Obtention et caractérisation de peptides réactifs pouvant servir d'antigènes ou de capteurs d'antigènes pour des applications diagnostiques

Des banques combinatoires de peptides portés par des phages ont été utilisées pour l'obtention de ligands pouvant se substituer soit à un antigène, soit à un anticorps, dans des immunoessais spécifiques du diagnostic de l'hépatite C ou du cancer de la prostate. Le criblage d'une banque de dodécapeptides avec un anticorps monoclonal entrant en compétition avec des sérums de malades infectés par le virus de l'hépatite C, pour la reconnaissance de l'antigène NS4, a permis de localiser un épitope en C-terminal de NS4-A. Le mimotope correspondant est apparu comme un outil intéressant pour diagnostiquer une réponse humorale précoce. Des peptides se fixant spécifiquement sur le PSA, un marqueur tumoral, ont également été sélectionnés à partir de cette même banque et d'une banque d'heptapeptides cycliques. Reproduits synthétiquement, ces peptides sont capables de capturer ou de détecter spécifiquement le PSA dans des milieux biologiques complexes, et de moduler son activité enzymatiqueLYON1-BU.Sciences (692662101) / SudocSudocFranceF

Recombinant kallikrein expression: site-specific integration for hK6 production in human cells.

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Evidence for plasticity and structural mimicry at the immunoglobulin light chain-protein L interface

The multidomain bacterial surface protein L (PpL) is a virulence factor expressed by only 10% of Peptostreptococcus magnus strains, and its expression is correlated with bacterial vaginosis. The molecular basis for its ability to recognize 60% of mammalian immunoglobulin light chain variable regions (V-L) has been described recently by x-ray crystallography, which suggested the presence of two V-L binding sites on each protein L domain (Graille, M., Stura, E. A., Housden, N.G., Beekingham, J.A., Bottomley, S. P., Beale, D., Taussig, M.J., Sutton, B.J., Gore, M. G., and Charbonnier, J. (2001) Structure, 679-687). Here, we report the crystal structure at 2.1 Angstrom resolution of a protein L mutant complexed to an Fab' fragment with only 50% of the VL residues interacting with PpL site 1 conserved. Comparison of the site 1 interface from both structures shows how protein L is able to accommodate these sequence differences and therefore bind to a large repertoire of Ig. The x-ray structure and NMR results confirm the existence of two V-L binding sites on a single protein L domain. These sites exhibit a remarkable structural mimicry of growth factors binding to their receptors. This could explain the protein L superantigenic activity on human B lymphocytes. <br/