Desarrollo de una sonda de hibridación molecular no radioactiva para la detección de Strawberry mottle virus en frutilla

The vegetative propagation of strawberries favors transmission of systemic pathogens, such as viruses, which are one of the main yield-limiting factors for this crop. More than 20 viruses have been described as infecting this species; one of the most frequent is the Strawberry mottle virus (SMoV), which is responsible for significant economic losses. SMoV is usually detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), given that serum is not available for serological tests. In this study, a non-radioactive molecular probe was developed for SMoV detection. The cDNA was synthesized by RT-PCR using specific primers designed from the 3'UTR region of the viral genome. The cloned cDNA segment was labeled and used as a probe. Six RNA extraction protocols were evaluated, and the modified cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) method showed the highest sensitivity level. Leaves at different phenological stages and petioles were evaluated; the highest reaction was observed in old leaves and in petioles.La propagación vegetativa del cultivo de frutilla favorece la transmisión de patógenos sistémicos, como es el caso de los virus, que constituyen uno de los principales factores limitantes. Se han descripto más de 20 virus que infectan esta especie; el Strawberry mottle virus (SMoV) es uno de los más frecuentes y responsable de importantes pérdidas económicas. Debido a la falta de antisuero disponible comercialmente para un diagnóstico serológico, el SMoV es detectado fundamentalmente mediante reacción en cadena de la polimerasa con transcripción reversa (RT-PCR). En este estudio se desarrolló una sonda de hibridación molecular no radioactiva para su detección. Se sintetizó cDNA con cebadores específicos diseñados a partir de la región 3' no codificante del genoma viral. El cDNA obtenido fue clonado, marcado y utilizado como sonda. Se evaluaron seis protocolos de extracción de ARN viral a partir de plantas infectadas, de los cuales el método de bromuro de cetiltrimetilamonio modificado (CTAB) fue el más eficiente. Se evaluaron hojas de diferentes estados fenológicos y pecíolos, y fueron las hojas viejas y los pecíolos los que mostraron mayor reacción

Detection of Bean yellow mosaic virus and Cucumber mosaic virus infecting gladiolus in Argentina

Entre los factores que afectan la producción de flores a nivel mundial, las enfermedades virales pueden ocasionar significativas pérdidas. Sin embargo, relativamente poco se sabe sobre la presencia de virus en especies ornamentales cultivadas en Argentina, y dicha información es esencial para el diseño de estrategias de manejo de enfermedades. En este artículo se informa por primera vez sobre la presencia de Bean yellow mosaic virus y Cucumber mosaic virus, subgrupo I,en gladiolo en el país. Ambos virus fueron identificados mediante microscopía electrónica, serología y transcripción reversa – reacción en cadena de la polimerasa

Pyrophagus tigrinus Remes Lenicov & Varela (Hemiptera: Delphacidae), nuevo vector del Mal de Río Cuarto virus (MRCV, Fijivirus) en condiciones experimentales

El Mal de Río Cuarto virus (MRCV), agente causal de la enfermedad más importante del maíz en la Argentina, es transmitido principalmente por Delphacodes kuscheli. La presencia de otros delfácidos en áreas con la virosis, permite suponer que éstos podrían tener un rol en su epidemiología. Pyrophagus tigrinus fue hallada por primera vez en 1997 en Jesús María (Córdoba) sobre cultivos de triticale afectados con el MRCV. El objetivo fue demostrar la capacidad de P. tigrinus para transmitir el MRCV a triticale en condiciones experimentales. Se inició la cría en condiciones controladas y se realizaron transmisiones a triticale, empleando el mismo cereal como fuente de inóculo. Los síntomas observados y el patrón electroforético del dsRNA viral se correspondieron con el del MRCV en transmisiones con D. kuscheli. Se observaron agregados de partículas virales en células floemáticas. La capacidad de P. tigrinus para transmitir el MRCV tiene importantes implicaciones en la epidemiología de esta enfermedad

Molecular characterization of a phytoplasma of the ash yellows group (16Sr VII-B) occurring in Artemisia annua and Conyza bonariensis weeds

En Sudamérica se han detectado y caracterizado fitoplasmas de diferentes grupos 16Sr. Entre éstos, se detectaron diferentes especies de plantas herbáceas. En Brasil, se reportaron los aislamientos EriWB y RPWB infectando Erigeron sp. y Catharanthus roseus, los que fueron asignados al nuevo subgrupo 16Sr VII-B. En la Argentina,el subgrupo 16Sr VII-C fue creado para incluir al fitoplasma ArAWB que infecta alfalfa (Medicago sativa). Nuevos aislamientos de fitoplasmas del grupo 16Sr VII se han detectado en Artemisia annua y Conyza bonariensis en la Argentina, mostrando típicos síntomas de “escoba de bruja”. El objetivo de este trabajo fue caracterizar molecularmente a estos aislamientos para clasificarlos y asociarlos a los fitoplasmas más relacionados. Se analizaron patrones de restricción (PCR-RFLP) del gen 16S de ARNr y se obtuvieron secuencias de tres aislamientos para realizar un análisis cladístico y poder determinar la similitud con otros fitoplasmas. Idénticos patrones de PCR-RFLP, la alta similitud de secuencias (99,9%) y el agrupamiento cladístico resultante asociaron a estos fitoplasmas presentes en malezas en Argentina (ArtWB), al subgrupo 16Sr VII-B. Estos aislamientos representan aislamientos geográficos del fitoplasma EriWB. Este trabajo revela la amplia distribución geográfica de los fitoplasmas del subgrupo 16Sr VII-B y su capacidad de infectar diferentes hospedantes