Receptores α2-adrenérgicos e câncer de mama

El cáncer de mama es la neoplasia más frecuente entre las mujeres. Las experiencias estresantes causan la liberación de adrenalina y noradrenalina, que se unen a 9 receptores adrenérgicos. Nuestro grupo ha trabajado durante los últimos años en la caracterización de los receptores alfa2-adrenérgicos y en el efecto de su estimulación en diferentes modelos experimentales de cáncer de mama para contribuir a mejorar la calidad de vida de las pacientes. En células tumorales y no tumorales mamarias humanas encontramos que las catecolaminas endógenas adrenalina y noradrenalina y el agonista específico alfa2-adrenérgico clonidina estimulan significativamente la proliferación celular. La inhibición de los niveles de AMP cíclico correlacionan con la estimulación de dichos receptores. Hemos descripto la expresión de por lo menos un subtipo de receptor alfa2-adrenérgico en estas líneas tanto a nivel de ARNm (medida por RT-PCR) como de proteína (por inmunocitoquímica y unión de un antagonista radiactivo). Además hemos demostrado que los agonistas alfa2-adrenérgicos aumentan el crecimiento tumoral en modelos experimentales de cáncer de mama (tumores inducidos originalmente por acetato de medroxiprogesterona y xenotransplantes de células tumorales humanas). En todos los casos el antagonista alfa2-adrenérgico rauwolscina inhibió el crecimiento de los tumores control, pudiendo pensarse en utilizarlo como terapia adyuvante.Breast cancer is the most frequent women neoplasia. Stressing experiences enhance adrenalin and noradrenalin release. These catecholamines bind to 9 different adrenoceptors. Our group has described and characterized the α2-adrenoceptors and analyzed their effect in breast cancer models in order to contribute to a better quality of life in patients. The stimulation of these receptors with adrenalin, noradrenalin or α2-adrenergic agonists in both tumor and non-tumor human breast cells significantly stimulates cell proliferation, in correlation with inhibited cyclic AMP levels. At least one α2-adrenergic subtype in expressed in every cell line studied at the mRNA level (by RT-PCR) and at the protein level (immunocytochemistry and a radioactive antagonist binding). We have also found that the α2-adrenergic agonists enhance tumor growth in experimental models of breast cancer (transplanted mouse tumors originally induced by medroxyprogesterone acetate and human breast cancer cells xenotransplanted in nude mice). In every tumor model the α2-adrenergic antagonist rauwolscine inhibited tumor growth, suggesting the possibility of its utilization as an adjuvant therapy.O câncer de mama é a neoplasia mais frequente entre as mulheres. As experiências estressantes causam a liberação de adrenalina e noradrenalina, que se unem a 9 receptores adrenérgicos. Nosso grupo tem trabalhado durante os últimos anos na caracterização dos receptores α2 -adrenérgicos e no efeito de sua estimulação em diferentes modelos experimentais de câncer de mama para contribuir a melhorar a qualidade de vida das pacientes. Em células tumorais e não tumorais mamárias humanas encontramos que as catecolaminas endógenas adrenalina e noradrenalina e o agonista específico α2-adrenérgico clonidina estimulam significativamente a proliferação celular. A inibição dos níveis de AMP cíclico se correlaciona com a estimulação de tais receptores. Temos descrito a expressão de pelo menos um subtipo de receptor α2-adrenérgico nestas linhas tanto em nível de ARNm (medida por RT-PCR) quanto de proteína (por imunocito-química e união de um antagonista radiativo). Além disso temos demonstrado que os agonistas α2-adrenérgicos aumentam o crescimento tumoral em modelos experimentais de câncer de mama (tumores induzidos originalmente por acetato de medroxiprogesterona e xenotransplantes de células tumorais humanas). Em todos os casos o antagonista α2 -adrenérgico rauwolscine inibiu o crescimento dos tumores controle, podendo pensar em utilizá-lo como terapia adjuvante.Fil: Luthy, Isabel Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); ArgentinaFil: Bruzzone, Ariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); ArgentinaFil: Perez, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); ArgentinaFil: Castillo, Lilian Fedra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentin

Glypican-3 induces a mesenchymal to epithelial transition in human breast cancer cells

Breast cancer is the disease with the highest impact on global health, beingmetastasis the main cause of death. To metastasize, carcinoma cells must reactivate a latent program called epithelial-mesenchymal transition (EMT), through which epithelial cancer cells acquire mesenchymal-like traits.Glypican-3 (GPC3), a proteoglycan involved in the regulation of proliferationand survival, has been associated with cancer. In this study we observed thatthe expression of GPC3 is opposite to the invasive/metastatic ability of Hs578T,MDA-MB231, ZR-75-1 and MCF-7 human breast cancer cell lines. GPC3 silencingactivated growth, cell death resistance, migration, and invasive/metastatic capacity of MCF-7 cancer cells, while GPC3 overexpression inhibited these properties in MDA-MB231 tumor cell line. Moreover, silencing of GPC3 deepened the MCF-7 breast cancer cells mesenchymal characteristics, decreasing the expression of the epithelial marker E-Cadherin. On the other side, GPC3 overexpression induced the mesenchymal-epithelial transition (MET) of MDA-MB231 breast cancer cells, which re-expressed E-Cadherin and reduced the expression of vimentin and N-Cadherin.While GPC3 inhibited the canonical Wnt/β-Catenin pathway in the breast cancer cells, this inhibition did not have effect on E-Cadherin expression. We demonstrated that the transcriptional repressor of E-Cadherin - ZEB1 - is upregulated in GPC3 silenced MCF-7 cells, while it is downregulated when GPC3 was overexpressed in MDA-MB231 cells.We presented experimental evidences showing that GPC3 induces the E-Cadherinre-expression in MDA-MB231 cells through the downregulation of ZEB1.Our data indicate that GPC3 is an important regulator of EMT in breast cancer,and a potential target for procedures against breast cancer metastasisFil: Castillo, Lilian Fedra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Tascón, Rocío Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; ArgentinaFil: Lago Huvelle, María Amparo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Novack, Gisela Vanina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; ArgentinaFil: Llorens de Los Ríos, María Candelaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Ferreira Dos Santos, Ancély. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Shortrede, Jorge Eduardo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; ArgentinaFil: Cabanillas, Ana Maria de Los A.. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Bal, Elisa Dora. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Labriola, Leticia. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Peters, María Giselle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; Argentin

Systemic and lymphatic heart performance during forced submersion, in the toad Bufo arenarum (Annura, Bufonidae)

La actividad bioeléctrica del corazón sistémico (SH) y de los corazones linfáticos (LH) posteriores fue estudiada durante la sumersión forzada en el sapo Bufo arenarum. Previo a la sumersión, la frecuencia cardiaca fue de 28.9 latidos por minuto y la de los LH fue de 50.5 latidos por minuto, y asincrónica. Al comienzo de la sumersión forzada, inmediatamente después que las narinas están bajo la superficie del agua, se registra una detención refleja de la bomba bucal y una lenta y gradual disminución de la frecuencia cardiaca, estabilizándose en 10 latidos por minuto después de 15 min. A los 10 min de sumersión, los LH se detuvieron completamente. La emersión implica una breve fase sin bombeo bucal, seguida por una activación de dicha bomba junto con el repentino incremento de la frecuencia del SH y la reactivación de los LH. Animales vagotomizados bilateralmente mostraron una alta frecuencia cardiaca, comparada con los controles, y bradicardia durante la sumersión. Varios mecanismos, nerviosos y no nerviosos, tales como estímulos químicos sanguíneos, permitirían mantener la bradicardia sistémica y la inactividad de los LH durante el proceso de sumersión. Los resultados no permiten establecer una conclusión definitiva acerca de los mecanismos responsables de la bradicardia y en la detención de la actividad de los LH durante la sumersión, pero la correlación entre la actividad de la bomba bucal y el establecimiento de profundos cambios en la fisiología de ambos corazones, sugiere que la primera es un factor necesario para que se produzcan las modificacionesFil: Cervino, Claudio O.. Universidad de Morón; ArgentinaFil: Castillo, Lilian Fedra. Universidad de Morón; ArgentinaFil: Rodriguez, Enrique Marcelo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentin

Contribution of alpha(2)-adrenoceptors to the mitogenic effect of catecholestrogen in human breast cancer MCF-7 cells

Catecholestrogens are estrogen metabolites formed by hydroxylation of 17beta-estradiol and estrone at either the C-2 or C-4 position, rivaling the parent estrogens in concentration. The objective of the present work was to assess if their catechol group could make them induce proliferation of human breast cancer cells via alpha(2)-adrenoceptors. In competition studies in human breast cancer MCF-7 cells, high concentrations of 2-hydroxy-estradiol (2-OH-E(2)), 2-hydroxy-estrone (2-OH-E(1)) and 4-hydroxy-estrone (4-OH-E(1)) competed for [(3)H]-rauwolscine binding, whereas 4-hydroxy-estradiol (4-OH-E(2)) did not. The contribution of alpha(2)-adrenoceptors and estrogen receptors (ERs) in proliferation enhancement was analyzed with specific antagonists. The specific alpha(2)-adrenergic antagonist yohimbine partially reversed the effect of catecholestrogens except 4-OH-E(2). The selective ER downregulator ICI-182780 or fulvestrant partially or totally reversed the effect of all hydroxylated catecholestrogens. When analyzing the effect of the combination of both antagonists in MCF-7, the contribution of the alpha(2)-adrenoceptors and ERs for 2-OH-E(2), 2-OH-E(1) and 4-OH-E(1) was mixed, whereas for 4-OH-E(2), the only receptor implied was an ER. In MDA-MB-231 cells (ER-alpha negative) the proliferation stimulation by these three catecholestrogens and reversal by the adrenergic antagonist was also observed. It can be concluded that alpha(2)-adrenoceptors contribute at least in part to the mitogenic effect of 2-OH-E(2), 2-OH-E(1) and 4-OH-E(1).Fil: Chiesa, Ignacio Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Castillo, Lilian Fedra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Luthy, Isabel Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentin

Alpha2-adrenoceptor agonists trigger prolactin signaling in breast cancer cells

Breast cancer is the most frequent malignancy among women worldwide. We have described the expression of α2-adrenoceptors in breast cancer cell lines, associated with increased cell proliferation and tumor growth. A mitogenic autocrine/paracrine loop of prolactin (Prl) has been described in breast cancer cells. We hypothesized that the α2-adrenergic enhancement of proliferation could be mediated, at least in part, by this Prl loop. In both T47D and MCF-7 cell lines, the incubation with the α2-adrenergic agonist dexmedetomidine significantly increased Prl release into the culture medium (measured by the Nb2 bioassay), this effect being reversed by the α2-adrenergic antagonist rauwolscine. No change in Prl receptors (PrlR) was observed by RT-qPCR in these cell lines. In IBH-6 cells a decrease in Prl secretion was observed at the lower dexmedetomidine concentration. The signaling pathways involved in ovine Prl (oPrl) and dexmedetomidine action were also assessed. Both compounds significantly activated STAT5 and ERK in all three cell lines. In T47D and MCF-7 cell lines also AKT was activated by both Prl and dexmedetomidine. We therefore describe the STAT5 phosphorylation by an α2-adrenergic agonist, dexmedetomidine. In T47D cells, the α2-adrenergic stimulation of cell proliferation is probably mediated, at least in part, by the Prl autocrine/paracrine loop, because this effect is abrogated by the specific PrlR antagonist Δ1?9-G129R-hPrl. The implication of Prl loop describes a novel mechanism of action of this GPCR.Fil: Castillo, Lilian Fedra. Instituto Angel H. Roffo; ArgentinaFil: Rivero, Ezequiel Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Goffin, Vincent. Inserm; Francia. Universite de Paris; FranciaFil: Luthy, Isabel Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentin

Adrenoceptors: non conventional target for breast cancer?

Epinephrine and Norepinephrine, typically released during stress bind to nine different adrenoceptors (AR) which classically control the cardiovascular and respiratory systems. New targets were described for the many agonists and antagonists developed for these AR, as the central nervous system. During the last three decades, AR expression and action on the mammary gland/breast was extensively investigated. In the cow mammary gland, good milkability was associated with low density of beta2-AR and high density of alpha2-AR. In the rat normal mammary gland, beta-AR are expressed in the epithelial cells, alveoli, ducts, and adipocytes showing an exquisite regulation by steroid hormones and prolactin. In rat dimethylbenz(a)anthracene (DMBA) tumors, a close correlation was observed between tumor growth and beta-AR concentration. B2-AR were described in numerous human cell lines and breast tumors. The action of beta-adrenergic compounds on cell proliferation is contradictory. While some authors found that beta-agonists significantly inhibit cancer cell proliferation and tumor growth in mice, others described a significant reduction in DNA synthesis by beta-blockers. Also, positive effects of beta-AR on human carcinoma cell migration have been described. alpha2-AR are expressed in human breast cancer and non-cancer cell lines, their stimulation being associated with increased cell proliferation. In vivo clonidine increased tumor growth and alpha2-adrenergic antagonists completely reversed this effect. When administered alone, rauwolscine inhibited tumor growth behaving as an inverse agonist. Therefore, the numerous adrenergic beta- and alpha-AR agonists or antagonists could prove to be unexpected therapeutic options for mammary gland/ breast and mainly breast cancer.Fil: Luthy, Isabel Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Bruzzone, Ariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Perez, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Castillo, Lilian Fedra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Chiesa, Ignacio Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Vázquez, S. M.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Sarappa, Maria Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentin

Cathepsin-L influences the expression of extracellular matrix in lymphoid organs and plays a role in the regulation of thymic output and of peripheral T cell number

Nackt mice, which are deficient in cathepsin-L (CTSL), show an early impairment during positive selection in the context of class II MHC molecules and as a consequence, the percentage and absolute number of CD4(+) thymocytes are significantly decreased. In this study, we show that lymph nodes from nackt mice are hypertrophied, showing normal absolute numbers of CD4(+) T cells and marked increases in the number of CD8(+) T lymphocytes. Basal proliferative levels are increased in the CD4(+) but not in the CD8(+) population. Lymph node T cells show increases in the expression of alpha(5), alpha(6), and beta(1) integrin chains. These alterations correlate with increases in the expression of extracellular matrix (ECM) components in lymph nodes. Interestingly, laminin, fibronectin, and collagen I and IV are markedly decreased in nackt thymus which shows an augmented output of CD8(+) cells. These results demonstrate that a mutation in the Ctsl gene influences the levels of ECM components in lymphoid organs, the thymic output, and the number of T cells in the periphery. They further raise the possibility that, by regulating the level of expression of ECM components in lymphoid organs, CTSL is able to broadly affect the immune system.Fil: Lombardi, Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Burzyn, Dalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Mundiñano, Juliana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Berguer, Paula Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Bekinschtein, Pedro Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Costa, Hector Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Castillo, Lilian Fedra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Goldman, Alejandra. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro Internacional de Estudios Avanzados; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Meiss, Roberto. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires; ArgentinaFil: Piazzon, Margarita Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Nepomnaschy, Irene. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin