Physiological and Agronomical Aspects of Phytohormone Production by Model Plant-Growth-Promoting Rhizobacteria (PGPR) Belonging to the Genus Azospirillum

The functional analysis of phytohormone production, interaction, and regulation in higher plants has re-emerged in the past 10 years due to spectacular advances in integrative study models. However, plants are not axenic in natural conditions and are usually colonized or influenced directly by different microorganisms such as rhizobacteria of which many have the ability to produce phytohormones. This review summarizes information related to the biosynthesis, metabolism, regulation, physiological role, and agronomical impact of phytohormones produced by the model plant-growth-promoting rhizobacteria (PGPR) belonging to the genus Azospirillum, considered to be one of the most representative PGPR. We include exhaustive information about the phytohormones auxins, gibberellins, cytokinins, ethylene, and abscisic acid, as well as the plant growth regulators polyamines and nitric oxide. We deal with their metabolism by Azospirillum sp. in chemically defined medium, in plant–microbe interactions, or in the context of the agronomical use of Azospirillum sp.Fil: Cassan, Fabricio Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Cs.naturales. Laboratorio de Fisiología Vegetal y de la Interacción Planta-microorganismo; ArgentinaFil: Vanderleyden, Jos. Centre of Microbial and Plant Genetics. Heverlee; BélgicaFil: Spaepen, Stijn. Centre of Microbial and Plant Genetics. Heverlee; Bélgic

Azospirillum brasilense and Azospirillum lipoferum Hydrolyze Conjugates of GA20 and Metabolize the Resultant Aglycones to GA1 in Seedlings of Rice Dwarf Mutants

Azospirillum species are plant growth-promotive bacteria whose beneficial effects have been postulated to be partially due to production of phytohormones, including gibberellins (GAs). In this work, Azospirillum brasilense strain Cd and Azospirillum lipoferum strain USA 5b promoted sheath elongation growth of two single gene GA-deficient dwarf rice (Oryza sativa) mutants, dy and dx, when the inoculated seedlings were supplied with [17,17-2H2]GA20-glucosyl ester or [17,17-2H2]GA20-glucosyl ether. Results of capillary gas chromatography-mass spectrometry analysis show that this growth was due primarily to release of the aglycone [17,17-2H2]GA20 and its subsequent 3β-hydroxylation to [17,17-2H2]GA1 by the microorganism for the dy mutant, and by both the rice plant and microorganism for the dx mutant.Fil: Cassan, Fabricio Dario. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Cátedra de Fisiología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Bottini, Ambrosio Ruben. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Cátedra de Fisiología Vegetal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Schneider, Gernot. Leibniz Institut für Pflanzenbiochemi; AlemaniaFil: Piccoli, Patricia Noemí. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; Argentin

Genotypic Characterization of Azotobacteria Isolated from Argentinean Soils and Plant-Growth-Promoting Traits of Selected Strains with Prospects for Biofertilizer Production

The genetic diversity among 31 putative Azotobacter isolates obtained from agricultural and non-agricultural soils was assessed using rep-PCR genomic fingerprinting, and identified to species level by ARDRA and partial 16S rRNA gene sequence analysis. High diversity was found among the isolates, identified as A. chroococcum, A. salinestris and A. armeniacus. Selected isolates were characterized on the basis of phytohormone biosynthesis, nitrogenase activity, siderophore production and phosphate solubilization. Indole-3 acetic-acid (IAA), gibberellin (GA3)and zeatin (Z) biosynthesis, nitrogenase activity and siderophore production were found in all evaluated strains, with variation among them, but no phosphate solubilization was detected. Phytohormones excreted to the culture medium ranged the following concentrations: 2.2-20 µg IAA ml-1, 0.3-0.7 µg GA3 ml-1, 0.5-1.2 µg Z ml-1. Seed inoculations with further selected Azotobacter strains and treatments with their cell-free cultures increased the number of seminal roots and root hairs in wheat seedlings. This latter effect was mimicked by treatments with IAA-pure solution but it was not related with bacterial root colonization. Our survey constitutes a first approach to the knowledge of Azotobacter species inhabiting Argentinean soils, in three contrasting geographical regions. Moreover, this phenotypic characterization constitutes an important contribution to the selection of Azotobacter strains for biofertilizer formulations.Fil: Rubio, Esteban Julio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentina;Fil: Montechia, Marcela Susana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Departamento de Biología Aplicada y Alimentos. Cátedra de Microbiologia Agrícola; Argentina;Fil: Tosi, Micaela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico - CONICET - Parque Centenario. Instituto de Investigaciones en Biociencias Agrícolas y Ambientales; Argentina; Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Departamento de Biología Aplicada y Alimentos. Cátedra de Microbiologia Agrícola; Argentina;Fil: Cassan, Fabricio Dario. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Departamento de Cs.naturales. Laboratorio de Fisiologia Vegetal y de la Interaccion Planta-microorganismo; Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Ciencias Naturales; Argentina;Fil: Perticari, Alejandro. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentina;Fil: Correa, Olga Susana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Departamento de Biología Aplicada y Alimentos. Cátedra de Microbiologia Agrícola; Argentina

Day and blue light modify growth, cell physiology and indole-3-acetic acid production of Azospirillum brasilense Az39 under planktonic growth conditions

In this work, we evaluated the effects of light on growth, cell physiology and stress response of Azospirillum brasilense Az39, a non-photosynthetic rhizobacteria, under planktonic growth conditions. Methods and results: Exponential cultures of Az39 were exposed to blue (BL), red (RL) and daylight (DL) or maintained in darkness for 24, 48 and 72 h. The biomass production and indole 3-acetic acid (IAA) biosynthesis increased by exposition to DL. Conversely, BL decreased IAA concentration through a direct effect on the molecule. The DL increased superoxide dismutase activity, hydrogen peroxide and thiobarbituric acid reactive substances levels, but the last one was also increased by BL. Both DL and BL increased cell aggregation but only BL increased biofilm formation. Conclusions: We demonstrated that both BL and DL are stress effectors for A. brasilense Az39 under planktonic growth conditions. The DL increased biomass production, IAA biosynthesis and bacterial response to stress, whereas BL induced cell aggregation and biofilms formation, but decreased the IAA concentration by photooxidation. Significance and Impact of the Study: Blue light and DL changes growth capacity, cell physiology and plant growth promotion ability of A. brasilense Az39 and these changes could be considered to improve the production and functionality of biofertilizers.Fil: Molina, Romina Micaela. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas; ArgentinaFil: Lopez, Gaston Alberto. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas; ArgentinaFil: Coniglio, Nayla Anahí. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas; ArgentinaFil: Furlan, Ana Laura. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas; ArgentinaFil: Mora, Maria Veronica. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas; ArgentinaFil: Rosas, Susana Beatriz. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cassan, Fabricio Dario. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas; Argentin

Analysis of the denitrification pathway and greenhouse gases emissions in Bradyrhizobium sp. strains used as biofertilizers in South America

Aims Greenhouse gases are considered potential atmospheric pollutants, with agriculture being one of the main emission sources. The practice of inoculating soybean seeds with Bradyrhizobium sp. might contribute to nitrous oxide (N2O) emissions. We analyzed this capacity in five of the most used strains of Bradyrhizobium sp. in South America. Methods and Results We analyzed the denitrification pathway and N2O production by B. japonicum E109 and CPAC15, B. diazoefficiens CPAC7, and B. elkanii SEMIA 587 and SEMIA 5019, both in free‐living conditions and symbiosis with soybean. The in silico analysis indicated the absence of nosZ genes in B. japonicum and the presence of all denitrification genes in B. diazoefficiens strains, as well as the absence of nirK, norC and nosZ genes in B. elkanii. The in planta analysis confirmed the N2O production under saprophytic conditions or symbiosis with soybean roots nodules. In the last case up to 26·1 and 18·4 times higher in plants inoculated with SEMIA5019 and E109 respectively, than in those inoculated with USDA110. Conclusions The strains E109, SEMIA 5019, CPAC15 and SEMIA 587 showed the highest N2O production both as free‐living cells and in symbiotic conditions in comparison with USDA110 and CPAC7, which do have the nosZ gene. Although norC and nosZ could not be identified in silico or in vitro in SEMIA 587 and SEMIA 5019, these strains showed capacity to produce N2O in our experimental conditions. Significance and Impact of Study This is the first report to analyze and confirm the incomplete denitrification capacity and N2O production in four of the five most used strains of Bradyrhizobium sp. for soybean inoculation in South America.Fil: Obando Castellanos, Dolly Melissa. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Ciencias Naturales. Laboratorio de Fisiología Vegetal y de la Interacción Planta-microorganismo; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Correa-Galeote, David. Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Estación Experimental del Zaidín; EspañaFil: Castellano-Hinojosa, Antonio. Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Estación Experimental del Zaidín; EspañaFil: Gualpa, José Luis. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Ciencias Naturales. Laboratorio de Fisiología Vegetal y de la Interacción Planta-microorganismo; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Hidalgo, Alba. Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Estación Experimental del Zaidín; EspañaFil: de Dios Alché, Juan. Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Estación Experimental del Zaidín; EspañaFil: Bedmar, Eulogio. Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Estación Experimental del Zaidín; EspañaFil: Cassan, Fabricio Dario. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas.; Argentin

Genome Sequence of Bradyrhizobium japonicum E109, One of the Most Agronomically Used Nitrogen-Fixing Rhizobacteria in Argentina

We present here the complete genome sequence of Bradyrhizobium japonicum strain E109, one of the most used rhizobacteria for soybean inoculation in Argentina since the 1970s. The genome consists of a 9.22-Mbp single chromosome and contains several genes related to nitrogen fixation, phytohormone biosynthesis, and a rhizospheric lifestyle.Fil: Torres, Daniela Soledad. Universidad Nacional de Rio Cuarto; ArgentinaFil: Revale, Santiago. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Agrobiotecnología de Rosario; ArgentinaFil: Obando, Melissa. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Departamento de Cs.naturales. Laboratorio de Fisiologia Vegetal y de la Interaccion Planta-microorganismo; ArgentinaFil: Maroniche, Guillermo Andres. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Paris, Gastón. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Perticari, Alejandro. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Vazquez, Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Rosario. Instituto de Agrobiotecnología de Rosario; ArgentinaFil: Wisniewsk Dyé, Florence. Universite Lyon 2; FranciaFil: Martínez Abarca Pastor, Francisco. Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Estación Experimental del Zaidin; EspañaFil: Cassan, Fabricio Dario. Universidad Nacional de Rio Cuarto; Argentin

Molecular and physiological analysis of indole-3-acetic acid degradation in Bradyrhizobium japonicum E109

Bradyrhizobium japonicum E109 is a bacterium widely used for inoculants production in Argentina. It is known for its ability to produce several phytohormones and degrade indole-3-acetic acid (IAA). The genome sequence of B. japonicum E109 was recently analyzed and it showed the presence of genes related to the synthesis of IAA by indole-3-acetonitrile, indole-3-acetamide and tryptamine pathways. Nevertheless, B. japonicum E109 is not able to produce IAA and instead has the ability to degrade this hormone under saprophytic culture conditions. This work aimed to study the molecular and physiological features of IAA degradation and identify the genes responsible of this activity. In B. japonicum E109 we identified two sequences coding for a putative 3-phenylpropionate dioxygenase (subunits α and β) responsible for the IAA degradation that were homologous to the canonical cluster of iacC and iacD of Pseudomonas putida 1290. These genes form a separate cluster together with three additional genes with unknown functions. The degradation activity was found to be constitutively expressed in B. japonicum E109. As products of IAA degradation, we identified two compounds, 3-indoleacetic acid 2,3-oxide and 2-(2-hydroperoxy-3-hydroxyindolin-3-yl) acetic acid. Our report proposes, for the first time, a model for IAA degradation in Bradyrhizobium.Fil: Torres, Daniela Soledad. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas.; ArgentinaFil: Mongiardini, Elias Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Ciencias Aplicadas "Dr. Jorge J. Ronco". Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Ciencias Aplicadas; ArgentinaFil: Donadío, Evelyn Florencia. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas.; ArgentinaFil: Donoso, Raúl. Universidad Tecnológica Metropolitana; ChileFil: Recabarren Gajardo, Gonzalo. Pontificia Universidad Católica de Chile; ChileFil: Gualpa, José Luis. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas.; ArgentinaFil: Spaepen, Stijn. Katholikie Universiteit Leuven; BélgicaFil: Defez, Roberto. Institute Of Biosciences And Bioresources; ItaliaFil: Lopez, Gaston Alberto. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas.; ArgentinaFil: Bianco, Carmen. Institute Of Biosciences And Bioresources; ItaliaFil: Cassan, Fabricio Dario. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnologicas.; Argentin

Complete Genome Sequence of the Model Rhizosphere Strain Azospirillum brasilense Az39, Successfully Applied in Agriculture

We present the complete genome sequence of Azospirillum brasilense Az39, isolated from wheat roots in the central region of Argentina and used as inoculant in extensive and intensive agriculture during the last four decades. The genome consists of 7.39 Mb, distributed in six replicons: one chromosome, three chromids, and two plasmids.Fil: Rivera Botia, Diego Mauricio. Universidad Nacional de Rio Cuarto; ArgentinaFil: Revale, Santiago. Instituto de Agrobiotecnología de Rosario; ArgentinaFil: Molina, Romina Micaela. Universidad Nacional de Rio Cuarto; ArgentinaFil: Gualpa, Jose. Universidad Nacional de Rio Cuarto; ArgentinaFil: Puente, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Maroniche, Guillermo Andres. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Paris, Gastón. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Baker, David. The Genome Analysis Centre; Reino UnidoFil: Clavijo, Bernardo. The Genome Analysis Centre; Reino UnidoFil: McLay, Kirsten. The Genome Analysis Centre; Reino UnidoFil: Spaepen, Stijn. Katholieke Universiteit Leuven; Bélgica. Max Planck Institute for Plant Breeding Research; AlemaniaFil: Perticari, Alejandro. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Vazquez, Martin Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular; ArgentinaFil: Wisniewski Dyé, Florence. Université Lyon. Ecologie Microbienne; FranciaFil: Whatkins, Christopher. The Genome Analysis Centre; Reino UnidoFil: Martínez Abarca, Francisco. Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Estación Experimental del Zaidin; EspañaFil: Vanderleyden, Jos. Katholieke Universiteit Leuven; BélgicaFil: Cassan, Fabricio Dario. Universidad Nacional de Rio Cuarto; Argentin

Genome-based reclassification of azospirillum brasilense SP245 as the type strain of azospirillum baldaniorum sp. nov

Azospirillum sp. strain Sp245T, originally identified as belonging to Azospirillum brasilense, is recognized as a plant-growth-promoting rhizobacterium due to its ability to fix atmospheric nitrogen and to produce plant-beneficial compounds. Azospirillum sp. Sp245T and other related strains were isolated from the root surfaces of different plants in Brazil. Cells are Gram-negative, curved or slightly curved rods, and motile with polar and lateral flagella. Their growth temperature varies between 20 to 38 °C and their carbon source utilization is similar to other Azospirillum species. A preliminary 16S rRNA sequence analysis showed that the new species is closely related to A. brasilense Sp7T and A. formosense CC-Nfb-7T. Housekeeping genes revealed that Azospirillum sp. Sp245T, BR 12001 and Vi22 form a separate cluster from strain A. formosense CC-Nfb-7T, and a group of strains closely related to A. brasilense Sp7T. Overall genome relatedness index (OGRI) analyses estimated based on average nucleotide identity (ANI) and digital DNA–DNA hybridization (dDDH) between Azospirillum sp. Sp245T and its close relatives to other Azospirillum species type strains, such as A. brasilense Sp7T and A. formosense CC-Nfb-7T, revealed values lower than the limit of species circumscription. Moreover, core-proteome phylogeny including 1079 common shared proteins showed the independent clusterization of A. brasilense Sp7T, A. formosense CC-Nfb-7T and Azospirillum sp. Sp245T, a finding that was corroborated by the genome clustering of OGRI values and housekeeping phylogenies. The DNA G+C content of the cluster of Sp245T was 68.4–68.6%. Based on the phylogenetic, genomic, phenotypical and physiological analysis, we propose that strain Sp245T together with the strains Vi22 and BR12001 represent a novel species of the genus Azospirillum, for which the name Azospirillum baldaniorum sp. nov. is proposed. The type strain is Sp245T (=BR 11005T=IBPPM 219T) (GCF_007827915.1, GCF_000237365.1, and GCF_003119195.2).Fil: Ferreira, Natalia Dos Santos. Universidade Federal Rural Do Rio de Janeiro; BrasilFil: Sant´Anna, Fernando Hayashi. Universidade Federal do Rio Grande do Sul; BrasilFil: Reis, Veronica Massena. Ministerio da Agricultura Pecuaria e Abastecimento de Brasil. Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaria; BrasilFil: Ambrosini, Adriana. Universidade Federal do Rio Grande do Sul; BrasilFil: Volpiano, Camila Gazolla. Universidade Federal do Rio Grande do Sul; BrasilFil: Rothballer, Michael. Helmholtz Center Munich German Research Center For Environmental Health; AlemaniaFil: Schwab, Stefan. Ministerio da Agricultura Pecuaria e Abastecimento de Brasil. Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaria; BrasilFil: Baura, Valter Antonio. Universidade Federal do Paraná; BrasilFil: Balsanelli, Eduardo. Universidade Federal do Paraná; BrasilFil: Pedrosa, Fabio de Oliveira. Universidade Federal do Paraná; BrasilFil: Passaglia, Luciane Maria Pereira. Universidade Federal do Rio Grande do Sul; BrasilFil: de Souza, Emanuel Maltempi. Universidade Federal do Paraná; BrasilFil: Hartmann, Anton. Ludwig Maximilians Universitat; AlemaniaFil: Cassan, Fabricio Dario. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas; ArgentinaFil: Zilli, Jerri Edson. Ministerio da Agricultura Pecuaria e Abastecimento de Brasil. Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaria; Brasi

La técnica de la microgota como alternativa para el recuento de Azospirillum spp. dentro del protocolo de la Red de Control de Calidad de Inoculantes (REDCAI)

La evaluación de la calidad de los inoculantes comerciales es fundamental para garantizar una adecuada respuesta de los cultivos a la inoculación dentro de un marco de bioseguridad. En este sentido, el objetivo de este trabajo fue la estandarización y validación de la técnica de la microgota para la cuantificación de Azospirillum como metodología alternativa a la técnica de siembra en superficie, propuesta actualmente en el protocolo consenso de la Red de Calidad de Inoculantes, REDCAI. Entre 14 y 25 laboratorios, tanto privados como públicos, participaron de tres ensayos independientes. A partir de ellos se obtuvieron resultados reproducibles y robustos que permiten confirmar que ambas técnicas son equivalentes y concluir que la técnica de recuento por la microgota es una alternativa adecuada para ser incluida dentro del mencionado protocolo consenso.Quality evaluation of commercial inoculants is essential to warrant an adequate crop response to inoculation within a biosecurity framework. In this sense, this work is aimed at standardizing and validating the drop plate method for the enumeration of Azospirillum viable cells as an alternative to the spread plate technique, which is currently proposed in the consensus protocol of the REDCAI network. Between 14 and 25 private and public laboratories participated in three independent trials. We obtained consistent and robust results that allowed to confirm that both techniques are equivalent, concluding that the drop plate method is an alternative enumeration technique that is adequate to be included in the abovementioned consensus protocol.Fil: Di Salvo, Luciana Paula. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Departamento de Biología Aplicada y Alimentos. Cátedra de Microbiología Agrícola; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: García, Julia E.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Puente, Mariana Laura. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Amigo, Josefina Alejandra. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Agronomía y Zootecnia. Departamento de Ecología. Cátedra de Microbiología Agrícola; ArgentinaFil: Anriquez, Analia Liliana. Universidad Nacional de Santiago del Estero; Argentina. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Facultad de Agronomía y Agroindustrias; ArgentinaFil: Barlocco, Claudia. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria; UruguayFil: Benintende, Silvia Mercedes. Universidad Nacional de Entre Ríos. Facultad de Ciencias Agropecuarias; ArgentinaFil: Bochatay, Tatiana. BASF Agricultural Specialities S.A.; ArgentinaFil: Bortolato, Marta Alejandra. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Cassan, Fabricio Dario. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas; ArgentinaFil: Ramirez Castaño, Carolina. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Catafesta, Melina. Bio Nova; ArgentinaFil: Coniglio, Nayla Anahí. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Agrobiotecnológicas; ArgentinaFil: Díaz, Marisa. Rizobacter Argentina; ArgentinaFil: Galian, Liliana Rosa. Universidad Nacional de Lomas de Zamora. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Gallace, María Eugenia. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Agronomía. Recursos Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Confluencia; ArgentinaFil: Garcia, Patricia Graciela. Universidad Nacional de La Pampa. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Confluencia; ArgentinaFil: García de Salamone, Inés E.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Departamento de Biología Aplicada y Alimentos. Cátedra de Microbiología Agrícola; ArgentinaFil: Landa, Marianela. Ministerio de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimento. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria; ArgentinaFil: Liernur, Germán. No especifíca;Fil: Maneiro, María Laura. Rizobacter Argentina S.A.; ArgentinaFil: Massa, Rosana. Stoller Biociencias S.R.L.; ArgentinaFil: Malinverni, Julieta. Ministerio de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimento. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria; ArgentinaFil: Marchessi, Nicolas Carlos. Universidad Nacional de Lomas de Zamora. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Monteleone, Emilia. Nitrasoil Argentina S.A.; ArgentinaFil: Oviedo, Silvina. Rizobacter Argentina S.A.; ArgentinaFil: Pobliti, Lucrecia. Barenbrug Argentina; ArgentinaFil: Portela, Gabriela Rut. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Agronomía; ArgentinaFil: Radovancich, Débora. Laformed S.A.; ArgentinaFil: Righes, Silvia. Marketing Agrícola S.R.L.; Argentin