in functional studies of Plasmodium spp. Methodology: Descriptive review of studies published in Pubmed, Science Direct, Embase and Medline, between 2010 and 2020, that included recombinant systems in Escherichia coli cells, mammalian and cell-free, for functional studies of Plasmodium falciparum and Plasmodium vivax antigens. 70 original articles were reviewed, 58 met the established criteria. Results: Obtaining recombinant proteins by means of a prokaryotic system, with higher performance and low cost, has allowed functional studies of a significant number of antigens. Mammalian cell and cell free systems, which allow for post-translational modifications and adequate folding of molecules, are used to produce antigen libraries with native-like conformational structure. Conclusion: Plasmodium spp. antigen study involved in infection and development in target cells, requires adequate selection of the recombinant production method. The refinement of expression processes in prokaryotic, eukaryotic and in vitro systems, through genetic engineering and cell culture, will allow better yields and lower cost.Introducción: Para diseñar vacunas es necesario comprender la función de los antígenos de Plasmodium spp. involucrados en la invasión a células hospederas. Diferentes investigaciones han generado proteínas recombinantes utilizando sistemas de expresión heterólogos y así han obtenido moléculas semejantes a las nativas. Con estos avances se desarrollan estrategias que bloquean la infección de estos patógenos. Objetivo: Describir las características y los aspectos metodológicos más importantes de los sistemas de expresión de las proteínas recombinantes en estudios funcionales de Plasmodium spp. Metodología: Revisión descriptiva de estudios publicados en Pubmed, Science Direct, Embase y Medline, entre 2010 y 2020, que incluyeran sistemas recombinantes en células de Escherichia coli, de mamífero y sistemas libres de células, para estudios funcionales de antígenos de Plasmodium falciparum y Plasmodium vivax. Se revisaron 70 artículos originales y 58 cumplieron con los criterios establecidos. Resultados: Obtener proteínas recombinantes mediante un sistema procariota, de mayor rendimiento y bajo costo, ha permitido estudiar un número importante de antígenos. Los sistemas con células de mamífero y libres de células, que permiten modificaciones postraduccionales y plegamiento adecuado de moléculas, se usan para producir librerías de antígenos con estructura conformacional similar a la nativa. Conclusión: El estudio de los antígenos de Plasmodium spp. implicados en la infección y desarrollo de células diana requiere una adecuada selección del método de producción recombinante. El refinamiento de procesos de expresión en sistemas procariotas, eucariotas e in vitro, mediante ingeniería genética y cultivo celular, permitirá mejores rendimientos y menor costo.Introdução: Para desenvolver vacinas, é necessário entender a função dos antígenos de Plasmodium spp. envolvidos na invasão das células hospedeiras. As pesquisas têm gerado proteínas recombinantes utilizando sistemas de expressão heterólogos para obter moléculas similares às nativas. Com estes avanços, estratégias que bloqueiam a infecção destes patógenos estão sendo desenvolvidas. Objetivo: Descrever as características mais importantes e aspectos metodológicos dos sistemas de expressão de proteínas recombinantes em estudos funcionais de Plasmodium spp. Metodologia: Revisão descritiva dos estudos publicados em Pubmed, Science Direct, Embase e Medline, entre 2010 e 2020, que incluíram sistemas recombinantes em células de Escherichia coli, de mamífero e sistemas livres de células, para estudos funcionais dos antígenos de Plasmodium falciparum e Plasmodium vivax. Setenta artigos originais foram revisados e 58 preenchiam os critérios estabelecidos. Resultado: A obtenção de proteínas recombinantes usando um sistema procariótico, com maior rendimento e baixo custo, permitiu o estudo de um número significativo de antígenos. Sistemas de células mamíferas e sem células, que permitem modificações pós-tradução e dobramento adequado das moléculas, são usados para produzir bibliotecas de antígenos com uma estrutura semelhante à nativa. Conclusão: O estudo dos antígenos Plasmodium spp. envolvidos na infecção e no desenvolvimento das células-alvo requer uma seleção adequada do método de produção recombinante. O refinamento dos processos de expressão em sistemas procarióticos, eucarióticos e in vitro, através da engenharia genética e da cultura celular, permitirá melhores rendimentos e menores custos

Babesia bovis: Atualidade do desenvolvimento de uma vacina

Introduction. Babesia bovis is the main causal agent of babesiosis bovine, one important veterinary diseases transmitted by ticks worldwide. Conventional strategies to control this parasitosis have shown several limitations and therefore the development of a vaccine will be an appropriate strategy for prevention and treatment. Objective. To describe relevant aspects of B. bovis parasite's life cycle, the epidemiology, diagnosis, the application of different strategies used to control this parasitosis. In addition, potential points of intervention to develop a vaccine against this parasite has been discussed. Methodology. A search was made using keywords as "Babesia bovis AND lyfe cycle", "B. bovis vaccine and Vaccine candidates" and others. The most relevant studies published to date were completely revised. Results: The details of the B.bovis parasite biology and the molecular process used to cause disease in the host had not been describe in deep; explaining that the development of strategies for the control of this parasitosis have not been entirely efficient. Therefore, it is necessary to design new procedures, for example, to develop new generation vaccines based on a functional approach which improve the animal health conditions. Conclusions. Understand the B. bovise's life cycle complex will allow the host-parasite-tick interactions study and the identification of molecules involved in cell adhesion / invasion to evaluate its usefulness as a vaccine component that controls this parasitosis.Introducción. Babesia bovis es el principal agente causal de la babesiosis bovina, una importante enfermedad veterinaria transmitida por garrapatas a nivel mundial. Las estrategias convencionales para controlar esta parasitosis han presentado múltiples limitaciones por lo que el desarrollo de una vacuna basada en antígenos representa una estrategia apropiada para la prevención y el tratamiento. Objetivo. Describir los aspectos relevantes del ciclo de vida del parásito B. bovis, la epidemiología, diagnóstico y la aplicación de diferentes estrategias usadas para controlar esta parasitosis. Además, se discuten potenciales puntos de intervención para desarrollar una vacuna contra este parásito. Metodología. Se realizó una búsqueda en las bases de datos usando los términos: “Babesia bovis AND lyfe cycle”, “B. bovis vaccine and Vaccine candidates”, entre otras. Los estudios con mayor pertinencia publicados hasta la actualidad se revisaron completamente. Resultados: Los detalles de la biología de parásito B. bovis y el proceso molecular usado para ocasionar la enfermedad en el hospedador son poco conocidos, lo que explica que el desarrollado de estrategias para el control de esta parasitosis no hayan sido del todo eficientes. Por lo tanto, se requiere diseñar nuevas medidas, por ejemplo, desarrollar vacunas de nueva generación basadas en un enfoque funcional que permitan mejorar las condiciones de sanidad animal. Conclusiones. Comprender el complejo ciclo de vida de B. bovis permitirá estudiar las interacciones huésped-parásito-garrapata e identificar moléculas implicadas en la adhesión/invasión celular para evaluar su utilidad como componente de una vacuna que controle esta parasitosis.Introdução. Babesia bovis é o principal agente causador da babesiose bovina, uma importantedoença veterinária transmitida por carrapatos a nível mundial. As estratégias convencionais para ocontrole das parasitoses têm presentado múltiplas limitações pelo que o desenvolvimento de umavacina baseada em antígenos representa uma estratégia apropriada para a prevenção e o tratamento.Objetivo. Descrever os aspectos relevantes do ciclo de vida do parasita B. bovis, a epidemiologia, diagnostico e aplicação de diferentes estratégias usadas para o controle desta parasitose. Além disso, sãodiscutidos possíveis pontos de intervenção para o desenvolvimento de uma vacina contra o parasita.Metodologia. Uma pesquisa foi realizada nas bases de dados usando os termos: “Babesia bovis ANDlyfe cycle”, “B. bovis vaccine and Vaccine candidates”, entre outras. Os estudos mais relevantes publicados até o momento foram completamente revisados.Resultados. Os detalhes da biologia do parasita B. bovis e o processo molecular usado para causardoenças no hospedeiro é pouco conhecido, o que explica que o desenvolvimento de estratégias para ocontrole desta parasitose não foram completamente eficientes. Portanto, é necessário projetar novasmedidas, por exemplo, desenvolver vacinas de nova geração com base em uma abordagem funcionalque permita melhorar as condições de saúde animal.Conclusões. Compreender o complexo ciclo de vida de B. bovis permitirá estudar as interaçõeshospede–parasita–carrapatos e identificar moléculas envolvidas na adesão/invasão celular para avaliarsua utilidade como componente de uma vacina que controla essa parasitose

Proteínas importantes para la invasión de Babesia bovis a las células huésped

Introduction. Bovine babesiosis is caused by Apicomplexas parasites of the genus Babesia, Babesia bovis being the species associated with the most serious clinical conditions of the disease. B. bovis invasion into the bovine erythrocytes involves the interaction between the parasites merozoites molecules with host cell receptors. Therefore, knowing the proteins involved in the invasion process will enable understanding the parasite biology. Objective. To describe the important molecules involved in the B. bovis invasion process to bovine erythrocytes. Methodology. A search was made on NCBI, Medline, LILACS and SciELO databases using keywords as “Babesia bovis AND invasion process”, “MSA-1”, “RON2”, “AMA-1”, “moving junction”, “B. bovis AND Vaccine candidates”. 61 studies written in English describing the study for proteins that take place during invasion process which have been published until mayo were completely revised. Results. Given that the bovine erythrocyte invasion process is key for the pathogenesis of bovine babesiosis, a review was made where 3 proteins were found to be associated to the recognition and invasion processes of target cells: MSA-1, AMA-1 and RON2. However, the details at molecular level for the inter an intramolecular interaction have not yet been fully elucidated. Conclusions. Study the molecules involved in host-parasite interactions will allow understanding how the B. bovis invasion process to erythrocytes occurs and evaluating their future utility as a component of an effective control strategy for this parasitosis.Introducción. La babesiosis bovina es causada por parásitos Apicomplexa del género Babesia, siendo Babesia bovis la especie asociada con cuadros clínicos más graves de la enfermedad. La invasión de B. bovis a los eritrocitos bovinos implica la interacción entre moléculas de los merozoítos del parásito con receptores de las células huésped. Por ende, conocer las proteínas involucradas en este proceso supone un importante paso para entender la biología del parásito. Objetivo. Describir las principales moléculas implicadas en el proceso de invasión de B. bovis a eritrocitos bovinos. Metodología. Se realizó una búsqueda en NCBI, Medline, LILACS y SciELO usando los términos: “Babesia bovis AND invasion process”, “MSA-1”, “RON2”, “AMA-1”, “moving junction”, “B. bovis AND Vaccine candidates”. 61 publicaciones disponibles en inglés que describen el estudio de las anteriores proteínas y su participación en la invasión los cuales han sido publicados hasta mayo 2020 se revisaron completamente. Resultados: Siendo el proceso de invasión a eritrocitos bovinos clave para la patogénesis de la babesiosis bovina, se hizo una revisión donde se encontraron 3 proteínas de B. bovis que participan en el reconocimiento e invasión a las células diana: MSA-1, AMA-1 y RON2. Sin embargo, los detalles a nivel molecular para las interacciones inter e intramoleculares aún no se han dilucidado por completo. Conclusiones. Conocer las moléculas involucradas en las interacciones parásito-hospedero permitirá comprender cómo ocurre el proceso de invasión de B. bovis a los eritrocitos y así evaluar su futura utilidad como componente de una estrategia de control efectiva contra esta parasitosis

Revisão de estudos pré-clínicos de candidatos á vacina contra a malária causados por Plasmodium falciparum

Introduction. Malaria disease causes approximately 400,000 deaths by year, especially in children under 5 years, the search for an effective and safe vaccine, remains to be a challenge for researchers, however before starting the clinical phase studies, preclinical trials in animal models should provide safety and immunogenicity results that lead to effective protective responses. Objective. To review the main characteristics of the immune response and efficacy in pre-clinical studies of candidates for vaccine against malaria by Plasmodium falciparum. Methods. A descriptive review of the main preclinical studies of malaria vaccine candidates, based on subunits, attenuated parasites and multi-stage, multi-epitope vaccines, which have been carried out to evaluate immunogenicity and efficacy, is presented. This review was carried out based on the search of literature in electronic databases specialized in scientific research. 118 documents were found, of which 91 were selected and 17 were excluded because they did not meet the inclusion criteria, for a total of 74 references analyzed. Results. Many candidates for malaria vaccine caused by Plasmodium falciparum have reported promising results against homologous strains, however, given the challenge with heterologous strains, efficacy decreases, on the other hand, the lasting immune and protective response continues to be a key objective, becoming a priority. Conclusions. Preclinical studies in animal models are necessary before advancing to clinical phases, the evaluation of immunogenicity and efficacy is an essential aspect for the evaluation of vaccine candidates.Introducción. La malaria es una enfermedad que causa aproximadamente 400.000 muertes al año, especialmente en niños menores de 5 años; la búsqueda de una vacuna eficaz y segura sigue siendo un reto para los investigadores, sin embargo, antes de iniciar los estudios de fase clínica, los ensayos preclínicos en modelo animal deben brindar resultados de seguridad e inmunogenicidad que lleven a respuestas eficaces de protección. Objetivo. Revisar las principales características de la respuesta inmunológica y eficacia en estudios pre-clínicos de candidatos a vacuna contra la malaria por Plasmodium falciparum. Métodos. Revisión descriptiva de los principales estudios preclínicos de candidatos a vacuna contra la malaria, basados en subunidades, parásitos atenuados y vacunas multi-estadio, multi-epitope, que se han realizado para evaluar inmunogenicidad  y eficacia en modelo animal. Esta revisión se llevó a cabo a partir de la búsqueda de literatura en bases de datos electrónicas especializadas en investigación científica. Se encontraron 118 documentos, de los cuales se seleccionaron 91 y se excluyeron 17 por no cumplir con los criterios de inclusión, para un total de 74 referencias analizadas. Resultados. Muchos candidatos a vacuna contra la malaria causada por Plasmodium falciparum han reportado resultados prometedores contra cepas homologas, sin embargo, ante el reto con cepas heterólogas la eficacia disminuye, por otra parte, la respuesta inmune y protectiva duradera continúa siendo un objetivo clave, convirtiéndose en una prioridad. Conclusiones. Los estudios preclínicos en modelo animal son necesarios antes de avanzar a fases clínicas, la evaluación de inmunogenicidad y eficacia es un aspecto esencial para la evaluación de candidatos a vacuna.Introdução: A malária é uma doença que causa aproximadamente 400.000 óbitos por ano, principalmenteem crianças menores de 5 anos, a procura por uma vacina eficaz e segura, continua sendo um desafiopara os pesquisadores, porém, antes de iniciar os estudos de fase clínica, os testes pré-clínicos nomodelo animal devem fornecer resultados de segurança e imunogenicidade que levam a respostasefetivas de proteção.Objetivo: Verificar as principais características da resposta imune e eficácia em estudos pré-clínicos decandidatos à vacina contra a malária por Plasmodium falciparum.Métodos: Revisão descritiva dos principais estudos pré-clínicos de candidatos à vacina contra amalária, com base em subunidades, parasitas atenuados e vacinas de vários estágios e multiepítopo,que foram realizadas para avaliar a imunogenicidade e eficácia em modelos animais. Esta revisão foirealizada com base na pesquisa de literatura em bases de dados eletrônicas especializadas em pesquisa científica. Foram encontrados 118 documentos, dos quais 91 foram selecionados e 17 foramexcluídos por não atenderem aos critérios de inclusão, para um total de 74 referências analisadas.Resultados: Muitos candidatos à vacina contra a malária causada por Plasmodium falciparum relataram resultados promissores contra cepas homólogas, no entanto, diante do desafio com cepas heterólogas a eficácia diminui, por outro lado, a resposta imune e protetora duradoura continua sendo um objetivo fundamental, tornando-se uma prioridade. Conclusões: Estudos pré-clínicos em modelo animal são necessários antes de passar para as fases clínicas, aavaliação da imunogenicidade e eficácia é um aspecto essencial para a avaliação dos candidatos a vacina

Identification of Babesia bovis' protein binding regions to bovine erythrocytes

RESUMEN La babesiosis es una de las enfermedades veterinarias más importantes transmitidas por garrapatas que afecta principalmente a animales salvajes y domésticos, y recientemente es considerada como una zoonosis emergente que se distribuye en regiones tropicales y subtropicales alrededor del mundo. Babesia bovis, uno de los hemoprotozoarios responsable de la babesiosis bovina, es el agente más patógeno del género Babesia que causa un impacto negativo en la industria ganadera dada las altas tasas de morbimortalidad que genera. Las principales estrategias de control y tratamiento de la babesiosis se han centrado en el uso de quimioterapéuticos dirigidos contra el parásito o de acaricidas contra el vector. Sin embargo, ante la aparición de resistencia a esta clase de productos químicos, la vacunación con organismos vivos atenuados de B. bovis se ha convertido en el principal método de control de la infección. Aunque el uso de este tipo de vacunas ha estado asociado con niveles parciales de protección, éstas tienen importantes limitaciones como una vida útil corta, riesgo de reversión de la virulencia, contaminación con otros patógenos transmitidos por sangre, falla en la inducción de inmunidad protectiva contra diferentes cepas y la pérdida de inmunogenicidad, lo que ha limitado la comercialización de la vacuna. Por lo tanto, se requieren otras estrategias alternas para mejorar las condiciones de sanidad animal bovina. El conocimiento de la biología básica del parásito en relación con la caracterización de las moléculas que éste usa para invadir a sus células diana es esencial para diseñar una medida de control eficaz contra la enfermedad, como es el caso de las vacunas. Por ende, este proyecto se encaminó a identificar proteínas de B. bovis o regiones derivadas de ellas que tengan capacidad de unirse a los eritrocitos bovinos como alternativa para contribuir al conocimiento de su biología en relación con la interacción parásito-célula. Para ello, se realizó la predicción de proteínas importantes para la invasión del parásito a sus células diana mediante la exploración in silico de los datos de transcriptoma y proteoma de B. bovis, obteniendo como resultado las proteínas BbMSA-1, BbAMA-1 y BbRON2. Posteriormente, varias regiones bajo restricción funcional y con presencia de codones seleccionados negativamente en BbMSA-1, BbAMA-1 y BbRON2 fueron inferidas a través de análisis de selección natural, con el objetivo de elegir fragmentos idóneos (regiones o péptidos de 20 residuos) y evaluar así su capacidad para unirse a los eritrocitos bovinos. Los ensayos altamente sensibles de interacción proteína-célula y péptido-célula permitieron identificar varias regiones con capacidad de unión a eritrocitos bovinos y diferentes péptidos con alta capacidad de unión (HABP, del inglés High Activity Binding Peptide) a sus células diana para BbMSA-1: 42422 (39PEGSFYDDMSKFYGAVGSFD58), 42424 (91NALIKNNPMIRPDLFNATIV110) y 42426 (150TDIVEEDREKAVEYFKKHVY169); BbAMA-1: 42437 (100YMQKFDIPRNHGSGIYVDLG119), 42438 (120GYESVGSKSYRMPVGKSPVV139) y 42443 (302SPMHPVRDAIFGKWSGGSSV321); y BbRON2: 42918 (1218SFIMVKPPALHCVLKPVETL1237). Además, los análisis de predicción de la estructura terciaria y secundaria de las moléculas permitieron evidenciar que los HABPs 42422 y 42426 de MSA-1, así como 42437 y 42438 de AMA-1, son altamente helicoidales y contienen epítopes de células B y T, mientras que los HABPs 42424 de MSA-1 y 42918 de RON2 son no estructurados estando este último, localizado en una región intrínsecamente desordenada flanqueada por dos regiones helicoidales. Este es el primer estudio que analiza y describe las regiones mínimas (definidas en este estudio por componerse de 20 aminoácidos) implicadas en la unión de las proteínas MSA-1, AMA-1 y RON2 de B. bovis a su célula diana. En estudios futuros, se explorará el potencial antigénico de dichos péptidos durante la inmunización in vivo, y se evaluará su eficacia como potenciales candidatos a vacuna. (Texto tomado de la fuente)Babesiosis is one of the most important tick-borne veterinary diseases affecting both wild and domestic animals. Recently, it has been considered also as an emerging zoonosis distributed in tropical and subtropical regions around the world. Babesia bovis, the hemoprotozoa responsible for bovine babesiosis, is the most pathogenic agent in the Babesia genus causing a negative impact on the livestock industry related to the high morbidity and mortality rates it generates. The main control and treatment strategies for babesiosis have been focused on chemotherapeutics against the parasite or acaricides against the vector. However, the emergence of resistance against these chemicals have made vaccination with live atenuated B. bovis organisms the main infection control method. Although this type of vaccines has been associated with significant levels of protection, there are limitations such as a short shelf life, risk of virulence reversal, contamination with other blood-borne pathogens, failure to induce protective immunity against different strains and immunogenicity loss. Those restrictions have limited the vaccine commercialization making alternative strategies needed to improve bovine animal welfare. Knowledge of the parasite’s basic biology and the characterization of the molecules used to invade its target cells is essential to design an effective control measure against the disease. This project was thus aimed at identifying B. bovis proteins or protein-regions with the ability to bind to bovine erythrocytes (its target cell) to elucidate the parasite-cell interaction. For this, the prediction of parasite’s important proteins for the invasion to its target cells was carried out in silico by transcriptome and proteome data exploration, which led to selecting BbMSA-1, BbAMA-1 and BbRON2 proteins. Subsequently, several regions under functional restriction and presenting negatively selected codons in BbMSA-1, BbAMA-1 and BbRON2 were inferred through natural selection analysis to choose suitable fragments (20-mer peptide regions) to evaluate their ability to bind to bovine erythrocytes. Highly sensitive protein-cell and peptide-cell interaction assays allowed the identification of several binding regions to bovine erythrocytes and different High Activity Binding Peptides (HABPs) to their target cells; for BbMSA1: peptides 42422 (39PEGSFYDDMSKFYGAVGSFD58), 42424 (91NALIKNNPMIRPDLFNATIV110 ) and 42426 (150TDIVEEDREKAVEYFKKHVY169); for BbAMA-1: peptides 42437 (100YMQKFDIPRNHGSGIYVDLG119), 42438 (120GYESVGSKSYRMPVGKSPVV139) and 42443 (302SPMHPVRDAIFGKWSGGSSV321), and for BbRON2: peptide 42918 (1218SFIMVKPPALHCVLKPVETL1237). Tertiary and secondary structure prediction analysis showed that HABPs 42422 and 42426 of MSA-1, together with 42437 and 42438 of AMA-1 are highly helical and can contain epitopes for B and T cells. MSA-1 HABP 42424 is unstructured, while RON2 HABP 42918 is in an intrinsically disordered region flanked by two helical regions. This is the first study describing the minimal regions (defined here as being 20 aa long) involved in the binding of the B. bovis MSA1, AMA-1 and RON2 proteins to their target cell. Further studies should follow to explore the antigenic potential of these peptides by in vivo immunization, to assess their efficacy as potential anti-B. bovis vaccine candidates.DoctoradoDoctora en Biotecnologí

Fundamentos e aplicações biomédicas das principais tecnologias de sequenciamento: uma re-visão da literatura

Introduction. The purpose of sequencing is to determine the composition of the nucleotides present in DNA or RNA. Since the completion of the human genome project, several sequencing technologies such as Roche 454, SOLID, Illumina, Ion torrent, Pacbio and Oxford nanopore have emerged as tools for rapid sequencing, with greater precision and cost-efficiency, allowing the development of large-scale projects and the study of genes and genomes, along with the composition of microbiomes and the study of metabolic and genetic diseases that affect the population. Objective. To describe the foundations of the methods of DNA sequencing and their applications in the biomedical sciences. Methods. Descriptive review of the main strategies of first, second and third generation DNA sequencing and their application in the biomedical environment. This review was carried out by searching articles in electronic databases specialized in scientific research. A total of 118 papers were found, of which 6 were excluded as they did not meet the inclusion criteria and 112 were selected as meeting all the requirements. Conclusions. DNA and RNA sequencing has enabled advances in the study of biological organisms, the emergence of next-generation sequencing methods yielding a wealth of data, including fully sequenced genomes of various species, with extensive throughput, reduced time and cost-effectiveness that has led to the complete transformation of the life sciences, achieving unprecedented progress in genome analysis, assessment of microbial ecology and disease diagnosis.Introducción. La secuenciación tiene como finalidad determinar la composición de los nucleótidos presentes en el ADN o ARN. Desde la finalización del proyecto genoma humano, surgieron diversas tecnologías de secuenciación como Roche 454, SOLID, Illumina, Ion torrent, Pacbio y Oxford nanopore como herramientas para secuenciar rápidamente, con mayor precisión y costo-eficiencia, permitiendo el desarrollo de proyectos a gran escala y el estudio de genes y genomas, la composición de microbiomas, enfermedades metabólicas y enfermedades genéticas que afectan la población. Objetivo. Describir los fundamentos de los métodos de secuenciación de ADN y sus aplicaciones en las ciencias biomédicas. Métodos. Revisión descriptiva de las principales estrategias de secuenciación de ADN de primera, segunda y tercera generación y su aplicación en el entorno biomédico. Esta revisión se realizó a partir de la búsqueda de artículos en bases de datos electrónicas especializadas en investigación científica. Se encontraron 118 documentos, de los cuales se excluyeron 6 por no cumplir con los criterios de inclusión y se seleccionaron 112 por cumplir con todos los requisitos. Conclusiones. La secuenciación de ADN y ARN ha permitido avances en los estudios de organismos biológicos, el surgimiento de los métodos de secuenciación de siguiente generación arroja una gran cantidad de datos, incluidos genomas secuenciados completamente de varias especies, con un rendimiento extenso, tiempos reducidos y costo-eficiencia que lleva a la transformación por completo de las ciencias de la vida, logrando un progreso sin precedentes en el análisis de genomas, la evaluación de ecología microbiana y el diagnóstico de enfermedades.Introdução: o objetivo do sequenciamento é determinar a composição dos nucleotídeos presentes no DNA ou RNA. Desde a conclusão do projeto do genoma humano, surgiram diversas tecnologías de sequenciamento rápida como Roche 454, SOLiD, Illumina, Ion Torrent, PacBio e Oxford Nanopore, mais precisas e econômicas, que permitem o desenvolvimento de projetos de grande escala e estudo de genes e genomas, composição de microbiomas, doenças metabólicas e genéticas que afetam a popula-ção. Objetivo: descrever os fundamentos dos métodos de sequenciamento de DNA e suas aplicações nas ciências biomédicas. Métodos: revisão descritiva das principais estratégias de sequenciamento de DNA de primeira, segunda e terceira geração e sua aplicação no ambiente biomédico, a partir da busca de artigos em bases de dados eletrônicas especializadas em pesquisa científica. Foram encontrados 118 documentos, dos quais 6 foram excluídos por não atenderem aos critérios de inclusão e 112 fo-ram selecionados por atenderem a todos os requerimentos. Conclusões: o surgimento de métodos de sequenciamento de próxima geração rende uma riqueza de dados, incluindo genomas totalmente se-quenciados de várias espécies, com produção extensa, tempos reduzidos e eficiência de custo, levando à transformação completa das ciências da vida e alcançando um progresso sem precedentes no genoma análise, avaliação de ecologia microbiana e diagnóstico de doenças