Importancia del Programa de Donación de Cuerpos (PRODOCU), de la Escuela de Medicina de la Universidad de Costa Rica en el desarrollo de la Simulación Biológica

Con la colaboración del Programa de Donación de Cuerpos de la Escuela de Medicina de la Universidad de Costa Rica (PRODOCU)Introducción En Costa Rica la ley general de salud que en su artículo 79 indica que los cuerpos que no son reclamados de las instituciones de salud, pueden ser donados a centros educativos.Gracias a esto desde 1961 año en que se inauguró la Escuela de Medicina de la Universidad de Costa Rica (De la Cruz, 1995), se ha contado con material biológico humano para la docencia de grado. A partir del año 2017 y gracias a el trabajo conjunto con la Facultad de Medicina de la UNAM (Olguín & Medina, 2019), se logró cambiar la fórmula de preservación del material biológico, utilizando la fórmula del Dr. Diego Pineda Martínez (Asamblea Legislativa, 1973) y crear el Programa de Donación de Cuerpos de la Escuela de Medicina de la Universidad de Costa Rica. Planteamiento del problema Históricamente, el material anatómico entregado a la Universidad de Costa Rica, comprendía mayormente a los cuerpos no reclamados en instituciones de salud. Los cuales eran recibidos entre 1 y 3 meses posterior al deceso, en estado de rigidez , con una apariencia acartonada , y además se debía de competir con otras instituciones de enseñanza que imparten la carrera de Medicina que demandaban también sobre la obtención de este recurso. Esta condición, relegó su utilización exclusivamente para la docencia a nivel de grado. Objetivo Demostrar como la gestión de un programa de donación de cuerpos mejora la disponibilidad de material biológico para la docencia y la investigación. Metodología de investigación Por medio de la creación y formalización del Programa de Donación de Cuerpos de la Escuela de Medicina de la Universidad de Costa Rica, se estableció la misión, la visión y los objetivos delprograma; que propiciaron la educación tanto de la población universitaria como a la población general, con el fin de crear una cultura de donación a nivel nacional, utilizando distintos canales y medios de comunicación. La digitalización de bases de datos de individuos registrados como donantes y de pacientes fallecidos ingresados a la Universidad, hasta el mes de marzo del año 2020, permitió por medio de estadística comparativa, valorar el aumento de los donantes inscritos en el Programa en los últimos años, así como de los cuerpos que ingresan en condición de fallecidos a la Escuela de Medicina. Muestra Corresponde al total 577 de individuos inscritos en el Programa de Donación de Cuerpos de la Escuela de Medicina de la Universidad de Costa Rica, hasta el mes de marzo del año 2020. Instrumentos de Evaluación Datos registrados de formularios de donación directa e indirecta. Bases de datos digitales. Resultados Los individuos inscritos en calidad de donantes desde 2003 (que se cuenta con los registros escritos), hasta 2017 fueron 320 personas, y del 2018 (año que se inauguró PRODOCU) a marzo del 2020 se registraron 257 donantes. De esta población total el 52% corresponde a mujeres y el 48% a hombres. La distribución según grupos etarios fue de los 18 a los 60 años un total de 145 personas , de los 61-70 años 165 personas y de 70-80 años 155 personas. De estos donantes inscritos 304 corresponden a población costarricese, siendo extrangeros un total de 273 personas. Análisis de resultados Se puede observar que posterior a la inauguración del Programa de Donación de Cuerpos, la cantidad de donantes aumentó significativamente, permitiendo de esta forma que los cuerpos de fallecidos que ingresan a la Escuela, provengan cada vez más por donaciones directas y no se dependa tanto de la Ley General de Salud. De esta forma el cuerpo ingresa antes de cumplir las 48 horas de fallecido; y permite que el proceso de preservación sea controlado al 100% por la Escuela, implementando el uso de técnicas de embalsamado específicas para poder obtener un cuerpo con características más similares a las de un cuerpo sin embalsamar, facilitando un material que se encuentra en estado óptimo para ser utilizado en la Simulación Biológica. Al aumentar el número de cuerpos fallecidos que ingresan a la Escuela se puede disponer de una mayor cantidad de material que permita abrir cursos a posgrado en Simulación Biológica con cadáver humano. Conclusiones El uso ético y digno de los cuerpos humanos, para la docencia y la investigación, es indispensable, para formar personal de salud no solo para estar capacitado en conocimiento y destrezas manuales, sino también como profesionales más humanistas y éticos. La mayor disposición del material biológico y con una mejor calidad en su preservación, permite que se desarrollen distintas técnicas de Simulación Cadavérica que antes no eran posibles en nuestro medio.UCR::Vicerrectoría de Docencia::Salud::Facultad de Medicin

El Sistema del Complemento, interactivo y magnético. Memoria final

El modelo didáctico más empleado en la enseñanza universitaria es de tipo transmisivo, centrado en la exposición del profesor/a con el apoyo de las presentaciones y los libros de texto, siendo el alumno/a esencialmente receptor de la enseñanza. Sin embargo, cada vez más se emplean estrategias alternativas para abordar el proceso de enseñanza-aprendizaje desde modelos más centrados en el alumno/a, que favorezcan su implicación, actividad y protagonismo. Con el proyecto de innovación docente: El Sistema del Complemento, interactivo y magnético, queremos desarrollar una herramienta didáctica que nos permita implementar una estrategia de aprendizaje interactiva para el estudio de la cascada de activación del sistema del complemento. La propuesta se ha programado para la asignatura de Fisiopatología del Complemento impartida en el Máster de Investigación en Inmunología (UCM). Para ello, elaboramos material didáctico que consiste en fichas impresas en papel imantado que representan cada uno de los componentes que forman el sistema del complemento de manera que se puedan colocar y mover sobre una pizarra magnética. Este material se pone a disposición de los estudiantes para realizar actividades concretas propuestas por los profesores/as, en las que se trabaja en grupo y de forma interactiva, sirviendo también como herramienta para el repaso de conceptos y resolución de dudas durante las clases teóricas

Transfección mediante vehículos génicos basados enhidroxiapatita: eficacia y efectos sobre el tráfico intracelular

La hidroxiapatita (HAp), Ca10(PO4)6(OH)2, es un mineral miembro de las apatitas con una razón Ca/P de 1,67. Es el principal componente mineral de los huesos en los vertebrados y posee una serie de características de interés como biocompatibilidad, bioresortividad, afinidad por biomoléculas, alto potencial osteogénico, osteconductividad, osteoinductividad y baja toxicidad. Estas propiedades son ideales para su aplicación en sistemas biológicos. Debido a esto se han estudiado sus aplicaciones como acarreador de biomoléculas (ácidos nucleicos y proteínas). Las nanopartículas de hidroxiapatita sintetizadas por electrólisis poseen ventajas de producción como su versatilidad, rapidez, bajo costo y capacidad de incluir sustancias dopantes, sin alterar significativamente sus propiedades. Mediante este método se han sintetizado nanopartículas capaces de transfectar células y al doparlas con Europio3+ (HAp-Eu), pueden ser utilizadas como sondas fluorescentes. En este trabajo, las nanopartículas de HAp mostraron resultados positivos al ser utilizadas para la transfección de células HEK 293, mientras que en células HeLa y Raw se observan rendimientos moderados. De la misma forma, no se observaron efectos sobre la proliferación de las células HEK 293, Raw 264.7 ni THP-1; sin embargo, en células HeLa si se observó un efecto citostático. Al estudiar la endocitosis por células HeLa se observó una internalización activa de la HAp-Eu. Esta captura fue heterogénea, ya que algunas células solo contenían trazas de las nanopartículas y otras mostraban grandes cúmulos de distribución perinuclear. Además, se observó que existe colocalización de la señal de HAp-Eu con los lisosomas, lo cual siguiere que este material transita por las vías degradativas intracelulares. Adicionalmente, se observó evidencia de que la HAp y HAp-Eu pueden inducir alteraciones del flujo autofágico, siendo este efecto dependiente del linaje celular. Finalmente, se observó que el rendimiento de las transfecciones de fagocitos profesionales (macrófagos Raw 264.7) no era afectado por la activación clásica (M1) con LPS, lo cual apoya la idea de que, en caso de aplicación sistémica a un organismo vivo, la captura de las nanopartículas por fagocitos no impedirá la expresión del material genético exógeno, aún en ambientes inflamatorios. Estos resultados apoyan el potencial para el uso de las nanopartículas como vehículos génicos y sondas fluorescentes, ya que las propiedades químicas y biológicas las hacen compatibles con posibles aplicaciones a nivel clínico.Hydroxyapatite (HAp), Ca10(PO4)6(OH)2, is a mineral member of the apatites with a Ca/P ratio of 1,67. It is the maincomponent of vertebratebones and possesses a series of interesting properties such as biocompatibility, bioresorption, affinity to biomolecules, high osteogenic potential, osteocondutivity, osteoinductivity and low toxicity. These properties are ideal for its application inbiological systems. Due to this, its applications asabiomolecule carrier (nucleic acids and proteins) have been studied.The hydroxyapatite nanoparticles synthetized by electrolysis present production advantages such as versatility, production speed, low cost and ability to include doping substances without altering its properties. Through this method, transfection capable nanoparticles have been produced and by dopingt hem with Eu3+, they could be used as fluorescent probes.In this work,Hap nanoparticles showed positive results when used to transfect HEK 293 cells, however, when applied to HeLa or THP-1 cells results were modest. Furthermore, no negative effects were observed for the proliferation of HEK 293, Raw 264.7 or THP-1 cells, yet, a cytostatic effect was observed in HeLa cells.The endocytosis studies with Hela cells showed anactive internalization of the Hap-Eu However, the capture was heterogeneous, as some cells showed traces of the nanoparticles while big accumulation of material was seen in the perinuclear cytoplasm in other cells. A colocalization was registered for the Hap-Eu signal and lysosomes, thus suggesting that this material circulates through the intracellular degradative pathways. In addition, we obtained evidence that HAp and Hap-Eucan induce alterations in the autophagic flux although this was specific to each cell line. Finally, the transfection yield for professional phagocytes (Raw 264. 7 macrophages) was not affected by classic activation (M1) with LPS. This supports the hypothesis that in case of systemic application of the nanoparticles,the expression of the transgene will be achieved in phagocytes that captured the material even in an inflammatory environment.These results support the potential for using these nanoparticles as gene carriers and fluorescent probes since the chemical and biological properties of this mineral makes it compatible with possible clinical applications.UCR::Vicerrectoría de Investigación::Sistema de Estudios de Posgrado::Salud::Maestría Académica en Microbiologí

CD3G or CD3D Knockdown in Mature, but Not Immature, T Lymphocytes Similarly Cripples the Human TCRαβ Complex

The human αβ T-cell receptor (TCR) is composed of a variable heterodimer (TCRαβ) and three invariant dimers (CD3γε, CD3δε, and ζζ/CD2472). The role of each invariant chain in the stepwise interactions among TCR chains along the assembly is still not fully understood. Despite the high sequence homology between CD3γ and CD3δ, the clinical consequences of the corresponding immunodeficiencies (ID) in humans are very different (mild and severe, respectively), and mouse models do not recapitulate findings in human ID. To try to understand such disparities, we stably knocked down (KD) CD3D or CD3G expression in the human Jurkat T-cell line and analyzed comparatively their impact on TCRαβ assembly, transport, and surface expression. The results indicated that TCR ensembles were less stable and CD3ε levels were lower when CD3γ, rather than CD3δ, was scarce. However, both defective TCR ensembles were strongly retained in the ER, lacked ζζ/CD2472, and barely reached the T-cell surface (30% vs. normal controls). CD3 KD of human T-cell progenitors followed by mouse fetal thymus organ cultures showed high plasticity in emerging immature polyclonal T lymphocytes that allowed for the expression of significant TCR levels which may then signal for survival in CD3γ, but not in CD3δ deficiency, and explain the immunological and clinical disparities of such ID cases