Molecular recognition of an acyl–enzyme intermediate on the lipase B from <i>Candida antarctica</i>

This investigation provides evidence of the acyl enzyme species involved in the interaction of R/Sketoprofen with the lipase B from Candida antarctica. The interaction between the profen and the enzyme was studied by in situ time-resolved ATR-FTIR under both static and transient conditions. Particularly, modulation excitation spectroscopy (MES) with phase sensitive detection (PSD) allowed us to univocally distinguish the signals belonging to the interaction between ketoprofen and the enzyme from the strong background signals. These experimental tools coupled with theoretical DFT analysis allowed us to propose various species derived from the interaction of ketoprofen with serine through H bonding (without reaction) and the acyl enzyme species (ester bond formation) which are the intermediates in the biocatalytic assisted esterification and hydrolysis using lipases.Centro de Investigación y Desarrollo en Ciencias AplicadasFacultad de Ciencias Exacta

Identificación de intermediario de reacción de la enzima lipasa B de candida antarctica

Las lipasas (EC 3.1.1.3, triacilglicerol hidrolasas) son enzimas hidrolíticas ampliamente usadas en numerosas reacciones y procesos industriales debido a su habilidad para catalizar diversas reacciones.Centro de Investigación y Desarrollo en Ciencias Aplicada

Estudios catalíticos y moleculares de la esterificación de ibuprofeno y ketoprofeno con glicerol

Se investigó la esterificación de ibuprofeno y ketoprofeno racémicos con glicerol catalizada por el biocatalizador comercial Novozym® 435. Las reacciones tipo “batch” se llevaron a cabo a una temperatura de 45°C, usando 2-propanol como solvente. Se estudiaron varias relaciones molares profeno:glicerol

Estudios catalíticos y moleculares de la esterificación de ibuprofeno y ketoprofeno con glicerol

Se investigó la esterificación de ibuprofeno y ketoprofeno racémicos con glicerol catalizada por el biocatalizador comercial Novozym® 435. Las reacciones tipo “batch” se llevaron a cabo a una temperatura de 45°C, usando 2-propanol como solvente. Se estudiaron varias relaciones molares profeno:glicerol.Centro de Investigación y Desarrollo en Ciencias Aplicada

Identificación de intermediario de reacción de la enzima lipasa B de candida antarctica

Las lipasas (EC 3.1.1.3, triacilglicerol hidrolasas) son enzimas hidrolíticas ampliamente usadas en numerosas reacciones y procesos industriales debido a su habilidad para catalizar diversas reacciones.Centro de Investigación y Desarrollo en Ciencias Aplicada

Identificación de intermediario de reacción de la enzima lipasa B de candida antarctica

Las lipasas (EC 3.1.1.3, triacilglicerol hidrolasas) son enzimas hidrolíticas ampliamente usadas en numerosas reacciones y procesos industriales debido a su habilidad para catalizar diversas reacciones.Centro de Investigación y Desarrollo en Ciencias Aplicada

Investigación de la resolución cinética eco-compatible de R/S-ketoprofeno

Se llevó a cabo la esterificación de R/S-ketoprofeno empleando metanol, etanol, 1- y 2-propanol como reactivos y solventes catalizada con el biocatalizador comercial Novozym® 435. Se estudió la interacción de los alcoholes con el biocatalizador mediante diversas técnicas espectroscópicas. Los resultados evidenciaron la disolución del soporte polimérico, la pérdida de proteína activa, la fuerte adsorción de los alcoholes, la modificación de la estructura secundaria de la proteína y el alisado de la estructura interna de las esferas de biocatalizador.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Investigación de la resolución cinética eco-compatible de R/S-ketoprofeno

Se llevó a cabo la esterificación de R/S-ketoprofeno empleando metanol, etanol, 1- y 2-propanol como reactivos y solventes catalizada con el biocatalizador comercial Novozym® 435. Se estudió la interacción de los alcoholes con el biocatalizador mediante diversas técnicas espectroscópicas. Los resultados evidenciaron la disolución del soporte polimérico, la pérdida de proteína activa, la fuerte adsorción de los alcoholes, la modificación de la estructura secundaria de la proteína y el alisado de la estructura interna de las esferas de biocatalizador.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Investigación de la resolución cinética eco-compatible de R/S-ketoprofeno

Se llevó a cabo la esterificación de R/S-ketoprofeno empleando metanol, etanol, 1- y 2-propanol como reactivos y solventes catalizada con el biocatalizador comercial Novozym® 435. Se estudió la interacción de los alcoholes con el biocatalizador mediante diversas técnicas espectroscópicas. Los resultados evidenciaron la disolución del soporte polimérico, la pérdida de proteína activa, la fuerte adsorción de los alcoholes, la modificación de la estructura secundaria de la proteína y el alisado de la estructura interna de las esferas de biocatalizador.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Investigación experimental y teórica de la resolución cinética ecocompatible de R/S-ketoprofeno

Se llevó a cabo la esterificación de R/S-ketoprofeno empleando metanol, etanol y 1-propanol como reactivos y solventes catalizada con el biocatalizador comercial Novozym® 435. Se estudió la interacción de los alcoholes con el biocatalizador mediante diversas técnicas espectroscópicas. Los resultados evidenciaron la disolución del soporte polimérico, la pérdida de proteína activa, la fuerte adsorción de los alcoholes, la modificación de la estructura secundaria de la proteína y el alisado de la estructura interna de las esferas de biocatalizador. Sin embargo, ninguno de estos inconvenientes influye en la actividad del biocatalizador. Finalmente, los cálculos teóricos demostraron que el metanol ejerce impedimento estérico y electrónico en la etapa de coordinación del R/S-ketoprofeno con la tríada catalítica.Methanol, ethanol and 1-propanol were used as reactants and solvents in the esterification of R/Sketoprofen catalyzed with Novozym® 435. The interaction of the alcohols with Novozym® 435 was studied at a molecular level through various spectroscopic techniques. The results evidenced the dissolution of the polymeric support, loss of active protein, strong adsorption of the alcohols, modification of the secondary structure of the protein and smoothing of the inner structure of the biocatalyst’s beads. Nevertheless, none of those drawbacks influences the biocatalyst activity. Theoretical calculations demonstrated that methanol introduces steric and electronic hindrance from the step of the coordination of the R/S-ketoprofen with the catalytic triad.Centro de Investigación y Desarrollo en Ciencias Aplicada