Estudio del efecto del ácido glicólico de los peeling químicos y la quercetina sobre fibroblastos

Los peeling químicos han visto incrementada su popularidad en los últimos años como tratamiento de múltiples afecciones de la piel y con el principal objetivo de producir un rejuvenecimiento cutáneo; aunque también se han descrito gran variedad de efectos adversos. El ácido glicólico es el agente químico más empleado en estos peeling, debido a su capacidad para penetrar hasta las capas más profundas de la piel. Para valorar su efecto y posibles mecanismos de acción, se va a estudiar la modificación de la viabilidad celular a dosis crecientes de ácido glicólico sobre un cultivo primario de fibroblastos humanos. Se evaluará si existe algún efecto protector por quercetina, debido a su potencial antioxidante, y se determinarán los distintos tipos de muerte celular que expliquen el efecto del ácido glicólico en la piel humana. Los resultados obtenidos muestran que el ácido glicólico induce una acción citotóxica sobre los fibroblastos de forma dosis-dependiente, con un IC50 aproximado de 100 mM, cursando su acción especialmente por un incremento de la apoptosis tardía. La quercetina por su parte disminuyó un 60% el efecto tóxico del ácido glicólico, produciendo un descenso localizado de un 50% en la apoptosis tardía. Los resultados obtenidos muestran que el ácido glicólico induce una acción citotóxica sobre los fibroblastos de forma dosis-dependiente, con un IC50 aproximado de 100 mM, cursando su acción especialmente por un incremento de la apoptosis tardía. La quercetina por su parte disminuyó un 60% el efecto tóxico del ácido glicólico, produciendo un descenso localizado de un 50% en la apoptosis tardía

Protección celular frente a compuestos de gas mostaza por antirradicales libres en fibroblastos

Los compuestos de mostaza son agentes químicos que han sido utilizados en la historia reciente con fines bélicos y quimioterápicos. Son sustancias vesicantes cuyos órganos de acción principales son las mucosas respiratorias y la piel. Al contacto con esta, las mostazas son capaces de producir ampollas, edema, irritación y quemaduras, entre otros. Sus daños a nivel celular se basan en la alquilación del DNA y la liberación de especies reactivas de oxígeno (ROS), produciendo inflamación y muerte celular. En este trabajo se ha estudiado el efecto de los compuestos de mostaza, nitrogenada (NM) y sulfurada (SM), sobre fibroblastos humanos cultivados. El objetivo es determinar la dosis letal 50 (LD50) tras la exposición al gas mostaza durante 3 horas, mediante la técnica de MTT. También, mediante la citometría de imagen, se pretende estudiar los tipos de muerte celular que desencadena la exposición a estos compuestos durante 3 horas a distintas concentraciones

Estudio de los efectos celulares del ácido glicólico sobre cultivo primario de fibroblastos humanos.

Los peelings químicos son procedimientos cosméticos que consisten en el uso de sustancias químicas para provocar lesiones en la piel de forma controlada con el objetivo de mejorar la textura y apariencia de la superficie de la piel. El ácido glicólico (AG) es un alfa-hidroxiácido (AHA) ampliamente utilizado como peeling químico. Con el propósito de estudiar in vitro los efectos del AG y otras sustancias, se ha utilizado un modelo celular de fibroblastos humanos en cultivo. Realizando valoraciones de viabilidad con el reactivo alamarBlue se observó que el AG tamponado (pH≈7) no reduce la viabilidad de los fibroblastos hasta que se utilizan dosis elevadas (100-200 mM), que ya son tóxicas por hiperosmolaridad. Además, no se pueden diferenciar los efectos sobre la viabilidad de los fibroblastos del AG y el ácido tricloroacético (ATC), si se aplican a pHs cercanos. Estos resultados sugieren que la capacidad de los peelings de AG para promover la exfoliación cutánea es debida esencialmente a la elevada acidez y presión osmótica de las soluciones empleadas en estos procedimientos. A pesar de las numerosas mejoras cutáneas que diversos autores atribuyen al uso del peeling de AG, se trata de un procedimiento que mata las células de la piel de manera indiscriminada. Por eso, se ha propuesto un nuevo sistema de peeling químico basado en la acción sinérgica de AG y quercetina, un flavonoide con actividad senolítica que podría aportar selectividad al tratamiento para que actúe preferentemente sobre las células senescentes. Mediante citometría de imagen se vió que al aplicar un tratamiento de AG parcialmente tamponado (pH≈6) sobre fibroblastos, se induce mayoritariamente la muerte celular por necrosis, mientras que al añadir al tratamiento distintas dosis de quercetina (200-600 µM) se ve reducida la población en células necróticas y necroptóticas y aumenta la de células apoptóticas tempranas